一种南瓜籽蛋白的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种南瓜籽蛋白的制备方法，包括如下步骤：将南瓜籽粉原料和水混匀制得一次浆液，并加入一次复合酶酶解，得到一次酶解液；将一次酶解液进行一次碱提，并将其离心分离得到一次蛋白液和残渣沉淀；将残渣沉淀和水混匀制得二次浆液，加入二次复合酶酶解，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到二次酶解液；将二次酶解液进行二次碱提，并将其离心分离得到二次蛋白液；将一次蛋白液和二次蛋白液混匀，并进行酸沉处理，经离心分离得到南瓜籽蛋白粉；将南瓜籽蛋白粉经纯化得到纯化南瓜籽蛋白粉；将纯化南瓜籽蛋白粉进行冷冻干燥处理，即得南瓜籽蛋白。该南瓜籽蛋白的制备方法，工艺安全、制备便捷。

【技术实现步骤摘要】
一种南瓜籽蛋白的制备方法
本专利技术涉及南瓜籽蛋白
，具体涉及一种南瓜籽蛋白的制备方法。
技术介绍
南瓜是葫芦科南瓜属的一个种，南瓜籽是南瓜加工的副产物，南瓜籽含有丰富的油脂、蛋白质及维生素等，营养价值很高，具有驱虫、缓解高血压、消炎、抗氧化等多种功能，是一味药食两用的中药，在我国种植范围广、种类多、资源丰富，极具开发价值。南瓜籽蛋白质的含量高达30％～40％，特别是脱脂美洲南瓜种子的蛋白质含量可达60％以上，种子中各种氨基酸的利用率也很高，平均达到93．75％，因此南瓜籽蛋白的含量高、品质好，是一种应用价值很高的优质植物蛋白资源。因此，有必要研究一种制备南瓜籽蛋白的方法。
技术实现思路
针对上述技术中存在的不足之处，本专利技术提供了一种工艺安全、制备便捷的南瓜籽蛋白的制备方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种南瓜籽蛋白的制备方法，包括如下步骤：步骤一、南瓜籽粉原料的制备；步骤二、一次酶解：将南瓜籽粉原料和水混匀制得一次浆液，调节一次浆液pH，并加入一次复合酶酶解，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到一次酶解液；步骤三、一次碱溶：将一次酶解液进行一次碱提并对其进行超声波处理，得到一次碱提液，并将其离心分离得到一次蛋白液和残渣沉淀；步骤四、二次酶解：将残渣沉淀和水混匀制得二次浆液，调节二次浆液pH，加入二次复合酶酶解，并在酶解过程中进行超声振荡处理，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到二次酶解液；步骤五、二次碱溶：将二次酶解液进行二次碱提并对其进行超声波处理，得到二次碱提液，并将其离心分离得到二次蛋白液；步骤六、酸沉：将一次蛋白液和二次蛋白液混匀，调节pH并进行酸沉处理，经离心分离得到南瓜籽蛋白粉；步骤七、纯化：将南瓜籽蛋白粉和水混匀制得南瓜籽蛋白浆液，调节南瓜籽蛋白浆液pH并加入复合酶进行超声波处理，待酶解后，将酶解液进行灭酶处理，经离心分离得到蛋白沉淀，水洗蛋白沉淀pH至中性，即得到纯化南瓜籽蛋白粉；步骤八、冷冻干燥：将纯化南瓜籽蛋白粉进行冷冻干燥处理，即得南瓜籽蛋白。优选的是，所述步骤一中南瓜籽粉原料的制备过程为：将南瓜籽去壳后采用六号溶剂油浸泡，脱溶后得到脱脂的南瓜籽粕，并将脱脂的南瓜籽粕粉碎过筛得到颗粒大小为100～160目筛的南瓜籽粉原料。优选的是，所述步骤二中一次酶解的过程如下：将南瓜籽粉原料和水按料液比1g:10～20mL混匀制得一次浆液，在一次浆液中加入盐酸或柠檬酸将一次浆液pH调至3～5，并加入复合酶酶解，酶解反应温度为54～56℃，酶解反应时间为4～6小时，待酶解反应结束，升温至90～95℃灭酶10～15分钟，得到一次酶解液。优选的是，所述步骤二中的一次复合酶包括蛋白酶、半纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶，所述蛋白酶、半纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶的用量为1：2～4：1～2：4～6，且一次复合酶的加酶量为南瓜籽粉原料用量的1000～2000u/g。优选的是，所述步骤三中一次提取的条件为：碱提料液比1g:10～20mL，碱提pH9～11，并对其进行超声波处理，超声功率为30～50kHz，超声时间为80～100分钟，超声温度为54～56℃，得到一次碱溶液，将一次碱溶液离心分离，得到一次碱溶沉淀和一次蛋白液。