一种促维生素B12发酵的组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及维生素B12的制备领域，具体涉及一种促维生素B12发酵的组合物及其应用。该种促维生素B12发酵的组合物，主要由如下质量分数的原料组成：复合前体1‑1.55%、复合氨基有机酸2‑10%、复合菌体水解液30‑40%和自来水50‑70%。本发明专利技术的一种促维生素B12发酵的组合物及其应用，解决了发酵不稳、产量低问题，极大的提高了发酵产量，实现了能耗降低、清洁生产的目的，在将促维生素B12发酵组合物应用到维生素B12发酵过程中时，在发酵过程中不断补加促发酵组合物，保证了发酵过程中各种营养成分的供应，保证了发酵效果，有效提高了维生素B12的发酵产量。

A Compound Promoting Vitamin B12 Fermentation and Its Application

The invention relates to the preparation field of vitamin B12, in particular to a compound for promoting vitamin B12 fermentation and its application. The compound for vitamin B12 fermentation is mainly composed of the following raw materials: compound precursor 1 1.55%, compound amino organic acid 2 10%, compound bacterial hydrolysate 30 40% and tap water 50 70%. The compound for promoting vitamin B12 fermentation and its application solve the problems of unstable fermentation and low yield, greatly increase the fermentation output, achieve the purpose of reducing energy consumption and cleaner production. When the compound for promoting vitamin B12 fermentation is applied to the fermentation process of vitamin B12, the compound for promoting vitamin B12 fermentation is continuously added in the fermentation process to ensure various fermentation components in the fermentation process. The supply of nutrients ensured the fermentation effect and effectively increased the fermentation yield of vitamin B12.

【技术实现步骤摘要】
一种促维生素B12发酵的组合物及其应用
本专利技术涉及维生素B12的制备领域，具体涉及一种促维生素B12发酵的组合物及其应用。
技术介绍
维生素B12为钴胺类化合物，临床上主要用于治疗恶性贫血，同时也用于治疗各种神经系统疾病和某些肝脏疾病等。目前维生素B12主要依靠脱氮假单胞菌通过好氧工艺发酵制得。发酵培养基的主要成分包括有机碳源、有机氮源、甜菜碱、少量无机盐等。其中有机物中附带的微量元素营养因子是正常机能与代谢活动不可或缺的因素，作为辅因子参与很多微生物代谢的调控，是微生物代谢调控中的一个关键环节，不同水平的辅因子可以改变特定酶活力的大小，从而重新分配碳架物质在细胞内的流向。此外，微量元素营养因子还参与调节呼吸代谢的酶活性，作为辅酶因子提高微生物对氧的利用率。但是在微生物发酵生产中，不同厂家、不同时间、不同工艺生产的有机培养物中营养因子的含量参差不齐，严重影响了发酵工艺的控制及发酵效果。