限进型色谱填料及其制备方法和包含其的固定相以及应用技术

本发明专利技术提供了一种限进型色谱填料及其制备方法和包含其的固定相以及应用，所述制备方法包括如下步骤：(1)使带负电荷的多孔材料和带有正电荷的聚合物微球发生反应，得到表面吸附有聚合物微球的多孔材料；(2)在步骤(1)得到的多孔材料内部孔道内引入功能基团，得到带有功能基团的多孔材料；(3)在不破坏多孔材料孔道内功能基团的前提下，除去多孔材料表面吸附的聚合物微球；(4)对步骤(3)得到的多孔材料外表面进行化学修饰，使外表面具有亲水性，得到所述限进型色谱填料。本发明专利技术提供的限进型色谱填料对蛋白具有很高的排阻率，而且对于小分子物质显示出较强的保留能力和分离能力。

Limited-entry chromatographic packing, its preparation method, stationary phase containing it and its application

The invention provides a limited-entry chromatographic filler, a preparation method thereof, a stationary phase containing the filler and its application. The preparation method comprises the following steps: (1) reacting a negative-charged porous material with a positive-charged polymer microsphere to obtain a porous material with a polymer microsphere adsorbed on the surface; (2) obtaining a polymer microsphere in step (1) The porous materials with functional groups are obtained by introducing functional groups into the inner channels of porous materials; (3) removing polymer microspheres adsorbed on the surface of porous materials without destroying functional groups in the channels; (4) chemically modifying the outer surface of porous materials obtained by step (3) to make the outer surface of porous materials have affinity. Water-borne, the limited-entry chromatographic packing is obtained. The limited-entry chromatographic filler provided by the invention has high exclusion rate for protein, and shows strong retention and separation ability for small molecular substances.

【技术实现步骤摘要】
限进型色谱填料及其制备方法和包含其的固定相以及应用
本专利技术属于色谱分离材料的
，涉及一种限进型色谱填料及其制备方法和包含其的固定相以及应用。
技术介绍
生物和环境样品基体复杂以及被测物浓度低，决定了在测定前必须对其进行合适的前处理。固相萃取由于具有较短的萃取时间、较高的回收率、较高的富集因子、较少的试剂消耗、易于实现自动化及无相分离操作等优点，目前已经成为最为常用的生物体液及环境水样的样品前处理方法。当用固相萃取分离富集生物组织样品中的小分子分析物时，经常碰到的一个问题就是样品中的生物大分子如蛋白质及核酸等，遇到疏水性反相固相萃取填料时发生生物大分子的变性，变性后的大分子物质会吸附在填料的表面，造成填料孔径堵塞、分析物在固定相上的传质效率下降等不利现象，从而使柱效降低、吸附容量下降、萃取柱寿命缩短，最终造成对小分子分析物测定的严重干扰。限进介质固相萃取吸附剂在一定程度上克服了上述不足，这类吸附剂同时兼具针对大分子的体积排阻功能和针对小分子分析物的萃取功能，通过控制吸附剂合适的孔径和对吸附剂外表面进行适当的亲水性修饰，使得生物或环境样品溶液中的大分子不能进入吸附剂的内孔中去，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种限进型色谱填料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)使带负电荷的多孔材料和带有正电荷的聚合物微球发生反应，得到表面吸附有聚合物微球的多孔材料；(2)在步骤(1)得到的多孔材料内部孔道内引入功能基团，得到带有功能基团的多孔材料；(3)在不破坏多孔材料孔道内功能基团的前提下，除去多孔材料表面吸附的聚合物微球；(4)对步骤(3)得到的多孔材料外表面进行化学修饰，使外表面具有亲水性，得到所述限进型色谱填料。

【技术特征摘要】
1.一种限进型色谱填料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)使带负电荷的多孔材料和带有正电荷的聚合物微球发生反应，得到表面吸附有聚合物微球的多孔材料；(2)在步骤(1)得到的多孔材料内部孔道内引入功能基团，得到带有功能基团的多孔材料；(3)在不破坏多孔材料孔道内功能基团的前提下，除去多孔材料表面吸附的聚合物微球；(4)对步骤(3)得到的多孔材料外表面进行化学修饰，使外表面具有亲水性，得到所述限进型色谱填料。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述聚合物微球的粒径为50-500nm，所述多孔材料的孔径为6-100nm，且所述聚合物微球的粒径与所述多孔材料的孔径比≥1.2；优选地，所述多孔材料的粒径为0.5-100μm，进一步优选2-50μm；优选地，所述多孔材料的粒径与所述聚合物微球的粒径比≥10；优选地，所述聚合物微球包括聚环氧丙基丙烯酸酯微球、聚甲基丙烯酸缩水甘油酯微球和聚苯乙烯类树脂微球中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述聚苯乙烯类树脂微球包括苯乙烯-二乙烯基苯共聚物微球、二乙烯基苯-乙烯基苄基氯共聚物微球、甲基丙烯酸酯-乙烯基苄基氯共聚物微球和二乙烯基苯-乙烯基苄基缩水甘油醚共聚物微球中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述多孔材料包括硅胶、氧化铝、氧化钛和有机无机杂化材料中的任意一种或至少两种的组合，进一步优选硅胶材料，更进一步优选硅胶微球。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述带有负电荷的多孔材料的制备方法为：将多孔材料在pH为6-12的条件下进行处理，使多孔材料带负电；优选地，所述pH为8-10。4.根据权利要求1-3中的任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述功能基团的引入方式为通过化学键合的方式引入功能基团；优选地，所述功能基团为反相功能性基团和/或离子交换基团中的任意一种或至少两种的组合；优选地，所述功能基团为取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳香基、酰胺、磺酰胺、氨基甲酸酯、尿素、乙醚、羧基、磺酸、氨基、氰基、环氧乙烷、带有磺酸基的阳离子交换基团和带有二乙胺乙基的阴离子交换基团中的任意一种或至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓东，刘晓艳，
申请(专利权)人：纳谱分析技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32