GPR19作为诊治宫颈癌的靶标制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，公开了GPR19基因作为宫颈癌的诊治标志物的用途。本发明专利技术的实验证明GPR19基因在正常组织和宫颈癌组织中的表达存在显著差异。根据GPR19基因与宫颈癌的相关性，可以将GPR19基因作为临床上诊断宫颈癌的新的分子标志物，同时还可以将其作为宫颈癌治疗药物的新靶标。

【技术实现步骤摘要】
GPR19作为诊治宫颈癌的靶标
本专利技术涉及生物医学领域，更具体地，本专利技术涉及GPR19基因在制备诊治宫颈癌的产品中的应用。
技术介绍
宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，在女性生殖器官肿瘤中占首位。根据世界卫生组织2014年统计数据，宫颈癌的年新发病例约为52.8万例，年死亡例数约为26.6万例，其中85％的患者均发生在在发展中国家，且农村高于城市。我国是宫颈癌发病的大国，根据国家肿瘤中心公布的最新癌症统计数据，2015年我国的宫颈癌新发病例约为9.89万例，年死亡例数约为3.05万例，并且该数据呈现逐年上升且发病年轻化的趋势[ChenW,ZhengR,BaadePD,etal.CancerstatisticsinChina,2015[J].CACancerJClin,2016,66(2):115-132]。宫颈癌的发生与多种因素密切相关，如早婚、早育、多产及性生活紊乱等，但人乳头状瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)感染被认为是宫颈癌发病的必要条件，99.7％的宫颈癌患者HPV筛查呈阳性，且HPV持续感染患者罹患宫颈癌的风险是HPV阴性者的250多倍[WentzensenN,ArbynM.HPV-basedcervicalcancerscreening-facts,fiction,andmisperceptions[J].PrevMed,2017,98:33-35l；TorreLA,IslamiF,SiegelRL,etal.Globalcancerinwomen:burdenandtrends[J].CancerEpidemiolBiomarkersPrev,2017]。自上世纪七八十年代首次明确HPV感染是宫颈癌发病重要的成因后，学者们针对HPV感染诱发宫颈癌发病的机制展开深入研究，并因此开发出了针对宫颈癌的诊断方法和治疗策略，包括敏感特异的癌前诊断方法、靶向性的免疫预防措施以及治疗方法，极大的改善了宫颈癌患者生存及生活质量。随着现代生物检测技术的发展和肿瘤发病机制的不断深入研究，涉及肿瘤发生的多种生物学过程中的多种分子，如核酸、蛋白质、糖类、脂类、小分子代谢物乃至血液中游离的肿瘤细胞，均可作为重要的肿瘤标志物，给临床预防、诊断和治疗提供明确的依据。在宫颈癌中，目前己经发现了一些肿瘤标志物用于宫颈癌的临床预防。Ki-67和p16INK4a是两种常见的用于分析肿瘤细胞增殖状态以及肿瘤恶性程度的分子标志物。其中Ki-67在静默GO期细胞不表达，而高表达于G1,S,G2和M期细胞，因此其可广泛用于分析细胞的增殖活性来评估肿瘤进程[EndlE,GerdesJ.TheKi-67protein:fascinatingformsandanunknownfunction[J].ExpCellRes,2000,257(2):231-237]；同时，由于其表达谱系广泛，作为特异性的肿瘤标志物仍具有一定的缺陷，临床尚需其他分子标志物辅助诊断。p16INK4a作为一种周期调节蛋白，可特异性与CDK4和CDK6结合从而抑制其活性以及下游pRb的磷酸化，调节细胞周期进行及细胞分化过程；有研究发现，p16INK4a表达与HR-HPV持续感染以及宫颈肿瘤病理分级呈正相关，对于患者术后HPV的清除以及持续感染具有一定的指导价值[KohJ,EndersGH,DynlachtBD,etal.Tumour-derivedp16allelesencodingproteinsdefectiveincell-cycleinhibition[J].Nature,1995,375(6531):506-510]。ProExC抗体(BD公司)可特异性的识别因HPV感染而诱导的胞核蛋白MCM2以及拓扑异构酶TOP2A复合物。