风湿祛痛中药组合物在制备抗血管新生药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及风湿祛痛中药组合物在制备抗血管新生药物中的用途。本发明专利技术通过风湿祛痛中药组合物在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成实验，MTT、Transwell迁移和侵袭以及粘附实验，大鼠主动脉环血管新生实验，肿瘤血管生成实验，发现风湿祛痛中药组合物可以明显抑制内皮细胞的增殖、迁移、侵袭、粘附和管腔形成能力，明显抑制大鼠主动脉环血管和种植肿瘤血管的生成，表明风湿祛痛中药组合物可用于抗血管新生药物的制备。

Application of Rheumatism and Pain Removing Traditional Chinese Medicine Composition in the Preparation of Antiangiogenesis Drugs

The invention belongs to the technical field of medicine, and relates to the use of rheumatism and pain relieving traditional Chinese medicine compositions in the preparation of anti-angiogenesis drugs. Through the experiments of lumen formation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), migration and invasion of MTT and Transwell, angiogenesis of rat aortic rings, and angiogenesis of tumors, it is found that rheumatism and pain-relieving traditional Chinese medicine compositions can significantly inhibit the proliferation, migration, invasion, adhesion and lumen formation of endothelial cells, and significantly inhibit the ability of endothelial cells to migrate, invade, adhere and lumen formation. The angiogenesis of aortic rings and implanted tumors in rats indicates that rheumatism and pain-relieving Chinese herbal compositions can be used in the preparation of anti-angiogenesis drugs.

