一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法技术

本发明专利技术公开了一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，以猪的卵巢为原材料，通过卵巢采集、器材消毒、卵泡吸取、卵母细胞收集等步骤，收集卵母细胞的效果最佳，回收效率最高，能够充分利用手中现有的资源，简单、经济、高效的回收猪小有腔卵泡的卵泡液以及卵丘卵母细胞复合体，对于今后有关于猪小有腔卵泡中的卵母细胞发育的研究以及畜牧业的发展提供了丰富的材料。

A method for collecting cumulus oocyte complexes with cavity in pigs*

The invention discloses a collection method of a cumulus oocyte complex with small cavities in pigs, which takes pig ovaries as raw materials, and through ovaries collection, equipment disinfection, follicle absorption, oocyte collection and other steps, the effect of oocyte collection is the best, and the recovery efficiency is the highest, which can make full use of the resources available in hand, and is simple, economical and efficient for the recovery of porcine small follicle. Follicular fluid and cumulus oocyte complex provide abundant materials for the future research on the development of oocytes in small cavities and the development of animal husbandry.

【技术实现步骤摘要】
一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法
本专利技术涉及细胞生物学领域，具体为一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法。技术背景现如今，随着动物胚胎工程技术快速发展的同时，也极大的促进了畜牧业、养殖业以及生物医学的进步。利用动物胚胎功能工程技术可以改良家畜品种、培育转基因新品种、制备人类疾病模型、生产药用蛋白、研究胚胎发育机理等。而猪是胚胎生物学家和遗传学家研究的重要的模式动物之一，因为猪的生理和解剖结构与人类有很大的相似之处。目前，如何在猪卵巢中简单、高效的收集卵母细胞是开展后续体外成熟技术(IVM)、体外受精技术(IVF)、体细胞克隆技术(SCNT)、孤雌激活(PA)等现代动物胚胎生物技术必不可少的环节也是支持上述技术必不可少的保障，尤其是关于猪小有腔卵泡液以及卵泡液中卵丘卵母细胞复合体的收集则十分困难，因此专利技术一种简单、经济、方便、高效的卵母细胞收集方法就显得十分重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：提供一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，简单、经济、方便、高效，收集卵母细胞的效果佳，回收效率高，为今后有关于猪小有腔卵泡中的卵母细胞发育的研究以及畜牧业的发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：卵巢采集：从屠宰场选取猪的卵巢，并将卵巢存放于盛装有青霉素G和硫酸链霉素两种抗生素的生理盐水的保温杯中，且保温杯中温度保持在28～35℃，2h内带回实验室；S2：器材消毒：在实验室中，将下一步骤所需用的器材全部进行消毒；S3：卵泡吸取：采用5ml注射器针头配合5ml无菌注射器针筒抽吸卵巢上的0.5～2mm的卵泡，并将抽取的卵泡液和卵母细胞缓慢注入置于38℃恒温水浴锅的15ml尖底离心管中，使卵丘卵母细胞复合体(Cumulus‑Oocyte complexes,COCs)自然沉降；S4：卵母细胞收集：用洗卵液将上一步...

【技术特征摘要】
1.一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：卵巢采集：从屠宰场选取猪的卵巢，并将卵巢存放于盛装有青霉素G和硫酸链霉素两种抗生素的生理盐水的保温杯中，且保温杯中温度保持在28～35℃，2h内带回实验室；S2：器材消毒：在实验室中，将下一步骤所需用的器材全部进行消毒；S3：卵泡吸取：采用5ml注射器针头配合5ml无菌注射器针筒抽吸卵巢上的0.5～2mm的卵泡，并将抽取的卵泡液和卵母细胞缓慢注入置于38℃恒温水浴锅的15ml尖底离心管中，使卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-Oocytecomplexes,COCs)自然沉降；S4：卵母细胞收集：用洗卵液将上一步骤自然沉降的卵泡液和卵母细胞稀释到适宜浓度，再通过体式显微镜收集液体中的卵母细胞，从而完成猪小有腔卵泡中卵丘卵母细胞复合体的收集。2.根据权利要求1所述的一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，其特征在于，所述注射器针头为健士牌一次性无菌注射器针头。3.根据权利要求1所述的一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，其特征在于，所述S2步骤中进行消毒的器材，包括5ml注射器针头、5ml无菌注射器针筒、15ml尖底离心管。4.根据权利要求1所述的一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法，其特征在于，所述S4步骤中的洗卵液的制备方法为：首先用100mL去离子水溶解1gPVA(...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹祖兵，高迪，许腾腾，王怡青，童旭，张丹丹，张运海，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34