使用SLIT－ROBO系统的预防或治疗肌肉减少症的组合物技术方案

本发明专利技术涉及使用SLIT－ROBO系统的用于预防或治疗肌肉减少症的组合物，更详细地，包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的基因或其表达蛋白质作为有效成分的用于预防及治疗肌肉疾病或用于改善肌肉功能的组合物。

Composition for the prevention or treatment of myopenia using SLIT-ROBO system

The present invention relates to compositions for the prevention or treatment of myopenia using SLIT-ROBO system, in more detail, including compositions for the prevention and treatment of muscle diseases or for the improvement of muscle function using genes or their expressed proteins in groups composed of free Slit1, Slit2, Slit3, Robo1, Robo2 and their fragments as effective components.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用SLIT－ROBO系统的预防或治疗肌肉减少症的组合物
本申请要求申请日为2016年6月8日的韩国专利申请第10－2016－0071252号及申请日为2017年1月31日的韩国专利申请第10－2017－0013799号的优先权，本申请引用上述说明书的全文。本专利技术涉及使用SLIT－ROBO系统的预防或治疗肌肉减少症的组合物，更详细地，涉及包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的基因或其表达蛋白质；和/或其活化剂作为有效成分的用于预防及治疗肌肉疾病或用于改善肌肉功能的组合物。
技术介绍
Slit蛋白为众所周知的蛋白质，可调节神经系统的发育过程中神经元和轴突的迁移。Slit蛋白作用于Robo受体以调节生理活性，并且已知其在心脏、肺、肾、乳房组织等各种组织中作为调节各种细胞内过程的因子的作用，并且，随着最近报告其在细胞的生长、粘附性能及迁移性能的调节中起重要作用，据报道，Slit蛋白可参与细胞分化过程中的迁移及癌症发生和转移过程。具体而言，据报告，Slit蛋白及Robo蛋白在脊椎动物的胚胎发育步骤表达，Slit3、Robo1及Robo2蛋白的表达在肌肉组织中增加(NeilVargessonet.al.，Mechanismsofdevelopment106.1(2001)据报告，Slit3蛋白在胚胎后肢肌肉组织的肌肉细胞中表达增加，但它只参与迁移(migration)而提及肌肉细胞的分化无关。人类Robo蛋白以Robo1、Robo2、Robo3及Robo4等四种形态存在。据报告，Slit和Robo可发挥各种作用，具体取决于与哪种亚型相互结合，但由于还可根据表达细胞发挥不同的作用，因而对其正在积极研究中。与此相关地，韩国授权专利第10－1617497号公开了Slt3蛋白通过与Robo1或Robo2相互作用显示活性，从而诱导造骨细胞的分化并增加骨形成。肌肉减少症是指骨骼肌的量和功能降低状态。肌肉减少症是由老化、急速异常、营养不良、缺乏身体锻炼、炎症及退行性疾病等多种原因引起，其中，老化及性急速缺乏可能是主要原因，由于医疗技术的发展及多种治疗剂的研发，随着全世界的平均寿命增加老龄化人口增加，因而预计对肌肉减少症的治疗的需求也将持续增加。在肌肉减少症患者中，由于作为肌肉母细胞的干细胞的卫星细胞的募集、活性或增殖的障碍导致的肌肉母细胞(myoblast)的数量减少，肌肉母细胞的增殖及分化减少，由此在组织学水平上，肌肉减少症患者的肌肉的肌纤维大小及数量减少，导致肌肉功能降低。在过去的十年中，随着以美国和欧洲为中心积极开展的对肌肉减少症的流行病学的研究，最近对肌肉减少症的临床重要性的关心剧增。在早期研究中，肌肉减少症因全身衰弱、活动障碍及肌肉减少而导致生活质量的降低等的结果成为主流，然而根据最近发表的研究，除了生活质量以外，还显著增加骨质疏松性骨折的危险。并且，在肌肉减少症患者中，可导致糖尿病及代谢综合症、肥胖、慢性肾功能衰竭、慢性肝功能衰竭等的慢性疾病，最终导致死亡率增加，因此肌肉减少症作为应接受适当的治疗的疾病受到关注。据报告，最近在美国，肌肉减少症患者可发生身体障碍的可能性增加了约1.5倍至3.5倍，从而导致每年185亿美元的社会费用。根据韩国国民健康营养调查，肌肉减少症的发病率在60岁以上的男性为42.0％、女性为42.7％，是非常普遍的疾病，尤其，由于韩国在全球中的老龄化速度最高，因而这将成为日后重要的社会问题。