一种预防青枯病发生的花生肥料及其制备方法技术

本发明专利技术属于化学制备技术领域，公开了一种预防青枯病发生的花生肥料及其制备方法，制备花生专用有机肥‑无机肥混合肥料培养基；配置供试培养基；筛选拮抗菌；制备含有拮抗菌的肥料。本发明专利技术采用长效有机‑无机复混肥，以此作为培养基，筛选能充分利用花生专用有机肥产生拮抗物质的拮抗菌，能有有效预防花生青枯病的发生，同时综合了花生专用有机肥、无机肥和长效肥的特点，富含有机质和无机养分，养分齐全充足，作基肥一次性施用，在保障玉米花生的基础上，减少了化肥施用量，对农民的要求较低，降低了劳动投入，既节约资源，又保护环境，有效改善土壤微生物平衡，恢复被破坏的土壤生态系统，从而建立起复杂而健康的土壤微生物体系。

A peanut fertilizer for preventing bacterial wilt and its preparation method

The invention belongs to the technical field of chemical preparation, and discloses a peanut fertilizer for preventing bacterial wilt and a preparation method thereof. The peanut fertilizer is used to prepare a special organic fertilizer and inorganic fertilizer mixed fertilizer medium for peanut; the test medium is arranged; the antagonistic bacteria are screened; and the fertilizer containing antagonistic bacteria is prepared. The invention adopts long-acting organic-inorganic compound fertilizer as culture medium, screens antagonistic bacteria which can make full use of the special organic fertilizer for peanut to produce antagonistic substances, can effectively prevent the occurrence of peanut bacterial wilt, at the same time integrates the characteristics of special organic fertilizer, inorganic fertilizer and long-acting fertilizer for peanut, is rich in organic matter and inorganic nutrients, nutrients are complete and sufficient, and is used as one-time base fertilizer. On the basis of guaranteeing maize and peanuts, the amount of chemical fertilizer application is reduced, the requirement for farmers is low, the labor input is reduced, the resources are saved, the environment is protected, the soil microbial balance is effectively improved, the destroyed soil ecosystem is restored, and a complex and healthy soil microbial system is established.

