一种禽致病性大肠杆菌O78血清型的特异性基因、检测方法及免疫层析试纸条技术

技术编号:19735233 阅读:373 留言:0更新日期:2018-12-12 03:06
本发明专利技术提供一种禽致病性大肠杆菌O78血清型的特异性基因、检测方法及免疫层析试纸条,本发明专利技术所述的大肠杆菌O78血清型的特异性基因片段APEC‑O78‑S,其序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术所述的特异性基因片段为399bp;本发明专利技术还提供基于PCR的此基因片段的免疫层析方法及试纸条及其应用,本发明专利技术所述方法和试纸条能更加快速、灵敏、简便、特异性地检测出禽致病性大肠杆菌O78血清型菌株。

【技术实现步骤摘要】
一种禽致病性大肠杆菌O78血清型的特异性基因、检测方法及免疫层析试纸条
本专利技术属于分子生物学领域,具体涉及一种禽致病性大肠杆菌O78血清型的特异性基因、检测方法及免疫层析试纸条。
技术介绍
禽致病性大肠杆菌(AvianpathogenicEscherichiacoli,APEC)可以引起鸡、火鸡及其他禽类的多系统混合感染,如心包炎、肝周炎、气囊炎、脑膜炎等,甚至引起败血症而急性死亡。禽致病性大肠杆菌通过呼吸道感染禽,并可引起哺乳动物的脑膜炎,表明禽致病性大肠杆菌亦是人兽共患病的潜在病原体,对人类公共健康造成了潜在威胁。禽致病性大肠杆菌的血清型众多,国际上报道的致病力较强的血清型主要有O1、O2和O78,其余血清型还有O8、O145、O88、O20、O141等。临床上最常见的血清型为O78,目前对禽致病性大肠杆菌O78血清型菌株的检测报道较少,且耗时长,仪器设备较繁琐,灵敏度低。因此实现对禽致病性大肠杆菌O78血清型的快速检测,对禽致病性大肠杆菌临床鉴定具有重要的意义。目前对大肠杆菌的检测技术主要包括DNA探针技术、荧光定量PCR、基因芯片技术、酶联免疫吸附分析法(EnzymeLi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种禽致病性大肠杆菌O78血清型特异性基因或特异性基因片段APEC‑O78‑S,其中,特异性基因序列如SEQ ID NO:4所示,特异性基因片段APEC‑O78‑S序列如SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
2018.03.20 CN 201810228298X1.一种禽致病性大肠杆菌O78血清型特异性基因或特异性基因片段APEC-O78-S,其中,特异性基因序列如SEQIDNO:4所示,特异性基因片段APEC-O78-S序列如SEQIDNO:1所示。2.扩增权利要求1所述特异性基因片段APEC-O78-S的引物:SEQIDNO:2/SEQIDNO:3。3.权利要求1所述的特异性基因或特异性基因片段APEC-O78-S或权利要求2所述的引物在检测禽致病性大肠杆菌O78血清型中的应用。4.一种基于PCR的检测禽致病性大肠杆菌O78血清型的方法,其特征在于包括如下步骤:1)提取待测菌株的基因组,针对特异性基因或基因片段APEC-O78-S设计引物进行PCR扩增,PCR扩增所用的上游引物和下游引物分别用FITC修饰和地高辛修饰;2)通过胶体金标记的FITC单克隆抗体和地高辛单克隆抗体进行免疫层析检测。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于步骤1)中PCR扩增具体为:用FITC和地高辛分别修饰的上游引物和下游引物扩增得到两端带有FITC和地高辛的DNA双链产物,上游引物序列如SEQIDNO:2所示,下游引物序列如SEQIDNO:3所示。6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于步骤1)中提取大肠杆菌O78血清型菌株基因组所用方...

【专利技术属性】
技术研发人员:戴建君汤芳王娟芳姜敏
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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