优选的是，所述步骤四中二次酶解的过程如下：将残渣沉淀和水按1g:5～10mL混匀制得二次浆液，在二次浆液中加入盐酸或柠檬酸将二次浆液pH调至4～5，加入二次复合酶酶解，酶解反应温度为49～51℃，酶解反应时间为2～4小时，待酶解反应结束，升温至90～95℃灭酶10～15分钟，得到二次酶解液。优选的是，所述步骤四中的二次复合酶包括半纤维素酶和糖化酶，所述半纤维素酶和糖化酶的用量为1：2～4，且二次复合酶的加酶量为南瓜籽粉原料用量的2000～3000u/g。优选的是，所述步骤五中二次提取的条件为：碱提料液比1g:5～10mL，碱提pH11～12，并对其进行超声波处理，超声功率为30～50kHz，超声时间为60～80分钟，超声温度为49～51℃，得到二次碱溶液，将二次碱溶液离心分离，得到二次碱溶沉淀和二次蛋白液。优选的是，所述步骤七中纯化的过程如下：将南瓜籽蛋白粉和水按料液比1g:6～8mL混匀制得南瓜籽蛋白浆液，调节南瓜籽蛋白浆液pH至4～5，并加入复合酶进行超声波处理，超声功率为30～50kHz，超声时间为40～60min，超声温度为40～45℃，待酶解后，将酶解液加热至90～95℃灭酶处理10～15分钟，经离心分离得到蛋白沉淀，采用30～40℃的蒸馏水水洗蛋白沉淀pH至7，得到纯化南瓜籽蛋白粉。优选的是，所述复合酶包括纤维素酶、淀粉酶、糖化酶和果胶甲酯水解酶，所述纤维素酶：淀粉酶：糖化酶：果胶甲酯水解酶的用量为1：3～5：4～6：2～3，且复合酶的加酶量为南瓜籽蛋白浆液用量的1.5～2.0ug/g。本专利技术与现有技术相比，其有益效果是：（1）通过采用由蛋白酶+半纤维素酶+木聚糖酶+果胶酶组成的一次复合酶进行一次酶解，以及采用由半纤维素酶+糖化酶组成的二次复合酶进行二次酶解，可有效破坏南瓜籽粉细胞的细胞壁，使得细胞内的蛋白更易提取，采用两次碱溶和复合酶酶解法提取蛋白，可有效提高南瓜籽蛋白的提取率。由纤维素酶+淀粉酶+糖化酶+果胶甲酯水解酶组成的复合酶进行酶解蛋白质，可有效提高蛋白质的纯度。（2）通过对一次碱提进行超声波处理，以及在二次碱提过程中同时进行超声波处理，以提供合适的微环境来溶解蛋白质，极大缩短了酶解反应时间。（3）该酶法制备南瓜籽蛋白的方法，工艺安全、制备便捷，可有效的提高蛋白质的得率和纯度，南瓜籽蛋白提取率可达75.0%以上、提取的南瓜籽蛋白纯度高达90.0%以上。具体实施方式下面对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。<实施例1>一种南瓜籽蛋白的制备方法，包括如下步骤：步骤一、南瓜籽粉原料的制备：将南瓜籽去壳后采用六号溶剂油浸泡，脱溶后得到脱脂的南瓜籽粕，并将脱脂的南瓜籽粕粉碎过筛得到颗粒大小为100目筛的南瓜籽粉原料；步骤二、将南瓜籽粉原料和水按料液比1g:10mL混匀制得一次浆液，在一次浆液中加入盐酸或柠檬酸将一次浆液pH调至3，并加入一次复合酶酶解，一次复合酶采用蛋白酶+半纤维素酶+木聚糖酶+果胶酶，所述蛋白酶、半纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶的用量为1：2：1：4，且一次复合酶的加酶量为南瓜籽粉原料用量的1000u/g，酶解反应温度为54℃，酶解反应时间为4小时，待酶解反应结束，升温至90℃灭酶10分钟，得到一次酶解液；步骤三、一次碱溶：将一次酶解液进行一次碱提并对其进行超声波处理，碱提料液比1g:10mL，碱提pH9，并对其进行超声波处理，超声功率为30kHz，超声时间为80分钟，超声温度为54℃，得到一次碱溶液，将一次碱溶液离心分离，得到一次碱溶沉淀和一次蛋白液；步骤四、将残渣沉淀和水按1g:5mL混匀制得二次浆液，在二次浆液中加入盐酸或柠檬酸将二次浆液pH调至4，加入二次复合酶酶解，所述二次复合酶采用半纤维素酶+糖化酶，所述半纤维素酶和糖化酶的用量为1：2，且二次复合酶的加酶量为南瓜籽粉原料用量的2000u/g，酶解反应温度为49℃，酶解反应时间为2小时，待酶解反应结束，升温至90℃灭酶10分钟，得本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种南瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、南瓜籽粉原料的制备；步骤二、一次酶解：将南瓜籽粉原料和水混匀制得一次浆液，调节一次浆液pH，并加入一次复合酶酶解，