具有抗肥胖活性的含有发酵香橙渣的食物成分制造技术

本发明专利技术重点研究从利用植物乳杆菌GAVOL‑07发酵的香橙渣乳酸发酵物(YP)中发现新功能特性及其在肥胖大鼠体内与体外的抗肥胖效果。同时，对所述抗肥胖化合物进行了纯化。

【技术实现步骤摘要】
具有抗肥胖活性的含有发酵香橙渣的食物成分
本专利技术涉及一种具有抗肥胖活性的食物成分，它含有利用植物乳杆菌GAVOL-07发酵而成的香橙渣及其纯化活性成分。
技术介绍
肥胖是由于能量摄入过度和低能量消耗造成的。医学上被定义为由于机体能量平衡失调引起整个体内脂肪细胞和脂肪组织蓄积过多的状态。肥胖通常会导致各种代谢性疾病，如糖尿病、心血管疾病、高脂血症、高血压、非酒精性脂肪肝和某些癌症。肥胖是全球最大的健康问题之一，是现代人面临的一个重要的问题。针对肥胖的增加，控制体重的药物和功能性食品越来越受到人们的重视。但是这些不仅昂贵而且不是很有效。最近关于肥胖治疗的研究集中在植物提取物和水果对控制肥胖方面的潜在作用。将其用于治疗肥胖，不仅是优先考虑开发更安全的药物替代品，而且还考虑到对健康有益。特别是使用天然食品，如发酵食品和益生菌，被认为对肥胖的管理更为安全。各种柑橘类水果包括香橼(香橙)是一个很好的植物化学物质的来源，它含有维生素、矿物质、纤维，另外还有丰富的酚类物质，包括酚酸、黄酮类化合物，这些都具有促进健康的作用。目前已经进行了许多抗肥胖的研究。柑橘类水果皮可以避免肥胖，可预防生活方式相关的疾病，可有效降低体重。香橼(香橙)的产地和制造地在韩国。柑橘的产量约1亿3000万吨，用作果汁加工的原料。然而，大量柑橘渣作为果汁生产的主要废弃物，每年产生量高达水果投入量的50％，造成资源浪费，并产生环境问题。它是类黄酮、酚类化合物和精油等生物活性成分的良好来源。许多研究已经尝试利用它们作为膳食纤维(Sudha,M.L.,Baskaran,V.,&Leelavathi,K.(2007)；苹果渣作为膳食纤维和多酚的来源及其对流变特性和蛋糕制作的影响；食品化学，104(2)，686～692)和多酚(Li,B.B.,Smith,B.,&Hossain,M.M.(2006)；柑桔皮中酚类物质的提取；分离纯化技术，48(2)，182～188)的来源。
技术实现思路
一些研究人员研究了香橙的抗肥胖作用，但利用微生物对香橼(香橙)的渣进行发酵的研究尚未进行过。本专利技术的目的是，提供一种具有抗肥胖活性食品成分，它含有利用植物乳杆菌GAVOL-07发酵的香橙渣及其纯化的活性成分。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：本专利技术的实验结果表明，香橙渣发酵物(YP)抑制脂质堆积和成脂转录因子的表达，并增加甘油释放量。YP显示出抗肥胖作用。附图说明通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本专利技术的其它特征、目的和优点将会变得更明显：图1显示不同浓度YP对胰脂肪酶活性的抑制作用；图2显示YP对3T3-L1的脂肪细胞活力的影响；图3代表YP在3T3-L1细胞内对脂肪细胞分化的影响；其中，图3A为不同YP浓度下前脂肪细胞形态学观察结果；图3B为不同YP浓度下3T3-L1脂肪细胞的油红O染色胞内油红O染色的脂质堆积；图4代表YP对3T3-L1细胞的成脂酶表达的影响；图5表示DIO大鼠的体重和器官重量的各组对比结果；其中，图5a为体重增长图；图5b为各器官中脂肪重量增长图；ND：正常饮食,HFD:高脂饮食,YP：香橙渣发酵物(YP)(2ml/kg/day)；图6代表具有抗肥胖的化合物A、B、C的薄层色谱图；其中，第1道为：甲醇沉淀步骤中的甲醇可溶组分，第2道为：酸碱分离步骤中的羧酸组分，第3道为：硅胶色谱中的化合物A，第4道为：硅胶色谱中的化合物B，第5道为：硅胶色谱中的化合物C；图7表示化合物A结构的核磁共振谱(1HNMRSpectrum)结果；图8表示化合物B结构的核磁共振谱(1HNMRSpectrum)结果；图9表示化合物C结构的核磁共振谱(1HNMRSpectrum)结果；图10表示化合物A和化合物B的结构式；图11表示YP的活性化合物的纯化步骤示意图。