一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体及核酸分子和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体及核酸分子和应用，涉及纳米抗体技术领域。本发明专利技术公开的抗人促绒毛膜促性腺激素的纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，该纳米抗体具有与人促绒毛膜促性腺激素β亚单位特异性结合的活性，可以用于检测人促绒毛膜促性腺激素β亚单位，可替代传统单克隆抗体与多克隆抗体；此外该纳米抗体还具有分子量小、亲和力高、结构和性能稳定等特点，可耐受高温，高盐等苛刻条件，提高了抗体的货架期。

【技术实现步骤摘要】
一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体及核酸分子和应用
本专利技术涉及纳米抗体
，具体而言，涉及一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体及核酸分子和应用。
技术介绍
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盘绒毛膜的合体滋养层产生的一种糖蛋白，由α和β二个单位通过离子键和疏水键结合在一起。α亚单位是垂体前叶激素所共有,它与FSH、LH、TSH的α亚单位结构相似。β亚单位的结构与LH等的β亚单位不同，在免疫活性上可予区别。血中β亚单位大部分以全分子形式存在，游离态的β亚单位(F-13_HCG)占HCG的I～5％左右。血中游离态的β亚单位是在受孕后6～8天产生，50～80天达到高峰，以后平稳下降，直至孕18周左右稳定于一定浓度。唐氏综合征又称先天愚型，21-三体综合征，是最常见的染色体疾病和弱智的病因，新生儿中发病率约为1/700左右。根据染色体核型的不同，唐氏综合征分为单纯21三体型、嵌合型和易位型三种类型。唐氏综合征的发生起源于卵子或精子发生的减数分裂过程中染色体的不分离现象，通常是随机发生的，约95％的不分离现象来源于母亲，仅5％左右发生在精子发生期。其结果是21号染色体多了一条，多出的一条染色体因剂量效应破坏了正常基因组遗传物质间的平衡，导致患儿智力低下，颅面部畸形及特殊面容，肌张力低下，多并发先天性心脏病，患者白血病的发病率为普通人群的10-20倍。生活难以自理，患者预后一般较差，50％左右于5岁前死亡。目前对唐氏综合征缺乏有效的治疗方法。通过孕早、中期检测孕妇血中ΡΑΡΡ-Α，游离β-HCG，AFP等，结合B超检查，可将约90％的唐氏综合征检测出来。对高风险胎儿，通过绒毛活检或羊水穿刺或脐血穿刺等技术作染色体核型分析可以确诊，然后流产处理。怀有唐氏综合征(DS)胎儿的孕妇，一部分人其血清F-P-HCG水平呈强直性升高，平均MOM值为2.3～2.4Μ0Μ。F-β-HCG在孕早期和孕中期都处于高水平。妊娠中期DS孕妇血清F-β-HCG浓度比正常至少高2倍。F-β-HCG用于DS风险的评估，敏感期可从孕早期到孕中期(7～20周)。羊驼血清中存在的一种天然缺失轻链的抗体，即重链抗体(heavy-chainantibody，hcAb)。单域重链抗体(singledomainantibody，sdAb)是指仅由重链抗体可变区(Variableregion)组成的基因工程抗体，又称为VHH抗体(variabledomainofheavychainofheavy-chainantibody，VHHantibody)或纳米抗体(Nanobody，Nb)。与传统抗体相比，单域抗体具有分子量小，稳定性高，水溶性好等优点，其次天然缺失轻链，洗脱时不会像传统抗体那样造成轻链脱落造成二次污染，因此可作为新一代的亲和纯化配体用于纯化β-HCG和检测试剂检测β-HCG。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体。本专利技术的另一目的在于提供一种分离的核酸分子。本专利技术的另一目的在于提供一种载体。本专利技术的另一目的在于提供一种宿主细胞。本专利技术的另一目的在于提供一种制备上述纳米抗体的方法。本专利技术的另一目的在于提供一种试剂盒。本专利技术的另一目的在于提供上述纳米抗体的应用。本专利技术是这样实现的：本专利技术的一方面涉及一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，本专利技术的纳米抗体的氨基酸序列并不限于SEQIDNO.1所示的序列，其还可以是在SEQIDNO.1所示的序列上经过一个或多个氨基酸残基的替换和/或删除得到的，且具有与SEQIDNO.1相同生物活性例如与人促绒毛膜促性腺激素β亚单位特异性结合的活性或者是活性加强或者活性减弱的衍生序列。这类衍生序列也属于本专利技术的保护范围。本专利技术的另一方面涉及一种分离的核酸分子，该核酸分子编码上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。对本领域技术人员而言，根据密码子的简并性，容易在上述核苷酸序列的基础进行一个或多个核苷酸的替换，得到相应的衍生序列，以使编码出本专利技术提供的SEQIDNO.1所示的纳米抗体。因此，在上述核苷酸序列的基础进行一个或多个核苷酸的替换，得到相应的编码出本专利技术提供的纳米抗体的衍生的核苷酸序列也属于本专利技术的保护范围。本专利技术的另一方面涉及一种载体，其含有上述的分离的核酸分子。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，上述载体包括但不限于克隆载体和表达载体。本专利技术的另一方面涉及一种宿主细胞，其含有上述的载体。本专利技术的另一方面涉及一种偶联物，该偶联物含有上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体以及偶联部。偶联部的具体类别，均可以根据使用需求进行选择。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，上述偶联部包括但不限于放射性同位素、荧光物质、发光物质、有色物质、多聚物例如琼脂糖、聚乙二醇等、活性多肽、蛋白、核素，核酸，小分子毒素、受体或配体等。本专利技术的另一方面涉及一种制备上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体的方法，其包括：培养上述的宿主细胞。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，上述方法还包括：从细胞培养物中纯化得到上述抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体。在本专利技术公开了抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体的氨基酸序列的前提下，本领域技术人员容易通过基因工程技术、化学合成等方法得到本专利技术的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位纳米抗体，其相应的制备方法均属于本专利技术的保护范围。本专利技术的另一方面涉及一种检测检测唐氏综合征的试剂盒，其包括上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体，或者上述的偶联物。本专利技术的另一方面涉及上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体在检测唐氏综合征中的应用，该应用以非诊断或治疗为目的。本专利技术的再一方面涉及上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体在早孕与唐氏综合征检测中的应用。本专利技术的再一方面涉及上述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体在制备唐氏综合征检测试剂盒中的应用。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体具有与人促绒毛膜促性腺激素β亚单位特异性结合的活性，可以用于检测人促绒毛膜促性腺激素β亚单位，可替代传统单克隆抗体与多克隆抗体；此外该纳米抗体还具有分子量小、亲和力高、结构和性能稳定等特点，，可耐受高温，高盐等苛刻条件，延长了抗体的货架期。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例1中的洗脱液的电泳结果。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。以下结合实施例对本专利技术的特征和性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的抗人促绒毛膜促性腺激素β亚单位的纳米抗体。3.根据权利要求2所述的分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。4.一种载体，其特征在于，其含有权利要求2或3所述的分离的核酸分子。5.一种宿主细胞，其特征在于，其含有权利要求4所述的载体。6.一种偶联物，其特征在于，其含有权利要求1所述的抗人促绒毛膜促性腺激...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈波，罗紫豪，
申请(专利权)人：成都阿帕克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51