目前，已知运动、蛋白质及热量补充等有助于肌肉减少症，然而对占大部分的肌肉减少症患者的老年人并没有多大帮助，因此急需肌肉减少症治疗剂。但是，目前用于肌肉减少症的治疗剂中，对改善肌肉减少及增进肌肉量呈现直接效果的药物还处于临床实验水平的阶段，还没有最终被美国食品及药物管理局(FDA，FoodandDrugAdministration)批准的药物。因此，为了治疗肌肉减少症，已经尝试了一些将选择性雄激素受体调节剂(selectiveandrogenreceptormodulator)、激活素受体拮抗剂(activinreceptorantagonist)、快速骨骼肌肌钙蛋白抑制剂(fastskeletalmuscletroponininhibitor)等作为肌肉减少症治疗剂的开发，但是还处于初期临床尝试水平。根据肌肉减少症治疗剂趋势的报告，2010年全球肌肉减少症治疗剂市场为约1000万美元(US)，预计2018年将成长为2000万美元规模(“SarcopeniaTherapeutics－PipelineAssessmentandMarketForecaststo2018”，2011.11.17)。并且，在2013年欧明旗下私人保管监管机构InnovativeMeticinesInitiative宣布将投资约5千万欧元用于开发老年人肌肉减少症治疗剂，以作为四大保健研究主题之一。为此，本专利技术者们为了开发对肌肉减少症有直接的治疗效果的治疗剂而研究的结果，发现缺乏Slit蛋白的小鼠的肌肉将减少，Slit蛋白与Robo1或Robo2受体结合使通过Slit－Robo系统与肌肉母细胞的M－钙粘着蛋白(M－cadherin)结合的β－连环蛋白(β－catenin)游离，从而使β－连环蛋白活性化并增加肌细胞生成素(myogenin)的表达，通过诱导肌肉母细胞的分化来促进肌肉的形成。并且，不仅Slit蛋白全长，尤其在处理作为其活性片段的LRRD2蛋白的情况下，也可以通过促进肌肉母细胞的分化来诱导肌肉量的增加，因此通过确认Slit蛋白、Robo蛋白、它们的片段或将其编码的基因可用作预防及治疗/改善肌肉减少症的有效成分来完成了本专利技术。现有技术文献专利文献1：KR10－1617497B1
技术实现思路
技术问题像这样，本专利技术者们发现了Slit蛋白与Robo1或Robo2受体结合使通过Slit－Robo系统与肌肉母细胞的M－钙粘着蛋白结合的β－连环蛋白游离，从而使β－连环蛋白活性化并增加肌细胞生成素的表达，通过诱导肌肉母细胞的分化来促进肌肉的形成。并且，发现了不仅Slit蛋白全长，尤其在处理其活性片段的情况下，也可以通过促进肌肉母细胞的分化来诱导肌肉量的增加，从而完成了本专利技术。因此，本专利技术的目的在于，提供用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物。本专利技术的再一目的在于，提供用于预防及改善肌肉疾病的保健食品或饲料添加物。本专利技术的另一目的在于，提供用于改善肌肉功能的化妆品组合物。本专利技术的还有一目的在于，提供蛋白质检测方法，上述蛋白质检测方法用于提供肌肉疾病诊断信息。本专利技术的又一目的在于，提供筛选肌肉疾病治疗剂的方法。解决问题的手段为了实现上述目的，本专利技术提供用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，上述用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的一种蛋白质；或将其编码的基因或其活化剂(activator)作为有效成分。在本专利技术的一优选实施例中，提供用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，上述用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物包含选自由以下序列1至序列4的氨基酸序列组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分：由序本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.08 KR 10-2016-0071252;2017.01.31 KR 10-2011.一种用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分。2.一种用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，包含选自由以下序列1至序列4的氨基酸序列组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分：由序列1的氨基酸组成的Slit3蛋白；由序列2的氨基酸组成的Robo1蛋白；由序列3的氨基酸组成的Robo2蛋白；以及由序列4的氨基酸组成的LRRD2蛋白。