小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按比例混合后得到的混合物，分别用乙醇和水提取得到提取物，再按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并加入金钱白花蛇水解液，用培养基配制成溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。本发明专利技术的有益效果为：本发明专利技术提供的应用，所制备的药物在体外抑制肿瘤的实验中与小艾飞蜜膏、5‑氟脲嘧啶及华蟾素片相同条件下测得的抑制率进行比较，对多种肿瘤细胞均表现出不同程度的抑制作用，且对AGS细胞，SW480细胞抑制作用显著，IC50值分别为0.733mg/ml与0.796mg/ml。

【技术实现步骤摘要】
小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用
本专利技术涉及维药应用
，具体涉及小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用。
技术介绍
肿瘤(tumour)是指机体在各种致瘤因子作用下，局部组织细胞增生所形成的新生物(neogrowth)，因为这种新生物多呈占位性块状突起，也称赘生物(neoplasm)。根据新生物的细胞特性及对机体的危害性程度，又将肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类，而癌症即为恶性肿瘤的总称。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术提供的技术方案为：小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，分别用95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇、25％乙醇和水提取得到五种提取物，再分别按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为0.2-1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，用95％乙醇提取得到提取物，再按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述金钱白花蛇水解液的制备方法为：取金钱白花蛇，称重，粉碎，按照每g体重加20ml的比例加入磷酸盐缓冲液PBS，0℃水解2h，4℃放置24h后，再加磷酸盐缓冲液PBS至磷酸盐缓冲液PBS比例为20ml/g体重,水解2h，过滤，滤液用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述肿瘤细胞为：对数生长期的人胃癌细胞AGS，人胃癌细胞NCI-N87，人大肠癌细胞HT-29,人结肠癌细胞SW480，人结肠癌细胞SW620，人宫颈癌细胞hela，人宫颈癌细胞Siha和/或人宫颈癌细胞C-33A。进一步的，上述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所述肿瘤细胞的体外培养方法为：在5％CO2,37℃的培养箱中用含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基分别培养人胃癌细胞AGS、人宫颈癌细胞hela、人宫颈癌细胞Siha、人大肠癌细胞HT-29和人宫颈癌细胞C-33A，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基分别培养人结肠癌细胞SW480、人结肠癌细胞SW620和人胃癌细胞NCI-N87，2～3d传代一次至对数生长期。小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，分别用95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇、25％乙醇和水提取得到五种提取物，在本专利技术中分别以WY20160801，WY20160802，WY20160803，WY20160804，WY20160805进行表示。本专利技术的有益效果为：本专利技术提供的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，所制备的药物在体外抑制肿瘤的实验中与小艾飞蜜膏、5-氟脲嘧啶及华蟾素片相同条件下测得的抑制率进行比较，系列浓度(0.2mg/ml,0.4mg/ml,0.6mg/ml,0.8mg/ml,1.0mg/ml)各样品溶液除了对MCF-7细胞，对其余细胞均表现出不同程度的抑制作用其中样品WY20160801对各细胞的抑制率均高于其余样品对各细胞的抑制率，且对AGS细胞，SW480细胞抑制作用显著，IC50值分别为0.733mg/ml与0.796mg/ml。各样品抑制作用均呈现浓度依赖性。1mg/ml的样品WY20160801和金钱白花蛇水解液混合物与1mg/ml的小艾飞蜜膏、1mg/ml的5-氟脲嘧啶及1mg/ml的华蟾素片分别作用24h,48h,72h进行比较。