一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法技术

本发明专利技术涉及一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法。该方法首先以FeCl3·6H2O,FeCl2·4H2O为原料通过共沉淀法制备磁性纳米颗粒；然后通过乙腈超声提取巧可力中的反式脂肪酸制备得到巧克力样品提取液并利用季铵盐和磁性材料对水稀释后的巧克力样品提取液进行磁性分散萃取后用乙腈洗涤后，最后利用气相色谱仪进行分析。本发明专利技术的方法操作简单，基质效应低，萃取效率高，富集效果明显检测限低。

【技术实现步骤摘要】
一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法
本专利技术涉及食品检测
，具体为一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法。
技术介绍
巧克力是一类具有牛奶及可可风味，口感顺滑细腻，色泽光亮的固态食品。巧克力食品种类繁多，具有良好的营养价值，自问世以来，在较短时间内受到全世界各国的欢迎。传统的巧克力配方以天然可可脂、白糖、乳脂为主。天然可可脂是一类由可可豆经焙炒、去壳、精磨和榨油等工艺加工后所得到的油脂。但是加工过程中，油脂中的脂肪酸会被还原，形成反式脂肪酸。反式脂肪酸降低了高密度胆固醇(HDL)的含量而增加了低密度胆固醇(LDL)的含量，增加了心血管疾病、心脏病的发病几率。此外，反式脂肪酸还可能有导致肿瘤，促成Ⅱ型糖尿病，影响婴幼儿发育等多方面的不良影响。近年来，多种巧克力中被检测到反式脂肪酸。巧克力中机制复杂，传统萃取时多利用有机溶剂萃取后固相萃取除杂，该方法不仅消耗大量有机溶剂而且费时费力。因此开发，高效快捷的反式脂肪酸的检测方法具有重要的意义。
技术实现思路
为了解决巧克力中前处理时传统萃取时消耗大量有机溶剂而且费时费力的问题，本专利技术提供了种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法。为了实现上述目标。本专利技术将采用以下技术：一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）首先将FeCl3·6H2O,FeCl2·4H2O以及HCl(12mol/L)溶于去离子水中，利用氮气脱气后，在搅拌下缓慢滴加NaOH溶液，反应2-4小时后，利用磁铁将沉淀的Fe3O4吸附后，利用去离子水洗涤5次后干燥，得到磁性纳米颗粒；（2）取10g的巧克力与10mL的乙腈混合后，超声提取10-15min后离心，将上清液浓缩后，用水溶稀释至20mL，得巧克力样品提取液；（3）取5-10mg的磁性纳米颗粒，2mL的季铵盐水溶液加入到20mL的巧克力样品提取液中，超声1min混匀后，磁分离，将清液去掉后，用0.6mL乙腈超声洗涤3次后，将含有反式脂肪酸的洗脱液用氮吹仪吹干燥后用100μL甲醇溶解后利用气相色谱进行分析。优选的，步骤（1）中所述的FeCl3·6H2O,FeCl2·4H2O以及HCl的摩尔比为1：2：1.2-1.5；所述的NaOH溶液浓度1-2moL/L。优选的，步骤（1）中所述的磁性纳米颗粒其粒径分布为20-50mn。优选的，步骤（2）中所述的超声提取温度为40-50℃。优选的，步骤（2）中所述的上清液浓缩后的体积不大于0.5mL。优选的，步骤（3）中所述的季铵盐为十烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵中的一种；所述季铵盐水溶液的溶度为10-15mg/mL。优选的，步骤（3）中所述的氮吹仪干燥时的温度为45-50℃。优选的，步骤（3）中所述的气相色谱进行分析时反式脂肪酸的检测限不高于0.01ng/mL。优选的，步骤（3）中所述的气相色谱进行分析的条件为：将1μL的样品注入配有FID检测其的气相色谱仪中，使用BPX-70熔融石英毛细管柱（30M，0.25mm，0.2μm膜厚）进行分析；进样口温度为260℃，检测器温度为280℃；温度程序为：初始柱温度100℃，以10℃/min程序升温到160℃后，在3℃/min程序升温220℃，保持5分钟，然后在10℃/min直至最终温度260℃并保持5分钟。使用氮气作为载气，流速为1毫升/分钟分流比为30：1。与现有技术相比，本专利技术所述一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法具有以下优势：本专利技术的方法操作简单，基质效应低，萃取效率高，富集效果明显检测限低；本专利技术采用磁性固相分散微萃取技术，不需离心步骤减少了操作步骤；采用季铵盐与磁性颗粒共混萃取，利用季铵盐的疏水烷基链与反式脂肪酸的疏水相互作用，加强了萃取效率，提高了检测灵敏度。此外，本专利技术的检测方法还可以应用于其他固态食品中的反式脂肪酸的检测。具体实施方式【实施例1】一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）首先将5.41gFeCl3·6H2O,1.98gFeCl2·4H2O以及1mL的HCl(12mol/L)溶于去离子水中，利用氮气脱气后，在搅拌下缓慢滴加15mL2.0mol/LNaOH溶液，反应4小时后，利用磁铁将沉淀的Fe3O4吸附后，利用去离子水洗涤5次后干燥，得到磁性纳米颗粒；（2）取10g的巧克力与10mL的乙腈混合后，45℃条件下，超声提取10min后离心，将上清液浓缩至体积小于1mL后，用水溶稀释至20mL，得巧克力样品提取液；（3）取8mg的磁性纳米颗粒，2mL的10mg/mL十二烷基三甲基溴化铵水溶液加入到20mL的巧克力样品提取液中，超声1min混匀后，磁分离，将清液去掉后，用0.6mL乙腈超声洗涤3次后，将含有反式脂肪酸的洗脱液用氮吹仪吹干燥后用100μL甲醇溶解后利用气相色谱进行分析。【实施例2】一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）首先将8.10gFeCl3·6H2O,2.97gFeCl2·4H2O以及1.5mL的HCl(12mol/L)溶于去离子水中，利用氮气脱气后，在搅拌下缓慢滴加22.5mL2.0mol/LNaOH溶液，反应3小时后，利用磁铁将沉淀的Fe3O4吸附后，利用去离子水洗涤5次后干燥，得到磁性纳米颗粒；（2）取10g的巧克力与10mL的乙腈混合后，50℃条件下，超声提取12min后离心，将上清液浓缩至体积小于1mL后，用水溶稀释至20mL，得巧克力样品提取液；（3）取7mg的磁性纳米颗粒，2mL的10mg/mL十四烷基三甲基溴化铵水溶液加入到20mL的巧克力样品提取液中，超声1min混匀后，磁分离，将清液去掉后，用0.6mL乙腈超声洗涤3次后，将含有反式脂肪酸的洗脱液用氮吹仪吹干燥后用100μL甲醇溶解后利用气相色谱进行分析。【实施例3】一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）首先将10.8gFeCl3·6H2O,4.0gFeCl2·4H2O以及2mL的HCl(12mol/L)溶于去离子水中，利用氮气脱气后，在搅拌下缓慢滴加30mL2.0mol/LNaOH溶液，反应3小时后，利用磁铁将沉淀的Fe3O4吸附后，利用去离子水洗涤5次后干燥，得到磁性纳米颗粒；（2）取10g的巧克力与10mL的乙腈混合后，50℃条件下，超声提取10min后离心，将上清液浓缩至体积小于1mL后，用水溶稀释至20mL，得巧克力样品提取液；（3）取10mg的磁性纳米颗粒，2mL的12mg/mL十六烷基三甲基溴化铵水溶液加入到20mL的巧克力样品提取液中，超声1min混匀后，磁分离，将清液去掉后，用0.6mL乙腈超声洗涤3次后，将含有反式脂肪酸的洗脱液用氮吹仪吹干燥后用100μL甲醇溶解后利用气相色谱进行分析。样品检测：分别取1μL的实施例1-3的样品，在气相色谱仪中（Shimadzu，GC-17A，Kyoto，Japan），使用BPX-70熔融石英毛细管柱（30M，0.25mm，0.2μm膜厚）进行分析；进样口温度为260℃，检测器温度为280℃；温度程序为：初始柱温度100℃，以10℃/min程序升温到160℃后，在3℃/m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）首先将FeCl3·6H2O,FeCl2·4H2O以及HCl(12 mol/L)溶于去离子水中， 利用氮气脱气后，在搅拌下缓慢滴加NaOH溶液，反应2‑4小时后，利用磁铁将沉淀的Fe3O4吸附后，利用去离子水洗涤5次后干燥，得到磁性纳米颗粒；（2） 取10g的巧克力与10mL的乙腈混合后，超声提取10‑15min后离心，将上清液浓缩后，用水溶稀释至20mL，得巧克力样品提取液；（3）取5‑10mg的磁性纳米颗粒，2mL的季铵盐水溶液加入到20mL的巧克力样品提取液中，超声1min混匀后，磁分离，将清液去掉后，用0.6mL乙腈超声洗涤3次后，将含有反式脂肪酸的洗脱液用氮吹仪吹干燥后用100μL甲醇溶解后利用气相色谱进行分析。