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到一次酶解液；步骤三、一次碱溶：将一次酶解液进行一次碱提并对其进行超声波处理，得到一次碱提液，并将其离心分离得到一次蛋白液和残渣沉淀；步骤四、二次酶解：将残渣沉淀和水混匀制得二次浆液，调节二次浆液pH，加入二次复合酶酶解，并在酶解过程中进行超声振荡处理，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到二次酶解液；步骤五、二次碱溶：将二次酶解液进行二次碱提并对其进行超声波处理，得到二次碱提液，并将其离心分离得到二次蛋白液；步骤六、酸沉：将一次蛋白液和二次蛋白液混匀，调节pH并进行酸沉处理，经离心分离得到南瓜籽蛋白粉；步骤七、纯化：将南瓜籽蛋白粉和水混匀制得南瓜籽蛋白浆液，调节南瓜籽蛋白浆液pH并加入复合酶进行超声波处理，待酶解后，将酶解液进行灭酶处理，经离心分离得到蛋白沉淀，水洗蛋白沉淀pH至中性，即得到纯化南瓜籽蛋白粉；步骤八、冷冻干燥：将纯化南瓜籽蛋白粉进行冷冻干燥处理，即得南瓜籽蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种南瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、南瓜籽粉原料的制备；步骤二、一次酶解：将南瓜籽粉原料和水混匀制得一次浆液，调节一次浆液pH，并加入一次复合酶酶解，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到一次酶解液；步骤三、一次碱溶：将一次酶解液进行一次碱提并对其进行超声波处理，得到一次碱提液，并将其离心分离得到一次蛋白液和残渣沉淀；步骤四、二次酶解：将残渣沉淀和水混匀制得二次浆液，调节二次浆液pH，加入二次复合酶酶解，并在酶解过程中进行超声振荡处理，待酶解反应结束进行灭酶处理，得到二次酶解液；步骤五、二次碱溶：将二次酶解液进行二次碱提并对其进行超声波处理，得到二次碱提液，并将其离心分离得到二次蛋白液；步骤六、酸沉：将一次蛋白液和二次蛋白液混匀，调节pH并进行酸沉处理，经离心分离得到南瓜籽蛋白粉；步骤七、纯化：将南瓜籽蛋白粉和水混匀制得南瓜籽蛋白浆液，调节南瓜籽蛋白浆液pH并加入复合酶进行超声波处理，待酶解后，将酶解液进行灭酶处理，经离心分离得到蛋白沉淀，水洗蛋白沉淀pH至中性，即得到纯化南瓜籽蛋白粉；步骤八、冷冻干燥：将纯化南瓜籽蛋白粉进行冷冻干燥处理，即得南瓜籽蛋白。2.如权利要求1所述南瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤一中南瓜籽粉原料的制备过程为：将南瓜籽去壳后采用六号溶剂油浸泡，脱溶后得到脱脂的南瓜籽粕，并将脱脂的南瓜籽粕粉碎过筛得到颗粒大小为100～160目筛的南瓜籽粉原料。3.如权利要求1所述南瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤二中一次酶解的过程如下：将南瓜籽粉原料和水按料液比1g:10～20mL混匀制得一次浆液，在一次浆液中加入盐酸或柠檬酸将一次浆液pH调至3～5，并加入复合酶酶解，酶解反应温度为54～56℃，酶解反应时间为4～6小时，待酶解反应结束，升温至90～95℃灭酶10～15分钟，得到一次酶解液。4.如权利要求3所述南瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤二中的一次复合酶包括蛋白酶、半纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶，所述蛋白酶、半纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶的用量为1：2～4：1～2：4～6，且一次复合酶的加酶量为南瓜籽粉原料用量的1000～2000u/g。5.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷芬芬，王辉斌，胡传荣，罗会兵，何东平，张存存，吴建宝，万方云，曹灿，张妮，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，宝得瑞湖北健康产业有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42