与1mg/ml的小艾飞蜜膏相比样品对AGS细胞、HT-29细胞、SW480细胞、SW620细胞、Siha细胞及C-33A细胞在24h,48h,72h均表现出显著性差异，对NCI-N87细胞在72h表现出显著性差异，对Hela细胞在48h,72h表现出显著性差异。与1mg/ml的5-氟脲嘧啶相比样品对AGS细胞和C-33A细胞在24h,48h,72h表现出显著性差异，对NCI-N87细胞、SW480细胞、Siha细胞在24h,48h表现出显著性差异。与1mg/ml的华蟾素片相比样品对AGS细胞和SW480细胞在48h,72h表现出显著性差异。且各药物溶液抑制作用均呈时间依赖性。附图说明图1显示为系列浓度的各样品对人胃癌AGS细胞的增殖抑制率(n＝4)。图2显示为系列浓度的各样品对人胃癌NCI-N87细胞的增殖抑制率(n＝4)。图3显示为系列浓度的各样品对人大肠癌HT-29细胞的增殖抑制率(n＝4)。图4显示为系列浓度的各样品对人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率(n＝4)。图5显示为系列浓度的各样品对人结肠癌SW620细胞的增殖抑制率(n＝4)。图6显示为系列浓度的各样品对人宫颈癌hela细胞的增殖抑制率(n＝4)。图7显示为系列浓度的各样品对人宫颈癌Siha细胞的增殖抑制率(n＝4)。图8显示为系列浓度的各样品对人宫颈癌C-33A细胞的增殖抑制率(n＝4)。图9显示为系列浓度的各样品对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率(n＝4)。图10显示为1mg/ml各药物溶液对AGS细胞的增值抑制率。图11显示为1mg/ml各药物溶液对SW480细胞的增值抑制率。具体实施方式实施例1：1材料与方法：1.1材料：供试样品维药复方小艾飞蜜膏药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇不同浓度乙醇提取物及水提物WY20160801，WY20160802，WY20160803，WY20160804，WY20160805及金钱白花蛇由新疆维吾尔药业公司提供，小艾飞蜜膏，中药对照华蟾素片，西药对照5-氟脲嘧啶。供试瘤株为人胃癌细胞株AGS、人胃癌细胞株NCI-N87、人大肠癌细胞株HT-29、人结肠癌细胞SW480、人结肠癌细胞SW620、人宫颈癌细胞株hela、人宫颈癌细胞株Siha、人宫颈癌细胞株C-33A及人乳腺癌细胞MCF-7。试剂主要有培养基DMEM高糖、培养基RPMI-1640、胎牛血清、胰酶与EDTA消化液、MTT、DMSO(二甲基亚砜)等。供试仪器有荧光倒置显微镜、离心机、冰箱、培养瓶、96孔培养板、超净工作台、CO2培养箱和酶标仪等。1.2方法：1.2.1金钱白花蛇的水解：取一条金钱白花蛇，称重，粉碎，加20mlPBS(磷酸盐缓冲液)低温水解两个小时，在4℃冰箱放置24小时，再水解两个小时，过滤，滤液用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。1.2.2药物溶液的配制：1.2.2.1系列浓度样品溶液的配制：样品WY20160801，WY20160802，W本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，其特征在于，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，分别用95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇、25％乙醇和水提取得到五种提取物，再分别按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI‑1640培养基配制成浓度为0.2‑1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。

【技术特征摘要】
1.小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，其特征在于，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，分别用95％乙醇、75％乙醇、50％乙醇、25％乙醇和水提取得到五种提取物，再分别按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为0.2-1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。2.根据权利要求1所述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，其特征在于，所述药物的制备方法为：小艾飞蜜膏原药材高良姜、干姜、胡椒、荜茇按质量比1:1:1:1的比例混合后得到的混合物，用95％乙醇提取得到提取物，再按1ml/g的比例用二甲基亚砜DMSO溶解，并按照质量比1:1的比例加入金钱白花蛇水解液，用DMEM高糖/RPMI-1640培养基配制成浓度为1.0mg/ml的溶液，用微孔滤膜过滤，在4℃条件下储存，即可得到所述药物。3.根据权利要求1或2所述的小艾飞蜜膏在制备用于抑制肿瘤细胞的药物中的应用，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：热娜·卡斯木，尹强，尹海龙，穆丹丹，田芳，西仁阿依，
申请(专利权)人：新疆医科大学，
类型：发明
国别省市：新疆,65