一种防控瓜类细菌性果斑病的方法及其专用种子杀菌剂技术

本发明专利技术公开了一种防控瓜类细菌性果斑病的方法及其专用种子杀菌剂。该方法为用那氟沙星浸种。实验证明，那氟沙星可以有效去除葫芦科作物(如西瓜、甜瓜)的种子外部和内部的西瓜嗜酸菌，且在种子萌发的过程中可以被幼苗吸收，降低西瓜嗜酸菌种子—幼苗的传带，有效抑制携带西瓜嗜酸菌的种子出苗发病率，达到防控瓜类细菌性果斑病的目的；同时，那氟沙星不影响种子萌发和幼苗生长；那氟沙星还抑制病原菌(如番茄溃疡病菌、十字花科黑腐病菌)生长的同时，对植物生长促进根际菌(如荧光假单胞菌、枯草芽孢杆菌)生长也无显著影响。那氟沙星可作为种子杀菌剂进行生产推广。本发明专利技术具有重要的应用价值。

A Method for Preventing and Controlling Bacterial Fruit Spot Disease of Melons and Its Specialized Seed Fungicides

The invention discloses a method for preventing and controlling bacterial fruit spot disease of melons and a special seed fungicide. The method is to soak seeds with nafloxacin. Experiments showed that nafloxacin could effectively remove acidophilic bacteria from external and internal seeds of cucurbitaceous crops (such as watermelon and melon), and could be absorbed by seedlings during seed germination, reduce the transmission of acidophilic bacteria from seeds to seedlings, effectively inhibit the incidence of seedling emergence of seeds carrying acidophilic bacteria in watermelon, and achieve the goal of preventing and controlling bacterial fruit spot disease of watermelon. Flefloxacin did not affect seed germination and seedling growth, while it inhibited the growth of pathogens (such as tomato canker and cruciferous black rot), it had no significant effect on the growth of rhizosphere bacteria (such as Pseudomonas fluorescens and Bacillus subtilis). Nafloxacin can be used as seed germicide for production and promotion. The invention has important application value.

