一种定量检测碱性磷酸酶活性的方法技术

本发明专利技术提供了一种定量检测碱性磷酸酶的方法，其包括如下步骤：制备碳量子点；将二乙醇胺缓冲液、氯化镁溶液、抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐、碳量子点和去离子水混匀，得到测试液；将所述测试液均为若干份，除一份不加碱性磷酸酶作为对照样外，其余各份中分别加入不同已知浓度的碱性磷酸酶，混匀后，均在37℃下进行孵育；孵育结束后，分别进行荧光光谱测试，得到碱性磷酸酶的活性和荧光强度关系式。与现有技术相比，本发明专利技术具有如下的有益效果：1、采用碳量子点作为荧光探针，具有制备方法简单、成本低、绿色环保等优势；此外，该碳量子点无需复杂的修饰或使用浓酸处理；2、ALP检测方法较为简单，只需将C‑dots，ALP，2‑AAP，缓冲溶液混合孵育即可测定。

【技术实现步骤摘要】
一种定量检测碱性磷酸酶活性的方法
本专利技术涉及一种定量检测碱性磷酸酶活性的方法，属于酶检测

技术介绍
碱性磷酸酶(简称ALP)广泛存在于哺乳动物体内，它具有催化磷酸酯水解的能力。此外，ALP通常被用作临床诊断的重要生物标志物，因为其含量异常与许多疾病如骨病，糖尿病，前列腺癌和肝功能障碍密切相关。因此，开展高灵敏及高选择性的ALP检测方法的研究具有重要意义。常用于ALP检测的方法有荧光光谱法、比色法、电化学法及化学发光法等。其中，荧光光谱法因其具有灵敏度高、操作简单和响应快等优势，引起人们广泛关注。荧光光谱法检测ALP大多基于有机荧光探针、半导体量子点、荧光共聚物和贵金属纳米簇等作为荧光探针。但是有机荧光探针水溶性较差，半导体量子点毒性较大，荧光共聚物制备步骤复杂且费时，贵金属纳米簇成本较高且稳定性差。因此，发展新型荧光探针用于ALP检测具有重要的意义。C-dots具有水溶性好、合成方法简单、成本低及稳定性好等优势，在ALP荧光光谱检测表现出巨大的潜力。有研究利用C-dots-Cu2+-PPi体系成功实现了ALP的荧光光谱法检测；但所用的碳量子点的制备需要利用浓酸处理方法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定量检测碱性磷酸酶活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：制备碳量子点；将二乙醇胺缓冲液、氯化镁溶液、抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐、碳量子点和去离子水混匀，得到测试液；将所述测试液均为若干份，除一份不加碱性磷酸酶作为对照样外，其余各份中分别加入不同已知浓度的碱性磷酸酶，混匀后，均在37℃下进行孵育；孵育结束后，分别进行荧光光谱测试，得到碱性磷酸酶的活性和荧光强度关系式，如式I所示：(F0‑F)/F0＝0.004+0.070c   I；式中：c为碱性磷酸酶的活性，单位是mU mL‑1，F0为空白样的荧光强度值，F为测试样的荧光强度值，线性相关系数为0.994。

【技术特征摘要】
1.一种定量检测碱性磷酸酶活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：制备碳量子点；将二乙醇胺缓冲液、氯化镁溶液、抗坏血酸-2-磷酸三钠盐、碳量子点和去离子水混匀，得到测试液；将所述测试液均为若干份，除一份不加碱性磷酸酶作为对照样外，其余各份中分别加入不同已知浓度的碱性磷酸酶，混匀后，均在37℃下进行孵育；孵育结束后，分别进行荧光光谱测试，得到碱性磷酸酶的活性和荧光强度关系式，如式I所示：(F0-F)/F0＝0.004+0...

【专利技术属性】
技术研发人员：逯一中，倪朋娟，陈传霞，姜媛媛，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：山东,37