具体实施方式以下本专利技术的详细说明，通过本专利技术可以付诸实践的特定实施例来阐述，通过充分详细地说明，使得本行业的人能够将本专利技术付诸实施。本专利技术的各种实施例应当被理解为可以彼此不同，但彼此没必要互相排斥。因此下面描述的详细说明，并不应被解释为局限的含义，本专利技术的范围应被理解为专利权利请求范围内记载的内容和与其同等的所有范围。本专利技术重点研究从利用植物乳杆菌GAVOL-07乳酸发酵(LactateFermentate：LE)的香橙渣中找到新的功能特性，以此开发新资源。本专利技术旨在探讨LC抗脂肪细胞的影响。LC抗肥胖的可能性，通过脂肪细胞分化测定，并通过测量饮食诱导肥胖大鼠其脂肪细胞内的脂肪积累、甘油释放、对脂肪酶的表达以及血脂来判定。YP对3T3-L1脂肪细胞和肥胖大鼠具有抗肥胖作用。利用YP对分化的3T3-L1脂肪细胞进行处理，使甘油释放显著增加并使成脂转录因子PPARγ和C/EBPα的蛋白质表达减少。在动物模型中，肥胖大鼠被高脂饮食人工诱导10周。在接下来的8周，实验组用YP(2ml/kg/天)填喂。实验结束时，两组大鼠的体重进行对比，填喂YP组的体重与高脂饮食组(HFD)相比减少13％。同时与HFD组相比，降低肝(180％)、附睾(35％)的脂肪重量。YP防止饮食引起的血清浓度水平的升高，与HFD组相比,TC(37％)、TG(11.6％)、LDL(50％)降低。然而，HDL-C的水平，YP组(22％)比HFD组高。从YP(100g)提取的抗肥胖活性化合物A、B、C用甲醇沉淀净化，酸碱分离(0.25g)，用硅胶柱色谱和核磁共振分析。化合物A、B和C被证实为与吡喃葡萄糖酯结合的绿原酸。这些化合物未曾作为关于柑橘报告的一个对象被报告过。这一结果表明，这些化合物是经乳酸菌发酵的新的生物转化化合物。实施例1.材料与方法1.1准备香橙渣发酵制品在以往的研究中发现，用于香橙渣发酵物(YP)的乳酸菌产生较多纤维素酶和果胶酶，该乳酸菌被命名为植物乳杆菌GAVOL-07(LactobacillusPlantarumGAVOL-07)。植物乳杆菌GAVOL-07于2016年6月29日被保存在韩国微生物保藏中心(KCCM)[保存编号：KCCM11852P]。香橙渣发酵前，分离的菌株新芽在37℃温度下、乳酸杆菌MRS培养基(Difco-BD,Sparks,MD,USA)里，厌氧无菌条件下被反复传代培养48小时。香橙渣的发酵根据实验室优化程序进行。香橙渣，从GAVO农场有限公司购买,糖挑选后压缩。在香橙渣(100g)中加入30ml蒸馏水，然后接种108(CFU)/ml的植物乳杆菌GAVOL-07，在35℃厌氧条件下，发酵48小时。发酵后，通过滤纸过滤。1.2胰脂肪酶(PancreaticLipase：PL)活性的定量研究PL活性根据Bustanji法[参考Y.Bustanji，I.AlMasri，M.Mohammad，M.Hudaib，K.Tawaha，H.Tarazi和H.AlKhatib，“银杏的萜内酯对胰脂肪酶的抑制活动”，酶抑制作用与药物化学报Vol.26，No.4,2011，pp.453-459]，通过比色测定即通过测量对硝基苯酚(p-nitrophenol)的释放量来定量。猪胰脂肪酶II型(Sigma，美国，EC3.1.1.3)悬浮在Tris-HCl缓冲液(2.5mmol，pH值7.4的2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗肥胖活性的食物成分，其特征在于，它含有利用植物乳杆菌GAVOL‑07发酵而成的香橙渣发酵物作为活性成分。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗肥胖活性的食物成分，其特征在于，它含有利用植...

【专利技术属性】
技术研发人员：有日焕，李光钟，金泳辰，金熙星，
申请(专利权)人：家宝农产，
类型：发明
国别省市：韩国,KR