3.根据权利要求2所述的用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，上述Slit3蛋白通过由序列5的碱基序列组成的slit3基因表达。4.根据权利要求2所述的用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，上述Robo1蛋白通过由序列6的碱基序列组成的robo1基因表达。5.根据权利要求2所述的用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，上述Robo2蛋白通过由序列7的碱基序列组成的robo2基因表达。6.根据权利要求2所述的用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，上述LRRD2蛋白通过由序列8的碱基序列组成的基因表达。7.一种用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，包含选自由Slit及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因的活化剂作为有效成分。8.一种用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，包含选自由Robo及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因的活化剂作为有效成分。9.根据权利要求1、2、7或8所述的用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，上述肌肉疾病是由肌肉功能降低、肌肉萎缩或肌肉退化引起的肌肉疾病。10.根据权利要求9所述的用于预防及治疗肌肉疾病的药物组合物，其特征在于，上述肌肉疾病为选自由张力缺乏、肌肉萎缩症、肌肉营养不良症、肌无力症、恶病质及肌肉减少症组成的组中的一种以上。11.一种用于预防及改善肌肉疾病的保健食品，其特征在于，包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因或它们的活化剂作为有效成分。12.一种用于预防及改善肌肉疾病的保健食品，其特征在于，包含选自由以下序列1至序列4的氨基酸序列组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分：由序列1的氨基酸组成的Slit3蛋白；由序列2的氨基酸组成的Robo1蛋白；由序列3的氨基酸组成的Robo2蛋白；以及由序列4的氨基酸组成的LRRD2蛋白。13.一种用于改善肌肉功能的化妆品组合物，其特征在于，包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因或它们的活化剂作为有效成分。14.一种用于改善肌肉功能的化妆品组合物，其特征在于，包含选自由以下序列1至序列4的氨基酸序列组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分：由序列1的氨基酸组成的Slit3蛋白；由序列2的氨基酸组成的Robo1蛋白；由序列3的氨基酸组成的Robo2蛋白；以及由序列4的氨基酸组成的LRRD2蛋白。15.一种用于改善肌肉功能的饲料添加物，其特征在于，包含选自由Slit1、Slit2、Slit3、Robo1、Robo2及它们的片段组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因或它们的活化剂作为有效成分。16.一种用于改善肌肉功能的饲料添加物，其特征在于，包含选自由以下序列1至序列4的氨基酸序列组成的组中的一种蛋白质或将其编码的基因作为有效成分：由序列1的氨基酸组成的Slit3蛋白；由序列2的氨基酸组成的Robo1蛋白；由序列3的氨基酸组成的Robo2蛋白；以及由序列4的氨基酸组成的LRRD2蛋白。17.一种用于提供肌肉疾病诊断信息的蛋白质检测方法，其特征在于，包括：步骤i)，测量来源于作为实验组的受试者的试样中由序列1氨基酸序列组成的Slit3蛋白的表达水平；步骤ii)，将上述步骤i)中测量的Slit3蛋白的表达水平与作为对照组的来源于正常对象的试样的Slit3蛋白的表达水平进行比较；以及步骤iii)，在与对照组相比，在上述步骤ii)中比较的实验组的Slit3蛋白的表达水平降低的情况下，判断实验组为肌肉疾病。18.根据权利要求17所述的用于提供肌肉疾病诊断信息的蛋白质检测方法，其特征在于，上述肌肉疾病是由肌肉功能降低、肌肉萎缩或肌肉退化引起的肌肉疾病。19.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：高正敏，
申请(专利权)人：财团法人峨山社会福祉财团，蔚山大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国,KR