数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法技术

本发明专利技术涉及微流控芯片技术领域，具体涉及一种数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法，包括如下步骤：(1)制作数字微流控芯片；所述数字微流控芯片包括上样孔、形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；(2)在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原；(3)加入样本并运行数字微流控芯片，通过荧光检测系统CCD拍照检测荧光信号并进行定量分析。该数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法，反应时间短，检测灵敏度高，外围设备简单，灵活性强，能耗低；能够满足社区医院、远程诊疗等场合的需求，适于构建便携式分析平台；既可以批量分析，也可以分析单个样本，对样本量的适应性强。

【技术实现步骤摘要】
数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法
本专利技术涉及微流控芯片
，具体涉及一种数字微流控芯片及基于其的病原体免疫检测方法。
技术介绍
免疫检测是目前临床检测中最重要的检测手段之一，应用于疾病诊断、病原体筛查、药物检测等方面，在环境监测、食品安全等领域也有广泛应用。上世纪80年代以来，自动化检测技术的引进与改进，使得自动化、高通量免疫分析成为可能，大大促进了免疫检测技术的应用推广。目前的自动化免疫检测仪器存在操作繁琐、反应缓慢、耗时长、试剂及样品消耗量大、检测成本高等缺点。同时，检测设备结构复杂、依赖高精密制造技术、价格昂贵、体积庞大，需要经培训的专业人员进行操作。此外，目前的自动化免疫检测仪器主要为批量化检测而设计，多数仪器只提供2-3个应急检测通道，灵活性差，不适宜零星样本的检测。随着床边检测(point-of-care)、家庭健康检测(Homehealthtests)、远程诊断(tele-diagnosis)等概念的提出，以及社区医院的发展，现有的自动化免疫检测仪器已不能满足现代医疗发展模式的需求。而以胶体金技术为代表的试纸条检测，虽然使用方便，但其检测目标有限且检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种病原体免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制作数字微流控芯片；所述数字微流控芯片包括上样孔、形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；(2)在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原；(3)加入样本并运行数字微流控芯片，通过荧光检测系统CCD拍照检测荧光信号并进行定量分析。

【技术特征摘要】
1.一种病原体免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制作数字微流控芯片；所述数字微流控芯片包括上样孔、形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；(2)在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原；(3)加入样本并运行数字微流控芯片，通过荧光检测系统CCD拍照检测荧光信号并进行定量分析。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述制作数字微流控芯片的具体步骤包括：步骤1：制作下层微流控芯片：(1)在基底层上设置电极层；所述电极层包括形成试剂储池的试剂电极、形成液滴运行通道的输运电极以及形成检测区的检测电极；(2)所述电极层上设置SiO2绝缘层；步骤2：制作上层微流控芯片：(1)所述上层微流控芯片采用ITO导电玻璃，在所述ITO导电玻璃上开设有上样孔，所述上样孔与所述液滴运行通道相通；(2)所述上层微流控芯片上设置试剂储池口，所述试剂储池口和试剂电极共同形成试剂储池；步骤3：将所述上层微流控芯片和下层微流控芯片上下叠合在一起。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中所设置的电极层包括形成废液储池的废液电极和形成PBS池的PBS电极，所述上层微流控芯片上设置有废液储池口和PBS池口，所述废液储池口和所述废液电极共同形成所述废液储池，所述PBS池口和所述PBS电极共同形成所述PBS池；所述废液储池、PBS池分别与所述液体运行通道相通。4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述在所述数字微流控芯片的检测区修饰抗原，包括：(1)采用多层微纳加工技术，在检测电极上的绝缘层表面沉积金膜，并利用湿法刻蚀技术进行图案化；(2)在沉积有金膜的检测电极上包被抗原。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述在沉积有金膜的检测电极上包被抗原或抗体，包括，(1)将抗原用PBS缓冲液稀释至0.1mg/ml；(2)取2.0mg盐酸硫醇亚胺溶于1.0ml蒸馏水中，得到浓度为2.0mg/ml的巯基化试剂；(3)将1.0ml上述步骤(1)的抗原溶液和25μl上述步骤(2)的巯基化试剂混合，室温条件下搅拌反应0.5h；(4)用20mM的PBS缓冲液，其中含0.15MNaCl和1.0mMEDTA，pH为7.2，对步骤(3)所得到的反应液透析48h，期间每2h更换一次透析液，得到巯基化抗原溶液；(5)将镀有金膜的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王云华，郑国侠，卢玲，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21