【技术实现步骤摘要】
一种防控瓜类细菌性果斑病的方法及其专用种子杀菌剂
本专利技术属于生物
，具体涉及一种防控瓜类细菌性果斑病的方法及其专用种子杀菌剂。
技术介绍
瓜类细菌性果斑病(bacterialfruitblotch，简称BFB)，又称细菌性果腐病，是可造成西瓜和甜瓜减产甚至绝收的毁灭性病害，也是世界性检疫病害。BFB由西瓜嗜酸菌(Acidovoraxcitrulli)引起，具有发病快、传播速度快、爆发力强、危害重等特点，可侵染哈密瓜、南瓜、西葫芦、丝瓜、苦瓜、黄瓜等多种葫芦科作物，给农业安全生产造成严重威胁。自上世纪九十年代瓜类细菌性果斑病在美国的西瓜种植田大爆发以来，近二十年该病在全球多个国家迅速传播，这主要是与西瓜嗜酸菌的种子传带和日益频繁的国际种子贸易相关。瓜类细菌性果斑病在我国北京、新疆、东北、海南、山东、江苏等多个省市均有危害，不仅给我国的西瓜生产造成严重的损失，也对西瓜制种业带来了很大冲击。由于对于瓜类细菌性果斑病尚缺乏抗病品种，田间依靠铜制剂和抗生素的化学防治也面临着西瓜嗜酸菌产生抗药性、防治效果有限的问题。因此，保证种子和幼苗的健康是瓜类细菌性果斑病综合防治的首要环节。然而尽管对制种田采取田间监控、种子检测、种子处理的措施，但通过种子引起的苗期病害发生与流行并没有完全避免。近年来对于西瓜种子传带西瓜嗜酸菌的研究发现：西瓜嗜酸菌可以通过侵染果皮和雌花柱头，从而感染果瓤和种子外部和内部；通过果皮接种的种子外胚乳层感染率达到95％；通过雌花接种的种胚感染率达90％；而且西瓜嗜酸菌在种子存活时间长达7年以上。上述研究表明，西瓜嗜酸菌不仅是种子的表面携带，更重要的是在种子的内部寄藏。种子内部寄藏细菌具有很高的抗逆性，存活时间更长，病害传播能力也更强，同时内部寄藏细菌对种子检测，种子处理造成难度。目前预防西瓜细菌性果斑病的种子传带主要通过种子采后发酵和使用盐酸、Physan20、Tsunami100等处理种子，但处理影响发芽率，尤其是三倍体无籽西瓜种子。干种子的温汤浸种和铜制剂处理虽然降低了苗期发病率，但不能完全去除病原菌，依靠农用抗生素和铜制剂的苗期病害防控效果有限，而且容易导致细菌抗药性的产生。研究发掘新型高效的种子和幼苗处理药剂是当前西瓜制种和育苗生产中迫切需要研究的问题。小分子化合物是分子量小于500，天然或人工合成的化合物，大部分具细胞穿透能力，选择性的作用于蛋白。
技术实现思路
本专利技术的目的是防控瓜类细菌性果斑病。本专利技术首先保护那氟沙星在制备产品中的应用；所述产品的功能可为a1)-a7)中的至少一种：a1)杀灭西瓜嗜酸菌；a2)种子杀菌；a3)葫芦科作物的种子杀菌；a4)防控作物病害；a5)防控葫芦科作物病害；a6)防控由西瓜嗜酸菌引起的病害；a7)防控瓜类细菌性果斑病。本专利技术还保护那氟沙星的应用，可为a1)-a7)中的至少一种：a1)杀灭西瓜嗜酸菌；a2)种子杀菌；a3)葫芦科作物的种子杀菌；a4)防控作物病害；a5)防控葫芦科作物病害；a6)防控由西瓜嗜酸菌引起的病害；a7)防控瓜类细菌性果斑病。上述任一所述的应用中，所述产品可为种子杀菌剂。本专利技术还保护一种产品，其可含有那氟沙星。上述产品中，所述产品可为种子杀菌剂。所述种子可为葫芦科作物的种子。本专利技术还保护上述任一所述产品的的应用，可为a1)-a7)中的至少一种：a1)杀灭西瓜嗜酸菌；a2)种子杀菌；a3)葫芦科作物的种子杀菌；a4)防控作物病害；a5)防控葫芦科作物病害；a6)防控由西瓜嗜酸菌引起的病害；a7)防控瓜类细菌性果斑病。上述任一所述的应用中，所述由西瓜嗜酸菌引起的病害具体可为瓜类细菌性果斑病。上述任一所述应用中，所述西瓜嗜酸菌可为西瓜嗜酸菌NM-4、西瓜嗜酸菌ps196、西瓜嗜酸菌Xu4-14、西瓜嗜酸菌Xu5-14、西瓜嗜酸菌Xu20-15、西瓜嗜酸菌Xu18-7、西瓜嗜酸菌BJ-13、西瓜嗜酸菌pslbtw102、西瓜嗜酸菌Xu3-14、西瓜嗜酸菌Xu2-14、西瓜嗜酸菌Xu8-14和西瓜嗜酸菌Xu3-15中的至少一种。本专利技术还保护一种种子的杀菌方法，可为用那氟沙星处理种子。本专利技术还保护一种防控瓜类细菌性果斑病的方法，可为用那氟沙星处理种子。