一种三阴乳腺癌预后预测标志物及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种三阴乳腺癌预后预测标志物，其为EVI‑1蛋白或CRT蛋白。进而提出一种上述的三阴乳腺癌预后预测标志物的检测方法，该检测方法包括以下步骤：1)制作乳腺癌组织石蜡切片；2)脱蜡和水化；3)高压加热枸橼酸钠缓冲液组织抗原修复液；4)阻断内源性过氧化物酶；5)加EVI‑1蛋白一抗，CRT蛋白一抗或空白对照试剂；6)加酶标聚合物；7)显色；8)复染；9)脱水、透明、封片；10)评价。本发明专利技术的三阴乳腺癌预后预测标志物及其检测方法，通过脱蜡和水化、高压加热、阻断内源性过氧化物酶等步骤，对标志物进行了检测，根据EVI‑1蛋白，CRT蛋白表达的不同，得到了不同程度的多个表达组。

A prognostic marker for triple negative breast cancer and its detection method

The present invention relates to a prognostic marker for triple negative breast cancer, which is EVI 1 protein or CRT protein. A method for detecting the prognostic markers of triple-negative breast cancer was proposed, which included the following steps: 1) making paraffin sections of breast cancer tissues; 2) dewaxing and hydration; 3) heating sodium citrate buffer tissue antigen repair solution under high pressure; 4) blocking endogenous peroxidase; 5) adding EVI 1 protein antibody, CRT protein-antibody or blank control reagent; 6) adding enzyme-labeled polymerization. Compounds; 7) color rendering; 8) re-dyeing; 9) dehydration, transparency, sealing; 10) evaluation. The three-negative breast cancer prognostic markers and their detection methods are detected by dewaxing and hydration, high-pressure heating, blocking endogenous peroxidase and other steps. According to the different expressions of EVI_1 protein and CRT protein, multiple expression groups of different degrees are obtained.

【技术实现步骤摘要】
一种三阴乳腺癌预后预测标志物及其检测方法
本专利技术涉及预后预测标志物
，特别涉及一种三阴乳腺癌预后预测标志物及其检测方法。
技术介绍
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，在常见恶性肿瘤的发病率中高居世界第二位，且近年来发病率呈逐年升高趋势，给社会和家庭造成了严重的经济和心理负担。三阴乳腺癌(Triple-negativebreastcancer，TNBC)是乳腺癌中侵袭性最强的一种亚型，约占全部乳腺癌的20％。TNBC即雌激素受体(Estrogenreceptor，ER)、孕激素受体(Progesteronereceptor，PR)和人表皮生长因子受体2(Humanepidermalgrowthfactorreceptor2，Her-2)皆表达缺失的乳腺癌，因其特殊的致病机理，因其缺乏靶点，目前尚无有效的内分泌、靶向治疗。目前无论是病因的基础研究或者是临床诊断和治疗研究，都是为了延长患者的生存时间和提高生存质量，使患者有一个好的预后。因此，加强对三阴乳腺癌预后规律的探索是非常必要的。EVI-1蛋白，又称MDS1和EVI-1蛋白复合体基因座(MDS1andEVI1complex，ME本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三阴乳腺癌预后预测标志物，其特征在于，所述三阴乳腺癌预后预测标志物为EVI‑1蛋白或CRT蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种三阴乳腺癌预后预测标志物，其特征在于，所述三阴乳腺癌预后预测标志物为EVI-1蛋白或CRT蛋白。2.根据权利要求1所述的三阴乳腺癌预后预测标志物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制作乳腺癌组织石蜡切片；2)脱蜡和水化石蜡切片先后置于二甲苯中浸泡2次、15分钟/次，无水乙醇中浸泡2次、3分钟/次；分别在95％乙醇水溶液、85％乙醇水溶液中浸泡3分钟，用自来水冲淋1分钟；3)高压加热枸橼酸钠缓冲液组织抗原修复液加热枸橼酸钠缓冲液组织抗原修复液至沸腾；将脱蜡和水化后的切片放入置于耐高温染色架上的压力锅中，加热至喷汽，2分钟后，压力锅离开热源，自然冷却5分钟；用自来水冲洗使其冷却，待冷却至室温后取出切片；用蒸馏水冲洗2次、3分钟/次；再用PBS溶液冲洗3次、3分钟/次；4)阻断内源性过氧化物酶将步骤3)得到的切片除去PBS溶液，加100μL内源性过氧化物酶阻断剂，室温下培育10分钟，PBS溶液冲洗3次、3分钟/次；5)加EVI-1蛋白，CRT蛋白一抗或空白对照试剂将步骤4)得到的切片除去PBS溶液，分为三份，分别加100μL的EVI-1蛋白一抗，CRT蛋白一抗或空白对照试剂，室温下培育60分钟，PBS溶液冲洗3次、3分钟/次；6)加酶标聚合物将步骤5)得到的切片除去PBS液，对于在PBS溶液冲洗前加过100μL的EVI-1蛋白一抗和CRT蛋白一抗的切片，分别加100μL的EVI-1蛋白二抗和CRT蛋白二抗，室温下培育15分钟，PBS溶液冲洗3次、3分钟/次；7)显色将步骤6)得到的切片除去PBS溶液，加100-200mLDAB显色液，培育3-5分钟；8)复染将步骤7)得到的切...

【专利技术属性】
技术研发人员：何东宁，王亚帝，陈书睿，陈素贤，吴磊，
申请(专利权)人：何东宁，
类型：发明
国别省市：辽宁,21