【技术实现步骤摘要】
一种预防青枯病发生的花生肥料及其制备方法
本专利技术属于化学制备
，尤其涉及一种预防青枯病发生的花生肥料及其制备方法。
技术介绍
花生青枯菌主要在土壤中、病残体及未充分腐熟的堆肥中越冬，成为翌年主要初侵染源。在田间主要靠土壤、流水及农具、人畜和昆虫等传播。花生播种后日均气温20℃以上，5cm深处土温稳定在25℃以上约6-8天开始发病，旬均气温高于25℃，旬均土温30℃进入发病盛期。湛江观察：气温27-31℃，春花生4-5月降雨量120-150mm，秋花生9月降雨量达150-200mm，发病严重。该菌通过根部伤口和自然孔口侵入，通过皮层进入维管束，由导管向上蔓延，病菌还可突破导管进入薄壁细胞，把中胶层溶解致皮层烂腐，腐烂后的根系病菌散落至土壤中，再通过土壤流水侵入附近的植株进行再侵染。病菌在土壤中能存活1-8年，一般3-5年仍保持致病力。通常，生产上采用轮作来控制花生青枯发生，但长时间的轮作对人多地少的我国南方不现实，又无有效的化学防治方法，因此花生青枯病的发生在我国南方产区又加重的趋势，对花生产量和质量有严重的影响，专利技术一种操作简便、高效生态的青枯病防治技术是广大南方花生产区的迫切需要。综上所述，现有技术存在的问题是：现有技术中，没有采用长效有机-无机复混肥作为培养基，筛选能充分利用花生专用有机肥产生拮抗物质的拮抗菌，不能有效预防花生青枯病的发生；同时没有综合花生专用有机肥、无机肥和长效肥的特点，在保障花生的基础上，不能减少化肥施用量，造成成本高，不能节约资源和保护环境，没有有效改善土壤微生物平衡，恢复被破坏的土壤生态系统。化学药剂防治青枯菌成本高效果差，对土壤污染严重，轮作防治满足不了南方生产实际的需要，传统的干燥室内只能够通过风扇对物料进行风干，无法对物料的干燥时间与温度进行控制，干燥速率慢。传统的皮带传送装置只能通过电机控制装置的启停，难以控制传送的同步，易造成物料在传输中的洒落，传送不均匀等情况，难以满足肥料生产中的应用。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种预防青枯病发生的花生肥料及其制备方法。本专利技术是这样实现的，一种预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法包括：步骤一，制备花生专用有机肥-无机肥混合肥料培养基；步骤二，配置供试培养基；步骤三，筛选拮抗菌；步骤四，制备含有拮抗菌的肥料。进一步，所述步骤一包括：(1)花生专用有机肥活化；(2)将花生专用有机肥料送入干燥室，使w(H2O)降至15％，完成花生专用有机肥料干燥；干燥室内设置有温度调控模块，通过温度调控模块对干燥的温度进行控制，温度调控模块的模型为：式中：τ为纯滞后时间常数；T为系统时间常数；K为放大倍数；(3)原料混合工段；(4)将混合好的物料直接经皮带输送机送入干式挤压造粒机内造粒成型，皮带输送机对物料进行同步传送，皮带输送机的同步控制方法为：步骤一：采用编码器分别检测两条传送带，A线传送带速度由给定信号控制，由A线编码器检测A线传送带速度并反馈给PLC，同样，B线传送带速度由B线编码器检测并反馈给PLC，构成传送带速度闭环控制系统；步骤二：速度反馈信号是模拟量或脉冲序列信号，PLC通过A/D转换器或高速计数器得出传送带速度相对应的数字信号，和给定信号比较，经PID指令控制，在PID指令中同时赋值给A、B线进行数据处理，输出模拟信号作用于变频器，校正传送带电机速度，稳态时将A、B线传送带速度偏差消除，实现速度完全同步。进一步，所述花生专用有机肥活化过程为：秸秆、粪便有机质经充分腐熟生产花生专用有机肥；其中，秸秆、粪便质量比1：1；将粒径≤20mm、w(H2O)≥30％的花生专用有机肥与碳酸氢铵混合，质量比：碳酸氢铵∶花生专用有机肥≈1∶5，混合均匀，密封存放3～5d即得产品。进一步，所述原料混合工段过程为：无机肥按照成品肥料中占有机质质量分数的15％～30％添加；m(N)∶m(P2O5)∶m(K2O)为18∶8∶10，投入混合槽内进行混合搅拌。进一步，所述步骤二配置方法包括：花生专用有机肥80g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH7.2，115℃灭菌30min；NA培养基：蛋白胨5g，葡萄糖10g，牛肉膏3g，酵母膏0.5g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH7.2，115℃灭菌30min；青枯菌选择性培养基M-SMSA，水解酪蛋白1g，蛋白胨10g，甘油5mL，琼脂20g，蒸馏水1L，pH6.5，121℃灭菌15min，冷却至50℃，每升加入结晶紫5mg，多黏菌素B硫酸盐100g，杆菌肽25mg，氯霉素5mg，青霉素5mg，TZC(2，3，5三苯基四氮)50mg，放线菌酮100mg。进一步，所述步骤三的筛选过程包括：称取1g根际土壤置于装有9mL无菌水的50mL三角瓶中，170r·min-1振荡30min，土壤悬液10倍系列稀释后，涂布于NA和RC培养基平板，30℃培养2-4d；挑取单菌落，纯化后用于筛选拮抗菌。进一步，所述步骤四的制备过程包括：将筛选的拮抗菌分别接种到花生专用有机肥-无机肥混合肥料培养基、供试培养基中，混合，温室下发酵4～6d，拮抗菌含量达到5.0×108CFU·g-1，得到预防青枯病发生的花生肥料。进一步，筛选拮抗菌方法，包括：拮抗细菌的初筛:称取1g根际土壤置于装有9mL无菌水的50mL三角瓶中(含玻璃珠)，170r·min-1振荡30min，土壤悬液10倍系列稀释后，制备到拮抗菌浓度为108cfu·mL-1的菌悬液，涂布于NA和RC培养基平板，30℃培养2-4d；挑取单菌落，用十字交叉法测量抑菌圈直径，求平均值。进一步，筛选拮抗菌方法，进一步包括：拮抗细菌的复筛：将初筛获得的效果较好的拮抗菌于30℃、120r·min-1振荡培养48h即成各菌株发酵液，各2L发酵液离心弃菌体，离心条件为:4℃、10000r·min-1、15min；上清液用6mol·L-1HCl溶液调至pH3.0，4℃静置4～6h；离心收集产生的沉淀；沉淀经甲醇抽提，真空减压浓缩，得到抑菌物质的粗提物；用甲醇溶解抑菌物质的粗提物，定容得到10mg·mL-1提取液；在水平放置的带有青枯病菌的平皿中均匀地放置4只无菌牛津杯(8mm)。同时吸取150μL拮抗菌株提取液加入牛津杯中，每个平板4个处理，每处理重复3次。对照加入等量甲醇。平板于超净工作台内放置4h以确保大部分菌液扩散到琼脂中，之后置于30℃恒温培养箱培养48h，用十字交叉法测量抑菌圈直径，求平均值；选取效果最佳的3株拮抗细菌；拮选取效果最佳的3株拮抗细菌后进行拮抗菌的鉴定，包括进行全细胞脂肪酸分析。本专利技术的另一目的在于提供一种预防青枯病发生的花生肥料。本专利技术的优点及积极效果为：(1)通过对干燥室内进行温度调控，能够更加准确的控制物料的干燥时间和温度，提高了干燥的速率。(2)通过对皮带传送装置采用PLC系统控制进行控制，避免了传送装置上物料的洒落及传送不均匀的情况，提高了肥料制备过程中的工作效率，满足了肥料生产中的应用。本专利技术采用长效有机-无机复混肥，以此作为培养基，筛选能充分利用花生专用有机肥产生拮抗物质的拮抗菌，能有有效预防花生青枯病的发生，同时综合了花生专用有机肥、无机肥和长效肥的特点，富含有机质(w(有机质)≥15％)和无机养分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法包括：步骤一，制备花生专用有机肥‑无机肥混合肥料培养基；步骤二，配置供试培养基；步骤三，筛选拮抗菌；步骤四，制备含有拮抗菌的肥料。

