【技术实现步骤摘要】
一种显微观察黄蚜小蜂的制片方法
本专利技术属于蚜小蜂(寄生蜂)显微观察
,具体涉及显微观察黄蚜小蜂(尤其是并胸腹节后缘扇状突)的制片方法。
技术介绍
黄蚜小蜂(Aphytis)隶属膜翅目(Hymenoptera)蚜小蜂科(Aphelinidae),是介壳虫的重要寄生蜂,在害虫生物防治中发挥重要作用。但是黄蚜小蜂个体微小,需要制作玻片标本进行显微观察和分类鉴定。黄蚜小蜂并胸腹节后缘扇状突的形状、排列是该属分类鉴定的最重要的特征,该特征需要高质量的显微观察才能获得。而目前有关黄蚜小蜂玻片标本的制作方法主要两种:1.常规的中性树胶封片法:先将标本置于5%氢氧化钾(或5%氢氧化钠)溶液中浸泡,然后水洗20-30min,经过50%、70%、95%、100%等不同浓度酒精脱水,移入丁香油以备制片。制片时把丁香油中的标本挑到盖玻片上(倒置,即腹面朝上),并滴少许丁香油,解剖、整姿后吸干丁香油,加中性树胶封片。常规的中性树胶封片法的不足:中性树胶封片的标本可以永久保存,但不足的是在脱水的过程中标本容易变形或皱缩,清晰度和透明度不够理想,几乎很难看清黄蚜小蜂并胸腹节后缘扇状突的微观结构。2.荷氏液制片法:标本先经过醋酸乳酸酚浸液(乳酸:结晶酚=10:5制成乳酸酚溶液,然后乳酸酚溶液:冰醋酸=5:7混合而成)处理6-24h,待虫体透明时移到盖玻片上解剖、整姿,然后用荷氏液(12g阿拉伯树胶,20ml水溶化,再加入20-40g水合氯醛和10-20g甘油混合而成)封片。荷氏液制片法的不足:尽管玻片标本清晰度较好,但制作成的玻片标本由于荷氏液属水溶性胶,极易吸湿返潮,所封片的 ...
【技术保护点】
1.一种显微观察黄蚜小蜂的制片方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:(1)100%酒精浸泡、清洗新鲜黄蚜小蜂标本;(2)将黄蚜小蜂标本放入1.5ml离心管中,加入90ul 组织裂解液和10 ul蛋白酶K,放入56℃的水浴中,过夜;(3)将过夜后的溶液吸掉,保留黄蚜小蜂标本,后加入200ul 100%酒精;(4)取一凹形载玻片,将黄蚜小蜂标本连同酒精吸到载玻片凹处,待酒精挥发干净同时加入10ul纯净水,标本背部朝上;(5)待黄蚜小蜂标本背部表层纯净水挥发干净时,将标本放置于显微镜下显微拍摄扇状突结构;(6)拍摄结束后,吸掉多余纯净水,滴20ul丁香油淹没黄蚜小蜂标本;(7)取一普通载玻片,将黄蚜小蜂标本连同丁香油一同移到普通载玻片上,解剖,小心取下头部、触角和翅膀,剩下虫体整姿;(8)用滤纸吸掉多余丁香油,加一薄层加拿大树胶,使头部、触角、翅膀和虫体固定;(9)使用40℃烘片机烘24小时;(10)取上述烘干的标本,逐层加加拿大树胶2‑3次,最后使头部、触角、翅膀和虫体分别埋没在加拿大树胶中;(11)在加拿大树胶未完全凝固前,取圆形盖玻片封片;(12)使用烘片机40℃烘2周直至烘干,以有 ...
【技术特征摘要】
1.一种显微观察黄蚜小蜂的制片方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:(1)100%酒精浸泡、清洗新鲜黄蚜小蜂标本;(2)将黄蚜小蜂标本放入1.5ml离心管中,加入90ul组织裂解液和10ul蛋白酶K,放入56℃的水浴中,过夜;(3)将过夜后的溶液吸掉,保留黄蚜小蜂标本,后加入200ul100%酒精;(4)取一凹形载玻片,将黄蚜小蜂标本连同酒精吸到载玻片凹处,待酒精挥发干净同时加入10ul纯净水,标本背部朝上;(5)待黄蚜小蜂标本背部表层纯净水挥发干净时,将标本放置于显微镜下显微拍摄扇状突结构;(6)拍摄结束后,吸掉多余纯净水,滴20ul丁香油淹没黄蚜小蜂标本;(7)取一普通载玻片,将黄蚜小蜂标本连同...
【专利技术属性】
技术研发人员:王竹红,黄建,司宇,张慧,
申请(专利权)人:福建农林大学,
类型:发明
国别省市:福建,35
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