在宫颈腺体和鳞状细胞不典型增生中，E7癌基因诱导的细胞S期基因会促进TOP2A和MCM2在细胞核内高表达，同时TOP2A可与6个MCM2分子结合形成稳定的结构滞留于细胞核[SantinAD,ZhanF,BignottiE,etal.GeneexpressionprofilesofprimaryHPV16-andHPV18-infectedearlystagecervicalcancersandnormalcervicalepithelium:identificationofnovelcandidatemolecularmarkersforcervicalcancerdiagnosisandtherapy[J].Virology,2005,331(2):269-291]。因其在正常宫颈上皮细胞中不表达，而在HPV诱导的增殖活跃的鳞状细胞内显著高表达，临床上可用于区分不典型增生与鳞状细胞发育不完全或萎缩等类似改变。HPVDNA完整性和稳定性主要是由衣壳蛋白L1与L2蛋白共同形成一个稳定的保护壳来维持。其中，L1蛋白还可通过识别宿主细胞上的相应受体，促进病毒颗粒侵染粘膜基底膜带细胞或宫颈上皮细胞。在HPV侵染的轻度至中度不典型增生过程中会持续检测到L1蛋白的表达，但是随着宫颈癌化程度进展L1蛋白的表达会逐渐消失[McmurrayHR,MccanceDJ.Humanpapillomavirustype16E6activatesTERTgenetranscriptionthroughinductionofc-MycandreleaseofUSF-mediatedrepression[J].JVirol,2003,77(18):9852-9861]。因此HPV-L1表达消失提示病毒基因组己整合在宿主基因组，可用于宫颈癌CIN3期的诊断。Lanminin-5是一种与肿瘤侵袭密切相关的肿瘤标志物，在多种不同类型恶性肿瘤中Lanminin-5基因的表达常与肿瘤的进展密切相关。在宫颈癌的发生过程中，Laminin-5主要表达在肿瘤的早期阶段，特别是在微小浸润的皮损处，因此其可用于宫颈鳞状细胞浸润早期的检测。MIB-I具有与Ki-67类似的表达模式，即在显著的高表达于GINS各期的增殖状态活跃的肿瘤细胞，结合Ki-67检测可用于辅助分析肿瘤细胞所处的周期状态。因此MIB-1是另一重要的检测不典型增生过程中细胞增殖活性的一个重要指标。综上所述，目前虽然己有多种肿瘤标志物用于临床宫颈癌的诊断，但是己有肿瘤标志物因在正常情况下组成性表达、或在非恶性肿瘤疾病中水平也升高，缺乏肿瘤特异性。因此，亟待寻找肿瘤特异性抗原作为生物标志，用于临床宫颈癌的早期诊断和预后判定。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种通过检测GPR19基因表达差异来实现宫颈癌诊断的方法。本专利技术的目的之二在于提供一种通过抑制GPR19基因表达来治疗宫颈癌的方法。本专利技术的目的之三在于提供一种用于筛选宫颈癌治疗药物的方法。本专利技术的目的之四在于提供一种用于治疗宫颈癌的药物。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：本专利技术提供了检测GPR19的试剂在制备诊断宫颈癌的工具中的应用。进一步，所述检测GPR19的试剂包括检测GPR19基因表达量的试剂。更进一步，所述检测GPR19的试剂包括能够定量GPR19基因mRNA的试剂，和/或能够定量GPR19蛋白的试剂。本专利技术的定量GP本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测GPR19的试剂在制备宫颈癌的诊断工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测GPR19的试剂在制备宫颈癌的诊断工具中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测GPR19的试剂包括检测GPR19基因表达量的试剂。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述检测GPR19的试剂包括能够定量GPR19基因mRNA的试剂，和/或能够定量GPR19蛋白的试剂。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述能够定量GPR19基因mRNA的试剂包括实时定量PCR中使用的特异扩增GPR19基因的引物；所述能够定量GPR19蛋白的试剂包括特异性结合GPR19蛋白的抗体。5.一种用于宫颈癌诊断的工具，其特征在于，所述工具包括能够检测GPR19基因表达量的工具；优选的，所述工具包括能够定量GPR19基因mRNA的试剂，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨承刚，孙耀兰，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11