一种动物鲜精低温稀释液及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于动物繁殖技术领域，具体涉及一种动物鲜精低温稀释液及其制备方法与应用。所述的动物鲜精低温稀释液包含如下组分：葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、卵黄、脱脂牛奶、维生素A、维生素D、维生素E和水。该稀释液可以将澳洲白绵羊精液以液态形式低温0～5℃条件下保存至1～2天，可以达到人工授精的要求，提高鲜精保存品质，从而提高优良种公羊的利用率并获得高的母羊受胎率，解决了优秀种公羊采精后远距离运输问题，且该稀释液制作方法简单，原料成本低，可操作性强，便于生产中大规模推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种动物鲜精低温稀释液及其制备方法与应用
本专利技术属于动物繁殖
，具体涉及一种动物鲜精低温稀释液及其制备方法与应用。
技术介绍
人工授精技术对提高公畜利用率，加快品种改良，降低了饲养管理成本，防止各种疾病传播，提高受胎率和进行远距离交流、运输等方面有着重要价值。目前，肉牛的人工授精技术在大部分地区已经实施，羊的人工授精技术只是在个别规模化羊场采用，如果开展优质肉羊杂交改良，需要由种羊场向较远距离羊场或养羊户输送精液，羊的冷冻精液人工授精技术虽然有个别羊场为了加速品种改良而应用，但因受胎率过低，未能广泛开展，目前仍需低温液态保存和运输。随着肉羊产业的发展，优质肉羊品种的杂交利用发展迅速，但由于种羊数量有限，仍需人工授精技术来提高种公羊的利用率，低温精液稀释液的研制和推广有效改善精液保存效果，减少精液浪费。因此，人们针对稀释液成份、制作过程等开展相关研究。国内关于绵羊精液液态保存的相关有效突破报道不是太多，并且目前没有针对澳洲白绵羊鲜精低温保存的报道。申请号为201510046734.8，申请名称为“一种绵羊鲜精保存稀释液及其应用”的中国专利申请公开了一种绵羊鲜精保存稀释液，其主要成份在常规液中加入虾青素。赵晓娥等(赵晓娥,王光亚.布尔山羊精液保存条件的试验研究[J].动物医学进展,1999(2):31-33.)对不同条件下，用不同成分的黧液保存布尔山羊精液的效果进行了对比试验，其中，含30g/L葡萄糖、lg/LEDTA、13g/mL柠檬酸钠和5％卵黄的稀释液在4℃外界环境条件下对布尔羊精液进行保存，保存96h后活力可以达到52％。李助南等(李助南,郭良辉,袁微,等.不同稀释液对山羊精液的保存效果[J].湖北农学院学报,2001,21(3):217-219.)利用不同配方稀释液保存山羊精液，比较不同理化条件下稀释液的保存效果，其中，V号稀释液以5倍稀释，在常温条件下保存49.7h后绵羊精子活力不小于30％；在5℃条件下保存58.0h后绵羊精子活力不小于30％，精液受胎率为81.4％。周佳勃(周佳勃.山羊体外受精和显微受精及相关问题的研究[D].东北农业大学,2003.)在Androhep稀释液中添加卵黄，对精子进行卵黄包被处理，保存8天精子活力不小于30％，但是保存9天后，精子的受精能力以及受精后的胚胎发育能力却显著降低。高维强(用MES稀释液液态保存山羊精液果糖代谢的研究[D].山东农业大学，2012:59-60)用所研制的MES稀释液，以及采用卵黄包被处理后，在5℃条件下保存16天后绵羊精子活力仍可维持在30％以上。孟娜娜等(孟娜娜,孙树春,王寒阳,等.绵羊精液4℃液态保存的稀释液配方优化研究[J].中国畜牧杂志,2015,51(5):34-38.)研究绵羊精液液态保存的稀释液配方优化研究，结果表明，以0.375％的大豆卵磷脂取代绵羊精液低温保存稀释液中的卵黄，对精子保存效果最好。赵金红等(赵金红,彭海梅,周鹏,等.酉州乌羊精液品质评定及稀释液配方研究[J].中国草食动物科学,2014,30(s1):6-10.)研究筛选适合酉州乌羊精液的优良稀释液配方，其中，稀释液Ⅲ号(葡萄糖1.25g，果糖1.25g、柠檬酸钠1.2g，EDTA0.24g，NaHCO30.125g，HEPES0.90g，PVA0.25g，牛磺酸0.26g、青霉素和链霉素各10万单位)适用于精液保存。糖类物质可分为单糖、双糖和多糖等。其中，单糖中的果糖、葡萄糖能够穿过精子质膜进入精子，在质膜内进行进一步分解代谢产生能量，为精子提供能量；其它的糖类比如蔗糖、海藻糖和葡聚糖、棉子糖，这些糖虽不能穿过精子的质膜，但是这类糖类在外界为精子提供一定的渗透压，生理上使细胞适度脱水，从而降低胞内冰晶形成几率，并且能与质膜磷脂相互作用，进而提高精子质膜稳定性，有利于精子存活。现在研究中，大多精子稀释液配方成份较多，操作复杂。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足与缺点，本专利技术的首要目的在于提供一种动物鲜精低温稀释液，该稀释液可以将动物精液以液态形式低温0～5℃条件下保存至1～2天，可以达到人工授精的要求，提高了鲜精保存品质，该稀释液制作方法简单，原料成本低，可操作性强，便于生产中推广应用。本专利技术的另一目的在于提供上述动物鲜精低温稀释液的制备方法。