细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体制造技术

本发明专利技术涉及一种细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体，包括步骤：采用pReceiver‑M98质粒，构建出用EGFP标记LRP4的完整开放阅读框架的真核表达载体，得到重组质粒；将重组质粒转染培养好的HEK293T细胞，得到携带重组质粒的HEK293T细胞；将携带重组质粒的表达细胞依次进行培养、细胞固定、封闭和孵育，然后采用荧光显微镜进行观察，检测出低密度脂蛋白受体相关蛋白。本发明专利技术提供的采用细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体，因抗原抗体一一对应，特异性几乎达到100％，为重症肌无力患者的诊治提供了必要的实验依据，对重症肌无力患者的诊治提供了新的方向，具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体
本专利技术涉及医学
，具体涉及一种细胞分析法检测低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体。
技术介绍
自1672年重症肌无力(MG)被发现以来，其发病机制通常被认为主要与乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)介导的体液免疫息息相关，但是随着众多科学家对MG免疫学发病机制的深入研究，现在普遍认为多种肌肉抗原(例如：MuSK-Ab)、补体系统、抗原特异性T淋巴细胞、细胞因子以及胸腺等均对MG的发病起到了重要作用。对MG患者进行血清学抗体检测及其免疫学致病机制的研究已经逐渐成为世界范围内该病讨论的热点问题，约有85％的MG患者血清中可检测出AChR-Ab；余下的MG患者约有70％血清中可以检测出肌肉特异性酪氨酸激酶抗体(MuSK-Ab)。实验证实，在贵州高海拔多民族聚集地区所收集的共计116例MG患者中，AChR-Ab单阳性率为50.0％。其中女性占大多数；分型以眼肌型及轻度全身型为主。56名未检测出AChR-Ab抗体的MG患者中仅有6人(10.7％)检测出MuSK-Ab阳性。这个比例远低于欧美人种的数据，但与国内相关资料接近。虽然大部分的MG患者可检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测低密度脂蛋白受体相关蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：构建重组质粒；将所述重组质粒转染培养好的HEK293T细胞，得到携带重组质粒的HEK293T细胞；将所述携带重组质粒的HEK293T细胞依次进行培养、细胞固定、封闭和孵育，然后采用荧光显微镜进行观察，检测出低密度脂蛋白受体相关蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种检测低密度脂蛋白受体相关蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：构建重组质粒；将所述重组质粒转染培养好的HEK293T细胞，得到携带重组质粒的HEK293T细胞；将所述携带重组质粒的HEK293T细胞依次进行培养、细胞固定、封闭和孵育，然后采用荧光显微镜进行观察，检测出低密度脂蛋白受体相关蛋白。2.根据权利要求1所述的检测低密度脂蛋白受体相关蛋白的方法，其特征在于：所述重组质粒，是采用pReceiver-M98质粒，构建出用EGFP标记LRP4的完整开放阅读框架的真核表达载体。3.根据权利要求1所述的检测低密度脂蛋白受体相关蛋白的方法，其特征在于，所述培养具体包括步骤：将经多聚赖氨酸处理的细胞爬片置于24孔细胞培养板中，然后加入所述携带重组质粒的HEK293T细胞进行培养。4.根据权利要求1所述的检测低密度脂蛋白受体相关蛋白的方法，其特征在于：所述细胞固定是当携带重组质粒的HEK293T细胞的密度为70％～80％时...

【专利技术属性】
技术研发人员：楚兰，李媛，张艺凡，贺电，蔡刚，
申请(专利权)人：楚兰，李媛，张艺凡，贺电，蔡刚，
类型：发明
国别省市：贵州,52