此外，现有的维生素B12生产过程中会产生大量的菌体蛋白，这些菌体蛋白附加值不高，一直以来都是干燥后作为饲料出售，在生产过程中湿菌体因不易储存而导致霉变造成了极大的浪费并污染了环境，而且菌体干燥更是耗能大户，不利于国家节能减排的政策。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种促维生素B12发酵的组合物及其应用，克服前述现有技术的不足，提供一种应用促使发酵中的菌株生长作用的营养组合物，同时能保证各种微量元素的供应，降低因有机碳氮源中微量元素不稳定造成的发酵问题，能有效提升发酵产量的促维生素B12组合物，采用硫酸水解菌体作为维生素B12的发酵氮源，实现资源的循环利用，从而实现能耗降低、清洁生产的目的。本专利技术解决其技术问题所采取的技术方案是：一种促维生素B12发酵的组合物，主要由如下质量分数的原料组成：复合前体1-1.55%、复合氨基有机酸2-10%、复合菌体水解液30-40%和自来水50-70%；所述复合前体主要由5,6-二甲基苯并咪唑、烟酰胺单核苷酸和甜菜碱按质量比1:2:2组成；所述复合氨基有机酸主要由苏氨酸、甘氨酸和柠檬酸按质量比2-5:1-3:1-3.5组成；所述复合菌体水解液主要由脱氮假单胞菌水解液和酵母膏按质量比2-3:5-8组成。优选的，所述5,6-二甲基苯并咪唑有效成分含量为90-98%，所述烟酰胺单核苷酸有效成分含量为90-95%，所述甜菜碱有效成分含量为90-98%，所述苏氨酸、甘氨酸、柠檬酸的有效成分含量均≥95%。优选的，所述烟酰胺单核苷酸中杂质三氯磷酸的含量为0.001-0.1wt%。优选的，所述脱氮假单胞菌水解液的制备方法为：选用板框过滤后的脱氮假单胞菌湿菌体，按脱氮假单胞菌湿菌体：98%含量浓硫酸为50:1的比例，在陶瓷反应釜中蒸汽加热沸腾10-30min，冷却后与酵母膏混合，即得。一种促维生素B12发酵的组合物在维生素B12发酵中的应用，所述维生素B12发酵包括以下步骤：（1）种子培养基的制备：所述种子培养基的配方质量比组成为：麦芽糖3.0-5.0%、玉米浆1-1.5%、硫酸铵0.05-0.15%、磷酸氢二铵0.05-0.25%、硫酸锰0.08-0.1%、氯化钴0.001-0.003%、氧化镁0.01-0.03%、硫酸锌0.0005-0.0015%、碳酸钙0.1-0.2%和自来水90-95%，所述种子培养基的pH为7.2-7.4；（2）发酵培养基的的制备：所述步发酵培养基的配方质量比组成为：麦芽糖10-12%、玉米浆1-2%、硫酸铵0.05-0.1%、磷酸二氢钾0.04-0.07%、氯化钴0.006-0.008%、氧化镁0.04-0.05%、硫酸锌0.005-0.008%、碳酸钙0.05-0.12%和自来水80-90%，所述发酵培养基的pH为7.5-8.0；（3）种子培养：将步骤（1）的种子培养基灭菌、冷却，接种入脱氮假单胞菌生产菌种，于30-32℃振荡培养至菌种种子液中菌体的光密度值OD700达到0.2-0.3；（4）发酵培养：将步骤（2）的发酵培养基于121℃灭菌30min，将所述促维生素B12发酵组合物按照2.0-4.0wt%的添加量加入到发酵培养基中，然后按照10-15%的接种量接种入步骤（1）中的菌种种子液，于30-32℃进行有氧发酵培养，在发酵过程中补加所述促维生素B12发酵组合物，在补加过程中定时检测甜菜碱含量，维持发酵液中甜菜碱的含量为0.2-0.8%，发酵时间1-9天。本专利技术的有益效果是：与现有技术相比，本专利技术的一种促维生素B12发酵的组合物及其应用具有以下有益效果：（1）本专利技术促发酵组合物各种的微量营养因子添加物，满足了发酵所需营养物的适量组合供应，解决了发酵不稳、产量低问题，极大的提高了发酵产量。（2）本专利技术促发酵组合物中采用硫酸水解菌体作为维生素B12的发酵氮源，可实现资源的循环利用，从而实现了能耗降低、清洁生产的目的。（3）本专利技术在将促维生素B12发酵组合物应用到维生素B12发酵过程中时，在发酵过程中不断补加促发酵组合物，保证了发酵过程中各种营养成分的供应，保证了发酵效果，有效提高了维生素B12的发酵产量。