【技术实现步骤摘要】
风湿祛痛中药组合物在制备抗血管新生药物中的用途
本申请涉及一种风湿祛痛中药组合物新制药用途，特别是在制备抗血管新生药物中的制药用途。
技术介绍
血管新生是指在原有毛细血管或其后静脉发展而来的新的血管，在血管新生的过程中，内皮细胞起着至关重要的作用。首先血管扩张使得通透性增加，其内大分子血浆蛋白如纤维蛋白等发生渗出；同时血管平滑肌细胞分离，血管壁稳定性降低，血管基底膜遭到降解。在这种情况下，具有增殖能力的内皮细胞会根据趋化因子的浓度梯度向低血管密度区域迁移。内皮细胞渐渐聚集并形成血管条索，而间质细胞包绕着内皮细胞增殖、分化形成新的周细胞、血管平滑肌细胞，最终构建新的血管和血管网络。总的来说，血管新生分以下三步：一、内皮细胞的迁移；二、内皮细胞迁移到目的地后，粘附到该区域的细胞上；三、增殖后的内皮细胞形成网状的小管样结构。血管生成是一个复杂的过程，是由促血管新生因子的调节，主要包括生长因子和血管内皮生长因子(VEGF)，以及促炎性细胞因子、蛋白酶等。研究证实,血管异常增生除了与类风湿关节炎的疾病过程密切相关外，还与肿瘤、糖尿病视网膜病变、银屑病、血管新生性眼病和动脉粥样硬化等多种疾病或病理过程有关。通化金马药业集团股份有限公司生产的风湿祛痛胶囊(国药准字109)，由川黄柏、苍术、威灵仙、鸡血藤、蜂房、乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇、红花、土鳖虫、没药(炒)、乳香(炒)、独活、全蝎、蜈蚣、地龙、羌活、桂枝、姜黄共十九味药材组成的中药复方药物。具有燥湿祛风、活血化瘀通络止痛的功效，用于痹病寒热错杂证，症见肌肉关节痛，肿胀，关节活动受限，晨僵，局部发热；风湿性关节炎、类风湿性关节炎见上述证候者。风湿祛痛胶囊含有的十九味药材中峰房、乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇、土鳖虫、全蝎、蜈蚣、地龙共8味就是虫类药，而虫类药具有活血化瘀、祛风通络的功效。现代研究表明活血通络的虫类中药一般与抑制血管新生的作用有关。前期的研究证明风湿祛痛胶囊具有抗炎、镇痛作用，抑制巨噬细胞活化，降低类风湿关节炎血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量，改善机体对氧自由基的清除能力及改善血液流变学性质有关，从而有效治疗类风湿关节炎，但是其对肿瘤、银屑病等血管新生性疾病的作用如何尚无清楚。
技术实现思路
本专利技术提供了风湿祛痛中药组合物在制备抗血管新生药物中的用途，所述的风湿祛痛中药组合物由黄柏，苍术，威灵仙，鸡血藤，蜂房，乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇，红花，土鳖虫，没药(炒)，乳香(炒)，独活，全蝎，蜈蚣，地龙，羌活，桂枝，姜黄制成。其中，所述的抗血管新生药物为抑制肿瘤血管新生的药物。通过抑制肿瘤血管形成，可以减缓肿瘤生长的速度，以及降低肿瘤浸润转移的发生率。其中，所述的抗血管新生药物为抑制银屑病变组织血管新生的药物。微血管生成异常与银屑病的发生、持续存在及复发有密切关系,在银屑病的发病机制中起重要作用。其中，所述的抗血管新生药物为抑制新生血管性眼病的药物。新生血管性眼病是眼科难治性疾病,也是很多眼病致盲的重要原因,例如糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、早产儿视网膜病变、视网膜中央或分支静脉阻塞、新生血管性青光眼和眼外伤等。由于VEGF家族能明显促进视网膜新生血管生成,故可从不同层次抑制VEGF功能,来预防和治疗新生血管相关性疾病。其中，所述的抗血管新生药物为抑制动脉粥样硬化病变处血管新生的药物。斑块内血管新生是在动脉粥样硬化病变基础上发生的，新生血管又促进粥样硬化病变的发展，在粥样斑块的发生发展中可能是一个核心事件而起着关键性作用。其中，所述的抗血管新生药物，其剂型为药学可接受的任意剂型，包括但不限于，胶囊剂、散剂、片剂、微囊制剂、注射剂、栓剂、喷雾剂或软膏剂等。本专利技术通过风湿祛痛中药组合物在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成实验，MTT、Transwell迁移和侵袭以及粘附实验，大鼠主动脉环血管新生实验，肿瘤血管生成实验等方面的作用，发现风湿祛痛中药组合物可以明显抑制内皮细胞的增殖、迁移、侵袭、粘附和管腔形成能力，明显抑制大鼠主动脉环血管和种植肿瘤血管的生成，表明风湿祛痛中药组合物可用于抗血管新生药物的制备。附图说明图1所示为风湿祛痛中药组合物对大鼠动脉环新生血管的影响。图2所示为风湿祛痛中药组合物对HUVEC增殖活性的影响。图3所示为风湿祛痛中药组合物对HUVECtranswell迁移的影响。图4所示为风湿祛痛中药组合物对HUVECtranswell侵袭的影响。图5所示为风湿祛痛中药组合物对HUVEC粘附的影响。图6所示为风湿祛痛中药组合物对HUVEC管腔形成的影响。具体实施方式以下实例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的保护范围。实施例1风湿祛痛组合物的制备①原料药：黄柏78.0g，苍术78.3g，威灵仙58.6g，鸡血藤78.0g，蜂房38.8g，乌梢蛇58.0g，金钱白花蛇27.0g，蕲蛇18.7g，红花11.6g，土鳖虫7.5g，没药(炒)18.8g，乳香(炒)18.8g，独活19.6g，全蝎18.7g，蜈蚣11.5g，地龙20.0g，羌活19.6g，桂枝10.0g，姜黄12.0g；②取苍术、威灵仙加水湿润，润透后，水蒸气，蒸馏6小时，提取挥发油，挥发油液再进行一次精馏，精馏挥发油备用。姜黄、独活、羌活加水湿润，润透后，水蒸气，蒸馏6小时，提取挥发油，挥发油液再进行一次精馏，精馏挥发油备用。③苍术、威灵仙的药渣与红花加水煎煮三次，加水量依次为10、8、8倍，时间依次为2、1.5、1小时，滤过，合并滤液。④将姜黄、独活、羌活的药渣，与黄柏、鸡血藤加水煎煮三次，加水量依次为10、8、8倍，时间依次为2、1.5、1小时，滤过，合并滤液。⑤药渣加入3-15倍量30-90％乙醇提取2-3次，每次1-2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，用3-10倍量热水(如40-100℃均可)充分溶解(必要时可以加热至沸腾)，趁热过滤，滤液浓缩至稠膏状，备用。⑥将步骤③和步骤④中的滤液加入步骤②蒸馏后的水溶液，浓缩至相对密度为1.30(60-70℃)的浸膏，备用。⑦蜂房、乳香(炒)加入3-10倍量热乙醇(30-60℃)浸泡2—3次，每次1-24小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，浓缩至稠膏状，备用。⑧金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇、土鳖虫、没药(炒)、全蝎、蜈蚣、地龙、桂枝等九味粉碎，过筛，备用。⑨将步骤⑤、⑥、⑦所得稠膏合并，取步骤⑧生药粉干混30分钟，再加入上述浸膏湿混30分钟，混匀，干燥。关于风湿祛痛中药组合物的制备方法，可参考CN201410311509.8，该专利公开的内容以参考形式并入本申请。实施例2风湿祛痛中药组合物对大鼠胸主动脉环血管新生的治疗效果1、实验动物及材料SD大鼠，雄性，180-200g，5只，购自中国食品药品检定研究院，许可证：SCXK(京)2014-0013。风湿祛痛中药组合物由实施例1制备。2、大鼠动脉环实验模型的建立及给药提前高压手术器械一套备用。用基质胶与H-DMEM等量混合，包被48孔板，100μL/孔，并于37℃恒温培养箱中孵育30min，使基质胶凝固；颈椎脱臼处死SD大鼠，并于75％乙醇中10min进行消毒；打开大鼠胸腔，剥离大鼠胸主动脉并取出放于含双抗PBS中，用一次性注射器将胸主动脉中的血液冲洗干净，并用冰P本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.风湿祛痛中药组合物在制备抗血管新生药物中的用途，所述的风湿祛痛中药组合物由黄柏，苍术，威灵仙，鸡血藤，蜂房，乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇，红花，土鳖虫，没药(炒)，乳香(炒)，独活，全蝎，蜈蚣，地龙，羌活，桂枝，姜黄制成。

【技术特征摘要】
1.风湿祛痛中药组合物在制备抗血管新生药物中的用途，所述的风湿祛痛中药组合物由黄柏，苍术，威灵仙，鸡血藤，蜂房，乌梢蛇，金钱白花蛇，蕲蛇，红花，土鳖虫，没药(炒)，乳香(炒)，独活，全蝎，蜈蚣，地龙，羌活，桂枝，姜黄制成。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的抗血管新生药物为抑制肿瘤血管新生的药物。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的抗血管新生药...

【专利技术属性】
技术研发人员：荆宇，刘春芳，林娜，苗艳东，何莲花，
申请(专利权)人：通化金马药业集团股份有限公司，中国中医科学院中药研究所，
类型：发明
国别省市：吉林,22