一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂，包括如下质量百分比的组分：促生菌菌液1％‑10％，聚谷氨酸0.1％‑10％，生物有机质50％‑70％，余量为水或水溶液；所述促生菌菌液包括骆驼刺泛菌(Pantoea alhagi)菌液。本发明专利技术还公开了上述复合微生物液体菌剂的制备方法与应用。本发明专利技术的复合微生物液体菌剂，具有高活性生物功能，其中聚谷氨酸、生物有机质和微生物菌剂具有协同增效作用，可改善作物根系的微生物群环境，增加土壤中有益微生物的数量，能提高作物的品质，提高产量，并加强作物对抗旱、抗盐、抗寒、抗病等的抗逆能力。

【技术实现步骤摘要】
一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及微生物菌剂，具体涉及一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
我国是世界农业大国，随着我国农业的飞速发展，化肥的使用量也越来越大，每年的用量达到180万吨。这虽然解决了粮食增产以及供应的问题，却造成了非常严重的环境问题。化肥的超量使用加重了土壤的板结与污染，导致土壤质量的下降与退化，这使得土壤有机质含量严重低于全球的平均水平。一旦土壤有机质含量低，将大幅降低对重金属固定的能力，增加了土壤重金属的危害性，危害了我国农业的可持续发展。微生物菌剂是一种能优化土壤理化性质，提高作物对养分的吸收及利用效率，进而促进作物生长的新型农业生物制剂，它具有经济环保、改良土壤和肥料增效等效用。此外，还能增强作物的抗干旱，抗低温，抗高盐等抗逆能力。近年来，以微生物菌剂作为生物肥料的研究越来越多，特别是微生物液体菌剂具有生产成本低、使用方便、促生及抗逆效果明显等优点。但因现有技术水平限制，目前市场上所售的微生物液体菌剂都存在有效菌数含量低，有效菌易失活等缺陷，特别是市售菌剂一旦拆封后，其有效菌含量将断崖式下跌，大大降低了菌剂的效用，增加了农民的使用成本。
技术实现思路
专利技术目的：为了解决现有微生物液体菌剂有效菌含量低且易失活的问题，本专利技术提供了一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂，本专利技术进一步提供了微生物液体菌剂的制备方法，本专利技术更进一步地提供了微生物液体菌剂的应用。技术方案：本专利技术所述一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂，包括如下质量百分比的组分：促生菌菌液1％-10％，聚谷氨酸0.1％-10％，生物有机质50％-70％，余量为水或水溶液；所述促生菌菌液包括骆驼刺泛菌(Pantoeaalhagi)菌液。优选地，促生菌菌液5％-10％，聚谷氨酸0.5％-8％，生物有机质50％-65％，余量为水或水溶液。更优选地，促生菌菌液8％-10％，聚谷氨酸1％-5％，生物有机质55％-65％，余量为水或水溶液。优选地，所述骆驼刺泛菌菌液为骆驼刺泛菌发酵液，发酵液中活菌数为1×109-9×1010CFU/mL；所述骆驼刺泛菌其分类命名为骆驼刺泛菌(Pantoeaalhagi)，菌株号为XK-11，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2018年3月29日，保藏编号为CGMCCNO.15525，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所保藏中心，邮编100101。该菌株是专利技术人于2017年10月从浙西大峡谷选育的菌株。骆驼刺泛菌XK-11具有下述性质：1、菌落形态学特征在LB培养基30℃培养16-24h后显微镜观察到细胞为单细胞，杆状，菌体长1.4-2.0μm，宽0.7-1.0μm。属于革兰氏阴性菌、具有鞭毛能够运动、兼性厌氧。在上述培养基中30℃培养12h菌体可以大量生长，菌落呈米黄色，圆形，表面光滑，粘状，中间凸起。其生长的温度范围是7-48℃，最适温度为35-39℃，生长的pH范围是5.0-9.5，最适pH为6.5-7.5。具有氨苄霉素抗性(100μg/mL)，能在LB、R2A、NA、TSA、MC等培养基中正常生长。2、16SrDNA序列分析16SrDNA序列长度1488bp，核苷酸序列见SEQIDNO.1。将16SrDNA序列和GeneBank数据库中的相关种进行比较，构建16SrDNA全序列为基础的系统发育树。结果表明：菌株XK-11与骆驼刺泛菌达到100％同源。所以认定本专利技术的菌株为骆驼刺泛菌(Pantoeaalhagi)，菌株号为PantoeaalhagiXK-11。其中，所述促生菌菌液还包括枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)发酵液中的任意一种或几种的组合，枯草芽孢杆菌发酵液、胶冻样芽孢杆菌发酵液或解淀粉芽孢杆菌发酵液中活菌数为1×109-9×1010CFU/mL，促生菌在微生物液体制剂中的活菌数≥5×109CFU/mL。