一种耐药异质性循环肿瘤细胞捕获与基因分析的试剂、装置和方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种对顺铂耐药的循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体以及所述核酸适体修饰的磁珠。本发明专利技术所述核酸适体或磁珠与现有技术已知的其它核酸适体或磁珠组合使用可提高循环肿瘤细胞的捕获效率，进一步利用微孔芯片二次纯化可提高循环肿瘤细胞的纯度，满足基因分析的要求。还特别提供了一种高效捕获耐药异质性非小细胞肺癌循环肿瘤细胞、进行基因分析的方法及试剂。

【技术实现步骤摘要】
一种耐药异质性循环肿瘤细胞捕获与基因分析的试剂、装置和方法
本专利技术涉及生物检测领域，特别一种基于微孔芯片的核酸适体修饰的磁珠组合及其用于耐药异质性循环肿瘤细胞的捕获与基因分析的方法。
技术介绍
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。其中，非小细胞肺癌分为鳞癌，腺癌和大细胞癌,占肺癌总数比例的85％。目前，非小细胞肺癌的治疗方法主要是手术切除，化疗和放疗。由于肿瘤容易复发和转移，采取治疗手段后实时监测肿瘤进程，才能及时修改治疗方案，有效提高患者的生存率。循环肿瘤细胞是从肿瘤原发病灶或转移灶中脱落并进入血液循环系统的肿瘤细胞。通过计数外周血中循环肿瘤细胞的数目可以实时监测癌症的发展进程，评估患者的预后，尤其适用于手术切除肿瘤病灶的患者无法提供病理切片的情况。但是，循环肿瘤细胞的数目是非常稀少的，1mL血液中仅仅有1-10个循环肿瘤细胞，同时，白细胞的数目为106-107左右。另外，循环肿瘤细胞存在异质性，造成不同患者，同一患者不同部位的肿瘤细胞，甚至同一部位不同肿瘤细胞之间的大小，蛋白表达量等均有不同。同时，肿瘤细胞异质性也是细胞产生耐药性的主要原因之本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与顺铂耐药的循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体，其特征在于所述核酸适体为ap2，其碱基序列如SEQ ID NO:2所示。

【技术特征摘要】
1.一种与顺铂耐药的循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体，其特征在于所述核酸适体为ap2，其碱基序列如SEQIDNO:2所示。2.一种用于循环肿瘤细胞捕获的磁珠，其特征在于所述磁珠连接有如权利要求1所述的核酸适体。3.一种核酸适体组，其至少包含两种核酸适体，其中至少一种核酸适体与顺铂耐药循环肿瘤细胞具有高亲和力，并且至少一种核酸适体与非耐药循环肿瘤细胞具有高亲和力；其中所述与顺铂耐药循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体为ap2，其碱基序列如SEQIDNO:2所示。4.一种磁珠组，其特征在于至少包含两种磁珠，其中至少一种磁珠连接有与顺铂耐药循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体，并且至少一种磁珠连接有与非耐药循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体；其中所述与顺铂耐药循环肿瘤细胞具有高亲和力的核酸适体为ap2，其碱基序列如SEQIDNO:2所示。5.如权利要求1-4任一中的核酸适体，其特征在于：将所述核酸适体进行如下修饰或改造，得到所述核酸适体的衍生物：a)将所述核酸适体删除部分或增加部分互补的核苷酸，得到的与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物。b)将所述核酸适体进行核苷酸取代或部分修饰，得到的与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物。c)将所述核酸适体的骨架改造为硫代磷酸酯骨架，得到的与所述核酸适体具有相同功能的核酸适体的衍生物。d)将核酸适体改造为肽核酸，得到...

【专利技术属性】
技术研发人员：方晓红，董再再，赵立波，张振，徐丽，周卫，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11