披碱草叶片中内生真菌检测方法技术

本发明专利技术公开了一种披碱草叶片中内生真菌检测方法，将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；将叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20至40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；将叶片剪成1至2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；将叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20至25小时；将叶片小块放入玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；将盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2至3次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；对披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。本发明专利技术具有检测准确性高、操作简单、对叶表皮和叶肉分别进行内生真菌检测的特点。

Detection of Endophytic Fungi in Elymus Elymus Leaves

The invention discloses a method for detecting endophytic fungi in the leaves of Elymus dahurica. The leaves of Elymus dahurica plants are completely removed, the wilting parts are cut off, and the fresh green leaves are taken out. The leaves are washed in 50% alcohol solution for 20 to 40 seconds, then in 1% sodium hypochlorite solution for 8 to 10 seconds, and the leaves are washed twice with clean water. After drying, cut the leaves into 1 to 2 cm segments and cut the edges to keep the middle pieces of the leaves; soak the leaves in dye solution for 20 to 25 hours; put the leaves into glass dishes and separate the epidermis from the mesophyll; place the cover glass on the epidermis and the mesophyll of the leaves, and squeeze them for 2 to 3 times. Secondly, the leaf epidermis was flattened so that the mesophyll was evenly spread out. The leaf samples of Elymus dahurica were tested and the results were obtained. The invention has the characteristics of high detection accuracy, simple operation and detection of Endophytic Fungi on leaf epidermis and mesophyll respectively.

【技术实现步骤摘要】
披碱草叶片中内生真菌检测方法
本专利技术涉及真菌检测领域，尤其涉及一种披碱草叶片中内生真菌检测方法。
技术介绍
披碱草，拉丁学名：ElymusdahuricusTurcz.禾本科、披碱草属的多年生草本植物，秆疏丛，直立，基部膝曲。叶鞘光滑无毛；叶片扁平，稀可内卷，上面粗糙，下面光滑，有时呈粉绿色，穗状花序直立，较紧密，穗轴边缘具小纤毛，小穗绿色，成熟后变为草黄色，颖披针形或线状披针形，外稃披针形，全部密生短小糙毛，先端延伸成芒，芒粗糙，成熟后向外展开；内稃与外稃等长，先端截平，脊上具纤毛，至基部渐不明显，脊间被稀少短毛。目前，已经在披碱草中发现内生真菌，但对其叶片还没有具体的内生真菌检测方法。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术的不足与缺陷，本专利技术提供一种检测准确性高、操作简单、对叶表皮和叶肉分别进行内生真菌检测的披碱草叶片中内生真菌检测方法。技术方案：本专利技术所述的披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20至40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；(3)将步骤(2)获得的叶片剪成1至2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20至25小时；(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；(6)将盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2至3次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。其中，所述的步骤(3)通过高温消毒后的剪刀对叶片进行剪切。其中，所述的步骤(5)中的玻璃皿为直径9厘米的玻璃皿。其中，所述的步骤(6)中的盖玻片为边长1.5厘米的正方形盖玻片。有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有以下显著优点：本专利技术披碱草叶片中内生真菌检测方法的检测准确性高、操作简单、对叶表皮和叶肉分别进行内生真菌检测。具体实施方式实施例1：本实施例的披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8秒，使用清水清洗2次后晾干待用；(3)将步骤(2)获得的叶片使用通过高温消毒后的剪刀剪成1厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20小时；(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入直径9厘米的玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；(6)将边长1.5厘米的正方形盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。实施例2：本实施例的披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；(3)将步骤(2)获得的叶片通过高温消毒后的剪刀剪成2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡25小时；(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入直径9厘米的玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；(6)将边长1.5厘米的正方形盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压3次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。实施例3：披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗30秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗9秒，使用清水清洗2次后晾干待用；(3)将步骤(2)获得的叶片通过高温消毒后的剪刀剪成1.5厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡22小时；(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入直径9厘米的玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；(6)将边长1.5厘米的正方形盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20至40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；(3)将步骤(2)获得的叶片剪成1至2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20至25小时；(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；(6)将盖玻片分别放置在叶片表皮和叶肉上，挤压2至3次，将叶片表皮压平，使叶肉均匀铺开；(7)对步骤(6)获得的披碱草叶片样品进行检测并获得检测结果。

【技术特征摘要】
1.披碱草叶片中内生真菌检测方法，其特征在于：包括下述步骤，(1)将披碱草植株的叶片完整取下，剪去枯萎部分，取鲜活绿色叶片部分；(2)将步骤(1)获得的叶片部分放入50％酒精溶液中清洗20至40秒，然后放入1％次氯酸钠溶液中清洗8至10秒，使用清水清洗2次后晾干待用；(3)将步骤(2)获得的叶片剪成1至2厘米的小段，并将边缘剪除，留取叶片中间小块；(4)将步骤(3)获得的叶片小块放入染色剂溶液中浸泡20至25小时；(5)将步骤(4)获得的叶片小块放入玻璃皿中，将叶片表皮与叶肉分离；(6)将盖...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵万均，
申请(专利权)人：邵万均，
类型：发明
国别省市：江苏,32