一种用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒制造技术

本发明专利技术属于试剂盒技术领域，公开了一种用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒，所述用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒包括：稳定剂、防腐剂、悬浮稳定剂、缓冲液、EDTA、增凝剂、保护剂、交联LBP抗体的聚苯乙烯胶乳微球。本发明专利技术提供的缓冲液甘氨酸的制备方法，具备高效、节能、无三废，节约原材料，提高产品质量等优势，提高酸碱缓冲效果；同时，提供β‑葡聚糖制备纯化方法，不仅不会破坏β‑葡聚糖的分子结构和化学品质，还可有效提升β‑葡聚糖的纯度和收率，提高试剂盒的检测结果。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒
本专利技术属于试剂盒
，尤其涉及一种用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒。
技术介绍
脂多糖(LPS)结合蛋白(LBP)是存在于正常人和动物血清中的一种糖蛋白,人血清中LBP的正常浓度为5～10μg/ml,急性反应期可升高到200μg/ml。LBP与LPS中的类脂A具有高度亲和性,可作为LPS载体蛋白,催化LPS与CD14结合,刺激单核细胞、内皮细胞等,促进TNF等炎性介质的释放；LBP还可作为调理素,促进单核细胞等吞噬调理后的LPS和革兰阴性细菌,故LBP可以调节LPS所致的炎症反应。BPI是LBP的生物拮抗剂,具有与LPB相似的化学结构,也与LPS具有高度亲和性,能够竞争性地与LPS结合,拮抗LBP介导的LPS性炎症反应。然而，现有用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒所用的缓冲液甘氨酸质量不高，影响酸碱缓冲效果；同时，试剂葡聚糖纯度低影响检测结果。综上所述，现有技术存在的问题是：现有用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒所用的缓冲液甘氨酸质量不高，影响酸碱缓冲效果；同时，试剂葡聚糖纯度低影响检测结果。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒，其特征在于，所述用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒包括：稳定剂、防腐剂、悬浮稳定剂、缓冲液、EDTA、增凝剂、保护剂、交联LBP抗体的聚苯乙烯胶乳微球；稳定剂选自KCl、NaCl、CaCl2、Na2CO3、Na2SO4或者K2SO4一种或多种组合；防腐剂为叠氮钠、硫柳汞或者ProClin300；悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖；缓冲液包括：苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为4－7.5g/L，生物缓冲液1的pH值为7.4－7.6；EDTA的浓度为20～100mmo...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒，其特征在于，所述用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒包括：稳定剂、防腐剂、悬浮稳定剂、缓冲液、EDTA、增凝剂、保护剂、交联LBP抗体的聚苯乙烯胶乳微球；稳定剂选自KCl、NaCl、CaCl2、Na2CO3、Na2SO4或者K2SO4一种或多种组合；防腐剂为叠氮钠、硫柳汞或者ProClin300；悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖；缓冲液包括：苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为4－7.5g/L，生物缓冲液1的pH值为7.4－7.6；EDTA的浓度为20～100mmol/L；增凝剂为PEG8000或者β-葡聚糖；聚苯乙烯乳胶微球的表面官能团为氨基、羧基、酰肼、醛基或环氧基，聚苯乙烯乳胶微球的的粒径在200～600nm。2.如权利要求1所述用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒，其特征在于，所述用于检测人类血液中LBP含量的试剂盒检测方法如下：步骤一，试剂准备；(1)试剂A的制备：配置缓冲液：甘氨酸1.9g/L、水苏糖2g/L、明矾0.5g/L、果糖二磷酸钠2g/L、六偏磷酸钠0.4g/L、溶剂为水，PH7.4。在缓冲液中加入牛血清白蛋白2.0g/L、乙二胺四乙酸二钠4.0g/L、PEG80002.8g/L、叠氮钠1.8g/L、氯化钠2.0g/L，搅拌混合均匀，即得试剂A；(2)试剂B的制备：将LBP抗体进行4℃透析，再用缓冲液2将LBP抗体稀释至2mg/ml，得到LBP抗体稀释液；将聚苯乙烯胶乳微球用蒸馏水离心、洗涤3次；用缓冲液2(氨基丁三醇缓冲液75mmol/L，PH7.2)将经过上步洗涤后的聚苯乙烯胶乳微球稀释到质量浓度为1％，再加入质量浓度为0.02％-0.1％的EDC，在室温下搅拌反应30min，反应结束后15000rpm离心洗涤以除去未反应的EDC，然后加入上步得到的LBP抗体稀释液，室温下搅拌反应30min，再加入终止液终止反应，将得到的反应液15000rpm离心，用缓冲液2(氨基丁三醇缓冲液75mmol/L，PH7.2)洗涤沉淀，重复离心洗涤3次，最后加入缓冲液2(氨基丁三醇缓冲液75mmol/L，PH7.2)、加入PEG80002.8g/L、叠氮钠1.8g/L、牛血清白蛋白2.0g/L、乙二胺四乙酸二钠4.0g/L、氯化钠2.0g/L，搅拌混合均匀即得试剂B...

【专利技术属性】
技术研发人员：董学渊，蒋林彬，
申请(专利权)人：上海浩港生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31