一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒，其特征在于，包括如下组分：1）用于检测食欲能力相关2个基因5个位点的引物组，食欲能力相关2个基因5个位点信息如表一所示，引物组如表二所示：2）iplex gold reagent kit。本发明专利技术首次采用基质辅助激光电离解析飞行时间质谱（MassARRAY）对本专利提到的5个位点进行基因分型，可以低成本实现大样本的检测，便于该检测在大众之间普及开。

【技术实现步骤摘要】
一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒
本专利技术涉及一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒，属于生物

技术介绍
肥胖根本问题是能量摄入超过能力消耗。部分人群由于食欲旺盛，有意识摄入过多能量，从而导致过多能量的储存，形成肥胖的趋势。这类人群，通过有意识的降低食欲或者适度节食，可以比较理想的实现健康减肥。市面上同类产品很多，存在着以下几个问题：部分产品选择的基因位点与食欲能力关联性不一定很强；食欲控制是多基因多位点调控的，很多同类基因检测的产品只涉及1到2个位点。因此针对食欲基因检测，其检测的基因位点以及个数没有固定的检标准，造成产品的实际价值的下降。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒。本专利技术的技术方案如下：本专利技术的利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒，包括：1)用于检测食欲能力相关2个基因5个位点的引物组，食欲能力相关2个基因5个位点信息如表一所示，引物组如表二所示：2)反应试剂：iplexgoldreagentkit(AGENA公司)，该试剂是专门针对基因组核苷酸多态性检测，反应稳定，高效。该专利技术所使用的检测仪器是MassARRAY核酸质谱分析系统(型号：MassARRAYAnalyzer4System384GT)，数据分析的系统是将质谱高灵敏度和稳定性的化学试剂与先进的数据分析软件相结合，以满足基因组学实验室的检测设计、验证和性能需求。本专利技术属于基因服务类产品，该产品总共检测2个基因的5个位点，其中与食欲能力评估相关的基因位点信息，见表一，该位点是NCBI网站(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)的单核苷酸多态性(SNP)官方编号，可以直接在NCBI的SNP的数据库查询序列以及基因组中的位置。本专利技术涉及的基因位点是从GWAS数据库、pubmed数据库、中国知网等国内外的研究成果中筛选出来的，因此这些基因位点具备一定的权威性和科学性。其中检测的两个基因都是与食欲控制过程中密切相关的。FTO：最早在人群中发现的FTO风险基因携带者表现出食欲和摄食量的增加，更频繁的饮食失控和对高脂饮食的偏好，即使在低能量负荷下，进食量也高于非携带者。最近的一项前瞻性研究发现，经过3年饮食干预的FTO风险碱基携带者人群，其平均体重，甚至可以低于正常基因者。相关研究者通过对3337名年龄8岁至11岁的儿童身高、体重、腰围、食欲变化及饮食习惯方面的调查。发现携带FTO基因的儿童很难产生饱腹感、有过量进食倾向。并且FTO基因对食欲的影响与年龄、性别、社会经济背景或身高体重指数无关。MC4R：黑素皮质素受体-4(melanocortin-4receptor)，作为促肾上腺皮质素的受体，其中枢神经调节功能主要为抑制摄食，从而减少体脂，降低体重，因此，在人类肥胖研究中深受关注。在哺乳动物中，MC4R是下丘脑腹内侧核分泌的一类肽类物质，为黑素皮质素受体家族5个亚型之一。在哺乳动物中，MC4R具有介导瘦蛋白的功能，是一个调节能量平衡与能量动态平衡的重要信号分子，可与其内源性配体黑素皮质素激素或刺鼠色蛋白和agouti相关蛋白相结合，从而在控制食欲和体重稳态中起关键作用。检测基因上位点与肥胖是有直接的研究文献来源：FTO-rs1421085：WheelerE,HuangN,BochukovaEG,etal.Genome-wideSNPandCNVanalysisidentifiescommonandlow-frequencyvariantsassociatedwithsevereearly-onsetobesity[J].NatureGenetics,2013,45(5):513-7.FTO-rs8050136、rs6499640：1.ThorleifssonG,WaltersGD,SteinthorsdottirV,etal.Genome-wideassociationyieldsnewsequencevariantsatsevenlocithatassociatewithmeasuresofobesity.[J].NatureGenetics,2009,41(1):18-24.MC4R-rs12970134:1.ThorleifssonG,WaltersGD,SteinthorsdottirV,etal.Genome-wideassociationyieldsnewsequencevariantsatsevenlocithatassociatewithmeasuresofobesity.[J].NatureGenetics,2009,41(1):18-24.ZobelDP,AndreasenCH,GrarupN,etal.VariantsnearMC4Rareassociatedwithobesityandinfluenceobesity-relatedquantitativetraitsinapopulationofmiddle-agedpeople:studiesof14,940Danes.[J].Diabetes,2009,58(3):757-764.MC4R-rs476828:WheelerE,HuangN,BochukovaEG,etal.Genome-wideSNPandCNVanalysisidentifiescommonandlow-frequencyvariantsassociatedwithsevereearly-onsetobesity[J].NatureGenetics,2013,45(5):513-7.本专利技术首次采用MALDITOF进行食欲相关5个位点的检测，检测时间只需要1天即可；单次反应可以检测384个样本；在同等检测准确度下，该专利技术所耗用的成本要比其他平台更低，因此更能满足市场化需求，更易普及。本专利技术采用MassARRAY平台进行2基因5位点的检测。该平台属于中通量的检测平台，具有低成本、多位点检测，是目前检测SNP主流技术之一。本专利技术首次采用基质辅助激光电离解析飞行时间质谱(MassARRAY)对本专利提到的5个位点进行基因分型，可以低成本实现大样本的检测，便于该检测在大众之间普及开。食欲能力检测属于健康管理的内容，帮助人们加强自我认知，同时提高生活质量，因此并不是作为必需品出现。面对这样的市场需求，低成本高质量的检测便成为服务机构开展相关检测的动力和客户想要检测的诱因。MassARRAY平台是基于物理原理实现准确分型的平台，其准确率到90％以上。同时该平台可以进行单个反应可以分析30个以上的SNP位点，因此相比于绝大多数SNP分型仪器来说，在保证准确率的同时，还大大降低了开发的成本，利于该类平台开发的产品的普及。本专利技术的方法中，主要包括如下创新点:1)本试剂盒所选用的引物，经过多次试验验证，通过筛选不同长度引物以及不同区域的引物得到的特异性高、稳定性好的引物。2)本试剂盒所选择的食欲相关基因位点，是经过国内外文献查阅以及相关调研，综合筛选出2个基因5个位点，有效避免了非相关的基因位点的检测，节约了检测成本和评估复杂度。本专利技术的方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒，其特征在于，包括如下组分：1)用于检测食欲能力相关2个基因5个位点的引物组，食欲能力相关2个基因5个位点信息如表一所示，引物组如表二所示：

【技术特征摘要】
1.一种利用MassARRAY检测食欲能力相关基因位点的试剂盒，其特征在于，包括如下组分：1)用于检测食欲能力相关2个基因5个位点的...

【专利技术属性】
技术研发人员：张冬晓，张海燕，赵振峰，刘兆枫，
申请(专利权)人：山东中科翰康医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37