本专利技术的再一目的在于提供上述动物鲜精低温稀释液的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种动物鲜精低温稀释液，包含如下组分：葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、卵黄、脱脂牛奶、维生素A、维生素D、维生素E和水，其中，葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、维生素A、维生素D、维生素E和水的质量比为(2～5)：(2～5)：(50×10-3～100×10-3)：(30×10-3～60×10-3)：(1×10-3～1.25×10-3)：(400×10-6～600×10-6)：(200×10-6～400×10-6)：(200×10-6～400×10-6)：100，卵黄、脱脂牛奶和水的体积比为(8～12)：(8～12)：100；所述的动物鲜精低温稀释液的制备方法，包含如下步骤：(1)将葡萄糖和柠檬酸钠溶于水中，得到基础液；(2)将卵黄、脱脂牛奶、青霉素、链霉素和恩诺沙星与步骤(1)制得的基础液混合均匀，得到混合液；然后再加入维生素A、维生素D和维生素E，混合均匀，得到动物鲜精低温稀释液；步骤(2)中所述的脱脂牛奶优选经90～95℃水浴灭菌10min；步骤(2)中所述的混合液的制备方法优选为：将卵黄和脱脂牛奶依次加入步骤(1)制得的基础液中混合均匀，然后加入青霉素、链霉素和恩诺沙星，混合均匀，得到混合液；或将卵黄和脱脂牛奶依次加入部分步骤(1)制得的基础液中混合均匀，得到A液，将青霉素、链霉素和恩诺沙星加入剩余步骤(1)制得的基础液中混合均匀，得到B液，将B液加入到A液中，混合均匀，得到混合液；所述的动物鲜精低温稀释液在动物鲜精保存领域中的应用；所述的动物优选为澳洲白绵羊；所述的动物鲜精低温稀释液在动物鲜精保存领域中的应用，包含如下步骤：将动物鲜精低温稀释液缓慢加入到动物新鲜精液中，混合均匀，缓慢降温至0～5℃，然后置于0～5℃条件下保存；所述的动物鲜精低温稀释液的温度优选与动物新鲜精液的温度相同；所述的动物鲜精低温稀释液和动物新鲜精液的温度优选为25～37℃；所述的动物鲜精低温稀释液和动物新鲜精液的温度进一步优选为30℃；所述的动物鲜精低温稀释液和动物新鲜精液的质量比优选为(6～10)：1；所述的降温速度优选为0.1～0.4℃/min，降温过程要缓慢进行，不能迅速降温到10℃以下，避免精子受到冷应激；所述的降温速度进一步优选为0.2℃/min；本专利技术的原理：维生素A(VA)是一种环状不饱和一元醇，具有多种生理作用，不足会出现多种症状，如生长迟缓、骨骼畸形、繁殖器官退化、夜盲症等。精液中添加维生素A可有延缓性功能衰退的作用、提高精子存活时间。维生素D(VD)为类固醇衍生物，其功能为促进钙磷吸收、代谢和成骨作用。缺乏维生素D引起钙和磷代谢障碍，羔羊出现佝偻病，成年羊出现骨组织疏松症。精液中添加维生素D改善精子质量，增加精子的运动能力，提高母羊授配率。维生素E又叫抗不育维生素，化学结构类似酚类的化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种动物鲜精低温稀释液，其特征在于包含如下组分：葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、卵黄、脱脂牛奶、维生素A、维生素D、维生素E和水，其中，葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、维生素A、维生素D、维生素E和水的质量比为(2～5)：(2～5)：(50×10‑3～100×10‑3)：(30×10‑3～60×10‑3)：(1×10‑3～1.25×10‑3)：(400×10‑6～600×10‑6)：(200×10‑6～400×10‑6)：(200×10‑6～400×10‑6)：100，卵黄、脱脂牛奶和水的体积比为(8～12)：(8～12)：100。

【技术特征摘要】
1.一种动物鲜精低温稀释液，其特征在于包含如下组分：葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、卵黄、脱脂牛奶、维生素A、维生素D、维生素E和水，其中，葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、恩诺沙星、维生素A、维生素D、维生素E和水的质量比为(2～5)：(2～5)：(50×10-3～100×10-3)：(30×10-3～60×10-3)：(1×10-3～1.25×10-3)：(400×10-6～600×10-6)：(200×10-6～400×10-6)：(200×10-6～400×10-6)：100，卵黄、脱脂牛奶和水的体积比为(8～12)：(8～12)：100。2.权利要求1所述的动物鲜精低温稀释液的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)将葡萄糖和柠檬酸钠溶于水中，得到基础液；(2)将卵黄、脱脂牛奶、青霉素、链霉素和恩诺沙星与步骤(1)制得的基础液混合均匀，得到混合液；然后再加入维生素A、维生素D和维生素E，混合均匀，得到动物鲜精低温稀释液。3.根据权利要求2所述的动物鲜精低温稀释液的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的脱脂牛奶经90～95℃水浴灭菌10min。4.根据权利要求2所述的动物鲜精低温稀释液的制备方法，其特征在于：步骤(2)中所述的混合液的制备方为：将卵黄...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉琴，施会彬，田志龙，何翁潭，吴至博，张志恒，张学智，韩树羽，
申请(专利权)人：洛宁农本畜牧科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41