一种提取漆树漆酶的方法技术

本发明专利技术涉及一种提取漆树漆酶的方法，属于生物酶领域。先将天然生漆液用丙酮制得丙酮粉末，粉末用浸提液溶解后抽滤，滤液采用葡聚糖凝胶G‑100与CM‑葡聚糖凝胶C‑25或CM‑葡聚糖凝胶C‑50进行柱层析分离后脱盐，最后冷冻干燥得漆树漆酶纯品。本发明专利技术分离技术操作方便快捷，得率较高，所得漆酶纯度好，活性高，可广泛应用于有机污染物处理、纸浆漂白、生物传感器、纺织物染整、食品改良等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种提取漆树漆酶的方法
本专利技术涉及一种提取具有高纯度、高浓度及高活性的漆树漆酶的方法，属于生物酶领域。
技术介绍
漆树漆酶是来自漆树的一种天然的酶，它是生漆催化漆酚聚合的催化剂。漆酶作为一种四铜糖蛋白的氧化还原酶，它通过氧气氧化底物，并且能够催化氧化多种底物。但是由于漆树漆酶的活力偏低且制备成本较高，极大地限制了漆树漆酶在各个领域的应用实施。文献中提取漆树漆酶采用硫酸铵沉淀—阳离子交换层析—阴离子交换层析—冷冻干燥等方法，此提取方法易失去漆酶中的铜原子，影响其结构和活性且提取成本较高，分离时间长，难以大批量生产。专利CN102559621A报道了采用超滤机和喷雾干燥机来制备真菌漆酶的方法，但此方法中的高温会严重影响漆树漆酶的活性。Reinhammar报道的方法中虽然可以避免硫酸铵沉淀来获得漆酶，但是由于溶液中含有大量的多糖和其他小分子杂质，在过CM-sephadexC50柱时会有如下问题：(1))凝胶塌陷，使分离效果变差，柱子也不利于重复使用；(2)一些杂质会挂在柱上堵塞凝胶，使流速越来越慢；这些杂质在柱中呈白色颗粒状，很难除去而影响凝胶的再次使用；此方法凝胶损耗太大，因而会大大本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取漆树漆酶的方法，其特征在于：将天然生漆用丙酮沉淀得到粉末，粉末用浸提液溶解后过滤，得提取液后经柱层析分离，洗脱，收集洗脱液后脱盐，最后冷冻干燥得漆酶纯品。

【技术特征摘要】
1.一种提取漆树漆酶的方法，其特征在于：将天然生漆用丙酮沉淀得到粉末，粉末用浸提液溶解后过滤，得提取液后经柱层析分离，洗脱，收集洗脱液后脱盐，最后冷冻干燥得漆酶纯品。2.如权利要求1所述提取漆树漆酶的方法，其特征在于：所述的浸提液为磷酸盐缓冲溶液，pH值为5.5-6.5。3.如权利要求1所述提取漆树漆酶的方法，其特征在于：所述的柱层析为凝胶柱层析和阳离子柱层析，提取液先加载到凝胶柱层析，后经过阳离子柱层析分离。4.如权利要求3所述提取漆树漆酶的方法，其特征在于：所述凝...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨建红，陈楠，高梁河，
申请(专利权)人：常州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32