【技术特征摘要】
1.一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于包括以下步骤：（1）首先将FeCl3·6H2O,FeCl2·4H2O以及HCl(12mol/L)溶于去离子水中，利用氮气脱气后，在搅拌下缓慢滴加NaOH溶液，反应2-4小时后，利用磁铁将沉淀的Fe3O4吸附后，利用去离子水洗涤5次后干燥，得到磁性纳米颗粒；（2）取10g的巧克力与10mL的乙腈混合后，超声提取10-15min后离心，将上清液浓缩后，用水溶稀释至20mL，得巧克力样品提取液；（3）取5-10mg的磁性纳米颗粒，2mL的季铵盐水溶液加入到20mL的巧克力样品提取液中，超声1min混匀后，磁分离，将清液去掉后，用0.6mL乙腈超声洗涤3次后，将含有反式脂肪酸的洗脱液用氮吹仪吹干燥后用100μL甲醇溶解后利用气相色谱进行分析。2.根据权利要求1所述的一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述的FeCl3·6H2O,FeCl2·4H2O以及HCl的摩尔比为1：2：1.2-1.5；所述的NaOH溶液浓度1-2moL/L。3.根据权利要求1所述的一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述的磁性纳米颗粒其粒径分布为20-50mn。4.根据权利要求1所述的一种巧克力中反式脂肪酸的磁性固相萃取检测方法，其特征在于，步骤（2）中所述的超声提取温度为40-50℃。5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：张秀仙，
申请(专利权)人：张秀仙，
类型：发明
国别省市：广东,44