高羊茅茎秆中内生真菌检测方法技术

本发明专利技术公开了一种高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；对茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；使用消毒后的镊子和小刀将茎秆纵向切开，裸露出茎髓；用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上；向茎髓物质滴上染色剂，染色操作45至60秒；将盖玻片放置在茎髓物质上，挤压4至5次，将茎髓物质均匀铺开；对高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。相比现有技术，本发明专利技术具有染色效率高，观察方便，成本低的特点。

Detection of Endophytic Fungi in Tall Fescue Stems

The invention discloses a method for detecting endophytic fungi in tall fescue stalks, which cuts tall fescue plants into 5 to 8 cm segments, removes the external epidermis and takes the stalk part, wipes the stalk surface with 50% alcohol solution and disinfects the surface, and cuts the stalk longitudinally with sterilized tweezers and knives, and bares the stalk. Exposing the stem pith; scraping part of the stem pith material with tweezers and placing it on the disinfected glass plate; dropping dye on the stem pith material for 45 to 60 seconds; placing the cover slide on the stem pith material, squeezing it 4 to 5 times, evenly spreading the stem pith material; detecting endophytic fungi in tall fescue stem samples and obtaining detection Result. Compared with the prior art, the invention has the advantages of high dyeing efficiency, convenient observation and low cost.

【技术实现步骤摘要】
高羊茅茎秆中内生真菌检测方法
本专利技术涉及真菌检测领域，尤其涉及一种高羊茅茎秆中内生真菌检测方法。
技术介绍
高羊茅学名：FestucaelataKengexE.Alexeev，又名：羊茅，属禾本目，禾本科多年生地被植物。按功能用途分类：分草坪型(观赏)、牧草型(作为牧草饲养牲畜)。性喜寒冷潮湿、温暖的气候，在肥沃、潮湿、富含有机质、pH值为4.7-8.6的细壤土中生长良好。大量应用于运动场草坪和防护草坪。作为牧草饲养牲畜。但是，目前的研究发现，许多高羊茅自主内含有内生真菌，会产生生物碱，对牛羊产生危害，所以，对牧草进行内生真菌检测具有重大意义。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术的不足与缺陷，本专利技术提供一种染色效率高，观察方便，成本低的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法。技术方案：本专利技术所述的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，包括下述步骤，(1)将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；(3)使用消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开，裸露出茎髓；(4)用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上；(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上染色剂，染色操作45至60秒；(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上，挤压4至5次，将茎髓物质均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。其中，所述的步骤(3)采用高温湿热法对镊子和小刀进行消毒。其中，所述的步骤(4)的玻璃板采用长度为4厘米，宽度为1.5厘米的玻璃板。其中，所述的步骤(5)的染色剂采用孟加拉红染色剂。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有以下显著优点：本专利技术的检测方法染色效率高，观察方便，成本低。具体实施方式实施例1：本实施例的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，包括下述步骤，(1)将高羊茅植株剪成5厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；(3)使用采用高温湿热法消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开，裸露出茎髓；(4)用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上,玻璃板采用长度为4厘米，宽度为1.5厘米的玻璃板；(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上孟加拉红染色剂，染色操作45秒；(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上，挤压4次，将茎髓物质均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。实施例2：本实施例的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，包括下述步骤，(1)将高羊茅植株剪成8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；(3)使用采用高温湿热法消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开，裸露出茎髓；(4)用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上,玻璃板采用长度为4厘米，宽度为1.5厘米的玻璃板；(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上孟加拉红染色剂，染色操作60秒；(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上，挤压5次，将茎髓物质均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；(3)使用消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开，裸露出茎髓；(4)用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上；(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上染色剂，染色操作45至60秒；(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上，挤压4至5次，将茎髓物质均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。

【技术特征摘要】
1.高羊茅茎秆中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段，去除外部的表皮，取茎秆部分；(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50％酒精溶液对其表面进行擦拭，进行表面消毒；(3)使用消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开，裸露出茎髓；(4)用镊子刮取部分茎髓物质，放置到消毒后的玻璃板上；(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上染色剂，染色操作45至60秒；(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上，挤压4至5...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵万均，
申请(专利权)人：邵万均，
类型：发明
国别省市：江苏,32