疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体的获取方式及应用制造技术

本发明专利技术涉及疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体的制备和应用。其通过PCR方法从疏螺旋体基因组扩增得到FlaB的基因片段，克隆至含组氨酸标签的原核表达载体pET30a中，再转入大肠杆菌BL21感受态细胞，通过IPTG进行诱导表达，亲和纯化得到FlaB蛋白，免疫小鼠获得了抗疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体,为疏螺旋体的检测和深入研究打下了坚实的基础。

Acquisition and Application of FlaB Antibody to Flagellin of Treponema laevis

The present invention relates to the preparation and application of flagellin FlaB antibody of Treponema laevis. FlaB gene fragment was amplified from Treponema larvae genome by PCR and cloned into prokaryotic expression vector pET30a with histidine label. Then it was transformed into competent cells of Escherichia coli BL21. FlaB protein was induced by IPTG and purified affinity. FlaB antibody against Treponema larvae flagellin was obtained from immunized mice, which laid a foundation for further study and detection of Treponema larvae. A solid foundation.

【技术实现步骤摘要】
疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体的获取方式及应用
本专利技术涉及生物免疫相关领域，具体涉及疏鞭毛蛋白FlaB抗体制备方法，更具体涉利用所制备的抗体通过不同免疫学方法检测疏螺旋体的应用。技术背景回归热是由虱子和蜱作为媒介，疏螺旋体细菌感染引起的一种传染病(Schwan,T.G.andJ.Piesman,Vectorinteractionsandmolecularadaptationsoflymediseaseandrelapsingfeverspirochetesassociatedwithtransmissionbyticks.EmergInfectDis,2002.8(2):p.115-21；Cutler,S.J.,Possibilitiesforrelapsingfeverreemergence.EmergInfectDis,2006.12(3):p.369-74)。多数患者在感染后的5至15天出现临床反应，包括忽冷、忽热、头疼、肌肉或关节疼痛以及恶心反胃等症状(Ramos,J.M.,etal.,Resultsofa10-yearsurveyoflouse-bornerelaps本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB的抗体制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）用鞭毛蛋白FlaB免疫小鼠；（2）收集免疫后小鼠血清制备抗体，所述抗体用于检测螺旋体。

【技术特征摘要】
1.一种疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB的抗体制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）用鞭毛蛋白FlaB免疫小鼠；（2）收集免疫后小鼠血清制备抗体，所述抗体用于检测螺旋体。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述鞭毛蛋白FlaB通过基因工程获得。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述鞭毛蛋白FlaB通过基因工程获得方法具体包括如下步骤：（1）扩增疏螺旋体FlaB基因引物的设计；（2）疏螺旋体FlaB基因的PCR扩增；（3）疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB基因克隆；（4）疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB表达和蛋白纯化，其所述用表达载体为载体pET-30a，表达系统为原核表达系统，优选为大肠杆菌。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述免疫小鼠的步骤为：（1）取免疫前的小鼠全血制备免疫前血清，制备抗原溶液；（2）抗原溶液与佐剂QuickAntibody–Mouse5W混合制备免疫注射药剂；（3）通过小鼠左右大腿进行肌肉注射；其中优选采用8-12周龄Balb/c小鼠；（4）3周后以同...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘红旗，时宇，陆巍，李昕潼，张静，陶玉芬，刘建生，
申请(专利权)人：中国医学科学院医学生物学研究所，
类型：发明
国别省市：云南,53