上述任一所述的方法中，所述那氟沙星处理的时间为20h以上(如20h、24h、30h或40h)。上述任一所述的方法中，所述那氟沙星处理的浓度为10-200μM(如10-100μM、100-200μM、10μM、100μM或200μM)。上述任一所述的方法中，那氟沙星处理种子的方式可为浸种、拌种等常见的种子处理方式。上述任一所述种子可为葫芦科作物的种子。上述任一所述葫芦科作物可为西瓜、甜瓜、哈密瓜、南瓜、西葫芦、丝瓜、苦瓜或黄瓜。上述任一所述那氟沙星的化学式如式(I)所示。实验证明，那氟沙星可以有效去除葫芦科作物(如西瓜、甜瓜)的种子外部和内部的西瓜嗜酸菌，且在种子萌发的过程中可以被幼苗吸收，降低西瓜嗜酸菌种子—幼苗的传带，有效抑制携带西瓜嗜酸菌的种子出苗发病率，达到防控瓜类细菌性果斑病的目的；同时，那氟沙星不影响种子萌发和幼苗生长；此外那氟沙星抑制病原菌(如番茄溃疡病菌、十字花科黑腐病菌)生长的同时，对植物生长促进根际菌(如荧光假单胞菌、枯草芽孢杆菌)生长也无显著影响。由此可见，那氟沙星可作为种子杀菌剂进行生产推广。本专利技术具有重要的应用价值。附图说明图1为小分子化合物的初次筛选结果。图2为小分子化合物对西瓜嗜酸菌GroupI混合菌和GroupII混合菌的评分汇总图。图3为不同浓度小分子化合物对西瓜嗜酸菌Xu3-14的生长影响和对待测菌的生长影响。图4为根据小分子化合物处理发芽种子外部带菌量的减少量和二次筛选所有项目评分总和对77个小分子化合物的分组图。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。下述实施例中的西瓜的品种均为京欣1号。拟南芥均为野生型拟南芥哥伦比亚型。PF培养基：将月示蛋白胨20g、琼脂15g、甘油10mL溶于蒸馏水，用蒸馏水定容至1L，调节pH值至7.3；然后121℃灭菌20min；灭菌后冷却至50℃时，加入14mL浓度为1M的K2HPO4水溶液(无菌)和24mL浓度为1M的MgSO4水溶液(无菌)。NBY培养基记载于如下文献中：Vidaver，A.K.1967.Syntheticandcomplexmediaforrapiddetectionoffluorescenceofphytopathogen-ispseudomonads:Effectofthecarbonsource.Appl.Microbiol.，15:1523-1524.下述实施例中涉及的菌株名称及其来源见表1中第1列和第2列。来源中为专利技术人分离鉴定的菌株均为自行采集，具体采集人、采集时间、采集地点依次见表1中第3列、第4列和第5列。西瓜嗜酸菌的REP-PCR鉴定结果(西瓜嗜酸菌的REP-PCR鉴定方法参考文献如下：R.R.Walcott，A.FessehaiedandA.C.Castro.Dif本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.那氟沙星在制备产品中的应用；所述产品的功能为a1)‑a7)中的至少一种：a1)杀灭西瓜嗜酸菌；a2)种子杀菌；a3)葫芦科作物的种子杀菌；a4)防控作物病害；a5)防控葫芦科作物病害；a6)防控由西瓜嗜酸菌引起的病害；a7)防控瓜类细菌性果斑病。

【技术特征摘要】
1.那氟沙星在制备产品中的应用；所述产品的功能为a1)-a7)中的至少一种：a1)杀灭西瓜嗜酸菌；a2)种子杀菌；a3)葫芦科作物的种子杀菌；a4)防控作物病害；a5)防控葫芦科作物病害；a6)防控由西瓜嗜酸菌引起的病害；a7)防控瓜类细菌性果斑病。2.那氟沙星的应用，为a1)-a7)中的至少一种：a1)杀灭西瓜嗜酸菌；a2)种子杀菌；a3)葫芦科作物的种子杀菌；a4)防控作物病害；a5)防控葫芦科作物病害；a6)防控由西瓜嗜酸菌引起的病害；a7)防控瓜类细菌性果斑病。3.一种产品，其含有那氟沙星。4.如权利要求3所述的产品，其特征在于：所述产品为种子杀菌剂。5.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐秀兰，芦钰，张海军，盖瑞仕拉贾塞卡拉，莎莉米勒，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京,11