【技术特征摘要】
1.一种预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法包括：步骤一，制备花生专用有机肥-无机肥混合肥料培养基；步骤二，配置供试培养基；步骤三，筛选拮抗菌；步骤四，制备含有拮抗菌的肥料。2.如权利要求1所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤一包括：(1)花生专用有机肥活化；(2)将花生专用有机肥料送入干燥室，使w(H2O)降至15％，完成花生专用有机肥料干燥；(3)原料混合工段；(4)将混合好的物料直接经皮带输送机送入干式挤压造粒机内造粒成型。3.如权利要求2所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述花生专用有机肥活化过程为：秸秆、粪便有机质经充分腐熟生产花生专用有机肥；其中，秸秆、粪便质量比1：1；将粒径≤20mm、w(H2O)≥30％的花生专用有机肥与碳酸氢铵混合，质量比：碳酸氢铵∶花生专用有机肥≈1∶5，混合均匀，密封存放3～5d即得产品。4.如权利要求2所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述原料混合工段过程为：无机肥按照成品肥料中占有机质质量分数的15％～30％添加；m(N)∶m(P2O5)∶m(K2O)为18∶8∶10，投入混合槽内进行混合搅拌。5.如权利要求1所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤二配置方法包括：花生专用有机肥80g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH7.2，115℃灭菌30min；NA培养基：蛋白胨5g，葡萄糖10g，牛肉膏3g，酵母膏0.5g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH7.2，115℃灭菌30min；青枯菌选择性培养基M-SMSA，水解酪蛋白1g，蛋白胨10g，甘油5mL，琼脂20g，蒸馏水1L，pH6.5，121℃灭菌15min，冷却至50℃，每升加入结晶紫5mg，多黏菌素B硫酸盐100g，杆菌肽25mg，氯霉素5mg，青霉素5mg，TZC(2，3，5三苯基四氮)50mg，放线菌酮100mg。6.如权利要求1所述预防青枯病发生的花生肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤三的筛选过程包括：称取1g根际土壤置于装有9mL无菌水...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐秀梅，黄志鹏，吴海宁，熊发前，贺梁琼，蒋菁，钟瑞春，韩柱强，刘菁，唐荣华，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院，
类型：发明
国别省市：广西,45