具体实施方式实施例1一种促维生素B12发酵的组合物一种促维生素B12发酵的组合物，主要由如下质量分数的原料组成：复合前体1.5kg复合氨基有机酸5kg、复合菌体水解液35kg和自来水58.5kg；所述复合前体主要由5,6-二甲基苯并咪唑、烟酰胺单核苷酸和甜菜碱按质量比1:2:2组成；所述复合氨基有机酸主要由苏氨酸、甘氨酸和柠檬酸按质量比5:2.4:1.6组成；所述复合菌体水解液主要由脱氮假单胞菌水解液和酵母膏按质量比1:4组成。所述5,6-二甲基苯并咪唑有效成分含量为95%，所述烟酰胺单核苷酸有效成分含量为92%，所述甜菜碱有效成分含量为96%，所述苏氨酸、甘氨酸、柠檬酸的有效成分含量均≥95%，所述烟酰胺单核苷酸中杂质三氯磷酸的含量为0.01wt%。所述脱氮假单胞菌水解液的制备方法为：选用板框过滤后的脱氮假单胞菌湿菌体，按脱氮假单胞菌湿菌体：98%含量浓硫酸为50:1的比例，在陶瓷反应釜中蒸汽加热沸腾15min，冷却后与酵母膏混合，即得。实施例2一种促维生素B12发酵的组合物一种促维生素B12发酵的组合物，主要由如下质量分数的原料组成：复合前体1.2kg复合氨基有机酸7kg、复合菌体水解液32kg和自来水60.8kg；所述复合前体主要由5,6-二甲基苯并咪唑、烟酰胺单核苷酸和甜菜碱按质量比1:2:2组成；所述复合氨基有机酸主要由苏氨酸、甘氨酸和柠檬酸按质量比3.4:2:1.6组成；所述复合菌体水解液主要由脱氮假单胞菌水解液和酵母膏按质量比1:3组成。所述5,6-二甲基苯并咪唑有效成分含量为93%，所述烟酰胺单核苷酸有效成分含量为94%，所述甜菜碱有效成分含量为94%，所述苏氨酸、甘氨酸、柠檬酸的有效成分含量均≥95%，所述烟酰胺单核苷酸中杂质三氯磷酸的含量为0.05wt%。所述脱氮假单胞菌水解液的制备方法为：选用板框过滤后的脱氮假单胞菌湿菌体，按脱氮假单胞菌湿菌体：98%含量浓硫酸为50:1的比例，在陶瓷反应釜中蒸汽加热沸腾10min，冷却后与酵母膏混合，即得。实施例3一种促维生素B12发酵的组合物一种促维生素B12发酵的组合物，主要由如下质量分数的原料组成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促维生素B12发酵的组合物，其特征在于：主要由如下质量分数的原料组成：复合前体1‑1.55%、复合氨基有机酸2‑10%、复合菌体水解液30‑40%和自来水50‑70%；所述复合前体主要由5,6‑二甲基苯并咪唑、烟酰胺单核苷酸和甜菜碱按质量比1:2:2组成；所述复合氨基有机酸主要由苏氨酸、甘氨酸和柠檬酸按质量比2‑5:1‑3:1‑3.5组成；所述复合菌体水解液主要由脱氮假单胞菌水解液和酵母膏按质量比2‑3:5‑8组成。

【技术特征摘要】
1.一种促维生素B12发酵的组合物，其特征在于：主要由如下质量分数的原料组成：复合前体1-1.55%、复合氨基有机酸2-10%、复合菌体水解液30-40%和自来水50-70%；所述复合前体主要由5,6-二甲基苯并咪唑、烟酰胺单核苷酸和甜菜碱按质量比1:2:2组成；所述复合氨基有机酸主要由苏氨酸、甘氨酸和柠檬酸按质量比2-5:1-3:1-3.5组成；所述复合菌体水解液主要由脱氮假单胞菌水解液和酵母膏按质量比2-3:5-8组成。2.如权利要求1所述的一种促维生素B12发酵的组合物，其特征在于：所述5,6-二甲基苯并咪唑有效成分含量为90-98%，所述烟酰胺单核苷酸有效成分含量为90-95%，所述甜菜碱有效成分含量为90-98%，所述苏氨酸、甘氨酸、柠檬酸的有效成分含量均≥95%。3.如权利要求1所述的一种促维生素B12发酵的组合物，其特征在于：所述烟酰胺单核苷酸中杂质三氯磷酸的含量为0.001-0.1wt%。4.如权利要求1所述的一种促维生素B12发酵的组合物，其特征在于：所述脱氮假单胞菌水解液的制备方法为：选用板框过滤后的脱氮假单胞菌湿菌体，按脱氮假单胞菌湿菌体：98%含量浓硫酸为50:1的比例，在陶瓷反应釜中蒸汽加热沸腾10-30min，冷却后与酵母膏混合，即得。5.如权利要求1所述的一种促维生素B12发酵的组合物在维生素B12发酵中的应用，其特征在于：所述维生素B12发酵包括以下步骤：（1）种子培养基的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈凯庆，马杰希，张杰，阮国祥，
申请(专利权)人：山东泓达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37