一种柑桔内生真菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体涉及一种柑桔内生真菌，本发明专利技术从柑桔叶片中脉中分离到一株柑桔内生真菌，经微生物分类学鉴定、命名为Hypoxylon sp.nov，该菌株已保藏，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16095，保藏日期为2018年8月8日。本发明专利技术还提供了所述柑桔内生真菌抑制柑桔黑点病致病菌的应用。本发明专利技术提供的柑桔内生真菌，可用于防治柑桔黑点病，抑菌率可以达到68％以上，该方法绿色环保，同时避免了致病菌株产生抗药及耐药性。

【技术实现步骤摘要】
一种柑桔内生真菌及其应用
本专利技术属于微生物
，具体涉及一种柑桔内生真菌及其应用。
技术介绍
柑桔黑点病是目前我国柑桔上发生最普遍、危害比较严重的病害，对果实的外观品质影响非常大。柑桔黑点病是由柑桔间座壳菌Dia-porthecitri引起，目前的防治方法主要是化学农药代森锰锌，使用化学农药对环境不友好，对人的健康也有潜在危害，而且，大量及单一施用代森锰锌使有些菌株产生了抗药及耐药性。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供一种新的柑桔内生真菌，并用于抑制柑桔黑点病的致病菌，防治柑桔黑点病。本专利技术从柑桔叶片中脉中分离到一株柑桔内生真菌，经微生物分类学鉴定、命名为Hypoxylonsp.nov，该菌株已保藏，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101；保藏编号为CGMCCNo.16095，保藏日期为2018年8月8日。本专利技术所述的柑桔内生真菌的固体培养特征为：在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上28℃培养，一周可以长满整个培养皿(Φ90mm)，初期菌落呈现白色，中期菌落呈现咖啡色，后期呈现深褐色，绒毛状平铺于培养基表面。本专利技术所述的柑桔内生真菌的碱基系列如下所示：ITS(internaltranscribedspacer)序列5'-3'GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTACTGAGTTATTAAAACTCCAAACCCTTTGTGAACCTTACCGTCGTTGCCTCGGCGTGAGCTACGGCTACCCTGTAGTTACCCTATAGTTACCCTGTAGTTACCCTGTAGTTACCCTGCAGCTACCCTATAGTTACCCTGTAGTTACCCTGTAGTTACCCTGCAGCTACCCTATAGTTACCCTGTAGCTACCCTGTAGCCGGCTTATGGCCCGCCGAAGGACCGCCAAACTCTTGTTTTTTATTACTGTTTCTCTGAATTGTAAACCTAAATAAGTTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCATTAGTATTCTAGTGGGCATGCCTATTCGAGCGTCATTTCGACCCTTAAGCCCTTGTTGCTTAGCGTTGGGAATCTACGGCGTAGTTCCTCAAAGTTAGTGGCGGAGTTAGGGTACACTCTCAGCGTAGTAATCTCTCTCGCTCGTGTGGTGGCCCTGGCTGCTAGCCGTTAAACCCCTATATTTTCTAGTGGTTGACCTCGGATTAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAct(actingene)蛋白基因序列5'-3'ATGTGCAAGGCCGGTTTCGCCGGTGATGATGCTCCCCGAGCTGTCTTCCGTAAGTGCCATCCTCGCCCAACCGCCCCCGCTTGAGCCCCATCATGGTGGCTTCAAACCTCAACCGCTTTCTAACATATAAACATAGCGTCCATTGTCGGCCGACCCCGTCATCATGGGTAAGTAGTAACTCGCATCATAAACGAGTAGTAATTTGCGCGCAACGGTGTCTAACGATATGCTAGTATCATGATTGGTATGGGCCAGAAGGACTCGTARPB2基因序列(RNApolymeraseIIsecondlargestsubunit)5'-3'GGGGTGACCAGAAGAAGGCGATGAGCTCGACTGCTGGTGTCTCTCAGGTCCTGAACCGATATACTTTCGCCTCGACCCTCTCTCACTTGAGACGAACGAACACACCCATTGGAAGAGACGGGAAGCTCGCGAAGCCTCGACAGCTTCATAATACTCATTGGGGTCTTGTCTGTCCAGCTGAGACGCCCGAAGGCCAGGCCTGCGGACTGGTGAAGAATTTATCGCTGATGTGCTCTATCAGCGTGGGTACATCGACGGATCCTATCGTGGAGTATATGATTACTAGAAATATGGAAGTCCTGGAGGAATACGAACCGATGCGATACCCTAACGCCACCAAGATCTTCCTTAACGGTTCTTGGATTGGTGTACACCAGGATCCCAAGACTCTTGTCAAGGATATCCAGGCGCTTCGTCGGGCCAACCAAATTCCCTCCGAGGTTTCCTTGATCCGCGATATCCGTGATCGTGAGTTCAAGATATTCTCAGATGCAGGTCGTGTCATGCGCCCCTTGTTTGTCGTGCAACAAGAAGATATCCCCGATGATGGCATCAAAAAGGGTACATTGGCCCTTACCAAAGAGATGATCCAGCGACTAGAGGCGGATGTTGAGCTAGACCCCGAAAGCGAGGAATACTTTGGCTGGCAAGGTCTCGTTAACGAGGGTGTAATTGAGTTCCTCGACGCGGAGGAAGAGGAAACGGCTATGATTTGCATGACACCGGAAGACCTAGAGAACTACCGATTGGCCAAACTCGGGTACGAAGTGGTTCAGGATAACGGAGATGAGGTTAACAAACGACTCAAGACCAAGGTCAACCCGTCAACGCACATGTATACTCATTGCGAAATCCATCCTAGCATGCTCTTGGGTATCTGCGCAAGCATTATTCCCTTCCCTGATCACAACCAGTCACCTAGAAACACGTACCAGTCAGCCTAGGGCAAACAAGCCATGGG本专利技术还提供了柑桔内生真菌的应用：通过与柑桔黑点病病原的平板对峙实验，发现该柑桔内生真菌对柑桔黑点病致病菌有一定抑制作用，抑菌率可以达到68％以上。与现有技术相比，本专利技术的柑桔内生真菌可用于防治柑桔黑点病，相比较于现有技术中使用代森锰锌的防治方法，本专利技术更加绿色环保，同时避免了致病菌株产生抗药及耐药性。附图说明图1是本专利技术柑桔内生真菌在PDA平板培养基上的形态图。图2是本专利技术柑桔内生真菌在显微镜下(40倍物镜)的菌丝及孢子形态图。图3是本专利技术柑桔内生真菌基于ITS基因序列构建的炭团菌NJ系统进化树。图4是本专利技术柑桔内生真菌基于ACT蛋白基因序列构建的炭团菌ML系统进化树。图5是本专利技术柑桔内生真菌基于RPB2基因序列构建的炭团菌NJ系统进化树。图6是本专利技术柑桔内生真菌与柑桔黑点病原平板对峙实验的结果图。图7是柑桔黑点病病原菌单独生长结果对照图。具体实施方式下面通过具体实施方式的描述对本专利技术作进一步说明，但这并非是对本专利技术的限制，本领域技术人员根据本专利技术的基本思想本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种柑桔内生真菌，其特征在于，命名为Hypoxylon sp.nov，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16095，保藏日期为2018年8月8日。

【技术特征摘要】
1.一种柑桔内生真菌，其特征在于，命名为Hypoxylonsp.nov，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.16095，保藏日期为2018年8月8日。2.根据权利要求1所述的一种柑桔内生真菌，其特征在于，所述柑桔内生真菌由柑桔叶片中脉中分离得到。3.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：张利平，
申请(专利权)人：浙江省柑桔研究所，
类型：发明
国别省市：浙江,33