一种基于斑马鱼蛋白生物响应的水环境健康风险评价方法技术

本发明专利技术公开了一种基于斑马鱼蛋白生物响应的水环境健康风险评价方法。本发明专利技术首先进行斑马鱼暴露实验，然后通过液质联用技术同时定量分析斑马鱼体内多种蛋白生物标志物，再以斑马鱼蛋白响应指数对生物标志物响应进行统一量化，从而确定暴露水体的健康风险等级和程度。本发明专利技术通过测定水环境介质暴露下斑马鱼体内的多种蛋白生物标志物的差异表达，并将各生物标志物量化整合成斑马鱼蛋白响应指数以定量地表征水环境的健康风险。

A Risk Assessment Method for Water Environment Health Based on Biological Response of Zebrafish Protein

The invention discloses a water environmental health risk assessment method based on zebrafish protein biological response. The invention first carries out zebrafish exposure experiments, then quantitatively analyses various protein biomarkers in zebrafish by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), and quantifies the response of biomarkers by zebrafish protein response index, thereby determining the health risk level and degree of the exposed water body. The invention quantitatively integrates various biomarkers into zebrafish protein response index to quantify the health risk of water environment by measuring the differential expression of various protein biomarkers in zebrafish exposed to water environment medium.

【技术实现步骤摘要】
一种基于斑马鱼蛋白生物响应的水环境健康风险评价方法
本专利技术属于环境监测与风险评估
，涉及一种以蛋白生物效应为指标的水环境健康风险评价方法，尤其涉及一种综合量化水环境介质暴露下斑马鱼(Daniorerio)体内多种蛋白生物标志物的差异表达，并以此定量评估水环境健康风险的方法。
技术介绍
水环境是人类生存发展的重要组成部分，然而，自1993年以来，在我国已发生的1000多起重、特大突发环境事件中约53％是水污染事故。与日益严峻的水环境污染风险相比，我国水环境风险的评价能力相对薄弱。健康风险评价起源于20世纪80年代，以风险度作为评价指标，定量评价环境污染对人体健康的危害，估算有害因子引起人体健康危害的概率。目前应用的水环境健康风险评价模型主要是基于污染物浓度的模型，如美国环保署推荐的健康风险评价模型，它的评价对象是水环境中对人类造成健康风险的有毒污染物，即根据污染物的浓度水平及其已有的毒性试验评估不同类型化合物的健康风险。然而，在实际应用中，这类基于污染物浓度指标的健康风险评价方法存在着一定的不足：一、实际应用中往往无法鉴定水环境中的所有污染物；二、并不是所有污染物都具有相应的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于斑马鱼蛋白生物响应的水环境健康风险评价方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)斑马鱼暴露实验：斑马鱼暴露实验在恒温且恒光照的条件下进行，所述恒温温度为27.5℃‑29.5℃，所述恒光照的光、暗时间每天分别为14h和10h。暴露分为对照组和实验组，每组放置成年斑马鱼雌雄各10条，且雌雄分开暴露于装置内。暴露期间，每天喂食一次，并更换装置内一半的水。暴露结束后，对每条鱼称重后各加1mL超纯水进行匀浆。匀浆液用离心机2500×g离心10min后，取上清液保存于‑80℃冰箱内待分析。(2)液质联用技术同时定量分析斑马鱼体内多种蛋白生物标志物：分析用的是2.1mm×50mm、1.7μm的Wat...

【技术特征摘要】
1.一种基于斑马鱼蛋白生物响应的水环境健康风险评价方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)斑马鱼暴露实验：斑马鱼暴露实验在恒温且恒光照的条件下进行，所述恒温温度为27.5℃-29.5℃，所述恒光照的光、暗时间每天分别为14h和10h。暴露分为对照组和实验组，每组放置成年斑马鱼雌雄各10条，且雌雄分开暴露于装置内。暴露期间，每天喂食一次，并更换装置内一半的水。暴露结束后，对每条鱼称重后各加1mL超纯水进行匀浆。匀浆液用离心机2500×g离心10min后，取上清液保存于-80℃冰箱内待分析。(2)液质联用技术同时定量分析斑马鱼体内多种蛋白生物标志物：分析用的是2.1mm×50mm、1.7μm的WatersBEHC18柱，并在前端串联一根VanGuardTM保护柱，所述VanGuardTM保护柱为2.1mm×50mm、1.7μm的C18柱。流动相用二元洗脱液，A路水，B路乙腈，均添加体积浓度为0.1％的氨水，流速为0.3mL/min，进样量为10μL。设置的梯度是：0min，5％B；4min，25％B；8min，95％B；10min，5％B，所述比例均为体积比。质谱使用选择反应监测模式。毛细管电压为1.07kV。氮气用作脱溶剂气，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨方星，张莹，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33