促生菌菌液的添加量按照骆驼刺泛菌、枯草芽孢杆菌、胶冻样芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌中任意一种或组合的总和计算，微生物液体菌剂中有效活菌数≥5×109CFU/mL。枯草芽孢杆菌、胶冻样芽胞杆菌、解淀粉芽孢杆菌由高密度发酵所得，并通过冷藏法使菌体进入芽孢形态，芽孢状态是芽孢杆菌的休眠状态，在不萌发的状态下可存活几年及至几十年。优选地，所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2016264，胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2016265，解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2016266，记载于专利2016106658324中。优选地，所述促生菌菌液为骆驼刺泛菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、胶冻样芽孢杆菌发酵液和解淀粉芽孢杆菌发酵液的组合，其体积比为0.1-10:0.1-10:0.1-10:0.1-10。其中，所述聚谷氨酸重均分子量为5-3000kDa，优选分子量为5-50kDa，所述聚谷氨酸为聚谷氨酸纯品、聚谷氨酸盐纯品、聚谷氨酸发酵液、聚谷氨酸发酵液干燥物和聚谷氨酸可湿性粉剂中的任意一种或几种的组合。聚谷氨酸的添加量以聚谷氨酸纯品、或聚谷氨酸盐纯品、或聚谷氨酸发酵液、或聚谷氨酸发酵液干燥物、或聚谷氨酸可湿性粉剂中所含的聚谷氨酸计算。上述聚谷氨酸的相关产品通过现有的发酵技术制备。当聚谷氨酸为聚谷氨酸发酵液时，微生物液体菌剂中聚谷氨酸的质量以发酵液中聚谷氨酸含量计算，水溶液即为聚谷氨酸发酵液(不包括其中的聚谷氨酸)。聚谷氨酸是一种特殊的阴离子高分子聚合物，侧链含有大量羧基基团，这些基团赋予其特殊的生物活性，作为一种粘附性的物质，聚谷氨酸可为促生菌中芽孢杆菌提供夹膜保护，促使芽孢杆菌形成一种外在的包裹生物膜系统，由此隔断促生菌细胞内外的物质交换，达到一种平衡稳态。其中，所述生物有机质为生化黄腐酸、糖蜜和酵母提取物中任意一种或几种的组合。生物有机质的添加量按照酵母提取物、糖蜜、生化黄腐酸中任意一种或组合的总和计算。上述生物有机质均可从市场购买或者按照现有技术制备。其中，酵母提取物主要成分为多肽，氨基酸，微量元素等。生物有机质在本专利技术使用比例下，可通过形成高渗透压环境来抑制芽孢杆菌的芽孢萌发，维持微生物液体菌剂中的芽孢杆菌处于芽孢状态。而当菌剂被稀释后施用于农作物时，生物有机质浓度降低，随即改变其“身份”，成为芽孢萌发及微生物增殖的营养成分。此外，生物有机质还可以改善土壤结构，降低土壤板结率，解决土壤酸化等问题。本专利技术进一步提供所述微生物液体菌剂的制备方法，步骤如下：将促生菌菌液、聚谷氨酸和生物有机质按照质量百分比混匀，即得微生物液体菌剂。其中，骆驼刺泛菌发酵液的制备步骤如下：骆驼刺泛菌接种于LB培养基中活化12-24h，活化温度为25-35℃，将活化的骆驼刺泛菌接种于液体发酵培养基中，30-35℃培养36-50h得到发酵液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂，其特征在于，包括如下质量百分比的组分：促生菌菌液1％‑10％，聚谷氨酸0.1％‑10％，生物有机质50％‑70％，余量为水或水溶液；所述促生菌菌液包括骆驼刺泛菌(Pantoea alhagi)菌液。

【技术特征摘要】
1.一种含骆驼刺泛菌的微生物液体菌剂，其特征在于，包括如下质量百分比的组分：促生菌菌液1％-10％，聚谷氨酸0.1％-10％，生物有机质50％-70％，余量为水或水溶液；所述促生菌菌液包括骆驼刺泛菌(Pantoeaalhagi)菌液。2.根据权利要求1所述的微生物液体菌剂，其特征在于，所述骆驼刺泛菌菌液为骆驼刺泛菌发酵液，发酵液中活菌数为1×109-9×1010CFU/mL；所述骆驼刺泛菌(Pantoeaalhagi)在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNO.15525。3.根据权利要求2所述的微生物液体菌剂，其特征在于，所述促生菌菌液还包括枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)中任意一种发酵液或几种发酵液的组合，枯草芽孢杆菌发酵液、胶冻样芽孢杆菌发酵液或解淀粉芽孢杆菌发酵液中活菌数为1×1010-9×1010CFU/mL，促生菌在微生物液体制剂中的活菌数≥5×109CFU/mL。4.根据权利要求3所述的微生物液体菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCCNO:M2016264，胶冻样芽孢杆菌(Bacillus...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯小海，徐虹，许宗奇，周哲，
申请(专利权)人：南京轩凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32