一种细胞外基质冻干粉的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种细胞外基质冻干粉的用途，所述细胞外基质冻干粉由新鲜哺乳动物组织，经漂洗，消毒，脱脂，漂洗，脱细胞，清洗，匀浆，提取，冻干所得。本发明专利技术细胞外基质冻干粉保留了动物组织中多型胶原、蛋白多糖和生长因子等多种活性物质，具有多种生物学活性，生物相容性好，可促进组织再生，具有抗氧化、修复、抗衰等优点，也可以诱导细胞的增殖、迁移和分化，还可作为结构支撑，具备填充功能。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞外基质冻干粉的用途
本专利技术涉及一种细胞外基质冻干粉的用途，具体涉及一种具有多种生物学活性、生物相容性好的细胞外基质冻干粉的用途。
技术介绍
随着人类生活环境的不断恶化，人体每天都要承受来自外界的伤害。紫外线、废气污染、雾霾、生活压力等都会导致细胞受损。与此同时，人们的生活水平提高后，对生活品质的要求也越来越关注，比如对身体健康、医学美容等的需求。环境污染带来的皮肤问题主要有五大类，干、斑、暗疮、皱纹、敏感。1、干：皮脂分泌少，皮肤干燥，缺少光泽，容易产生皱纹，起皮，有紧绷的感觉。主要原因是肌肤内结水含量低下，细胞容易受损害。深层次的原因就是紫外线照射，使皮肤表皮温度升高，表皮层的保湿因子，脂类物质受损，角质细胞受损，胶原减少，使皮肤细胞间隙增大，水分流失，造成缺水。另外一个原因也是由于不正常的生活习惯，压力过大和护理不当，环境气候干燥，导致肌肤皮质和汗水分泌减少，外层皮肤受到损伤，失去水分，造成干燥缺水。2、斑：环境大气污染，劣质化妆品，内分泌失调等因素，会刺激黑色素细胞的活跃，是黑色素增多，通过角质细胞上移到表皮，分布不均衡形成色斑。3、暗疮：油脂分泌增加角质层，过度角化，堵塞毛孔。表层有细菌、痤疮丙酸杆菌的侵扰，炎症不断产生。肌肤缺水，导致水分代谢异常，肌肤排泄不通畅，形成暗疮。4、皱纹：随着年龄的增加，真皮和表皮内的细胞和细胞间质含量减少，真皮层的胶原弹力纤维，胶原蛋白分解加大，网状纤维结构疏松，导致皮肤内部向外张力不断减少，胶原合成能力下降，纤维受损不能及时修复，使皮肤抵抗紫外线能力降低，令肌肤出现凹陷，局部沉陷，形成皱纹。另外紫外线的照射，会导致真皮胶原纤维的变性，使网状纤维结构失去弹性。使基底真皮细胞、包囊、表皮组织受损，肌肤屏障功能降低，细胞功能降低，肌肤合成胶原的总量减少。5、敏感：敏感肌肤是现在越来越多人面临的肌肤困扰，长期暴露于恶劣的气候或污染的环境中、过度使用碱性洁肤产品、在祛斑过程中采用过激途径“换肤”，长期使用药物(类固醇激素的外用药)的化妆品等，使得角质层变薄，抵抗力变弱。激素脱敏，防御系统机能下降，形成恶性依赖。本专利技术的细胞外基质冻干粉通过冻干的形式保存了多种生物学活性，且含有的胶原、蛋白多糖、生长因子等通过与不同的化妆品原料配伍，能够制备出多种改善上述的肌肤问题不同产品。另外，整形美容在世界市场范围内已经形成为新兴的产业，美国、日本、韩国整形手术比例是中国的两倍左右。随着整体健康观念的形成，中国美容业的发展将快速提升，每年以超过20％的速度增长，2004年有100万人整过容，中国正规医美疗程量全球市场占有率为10％，已为全球第三大市场；2016年，全球医疗美容市场规模约为100亿美元，预计将以7.27％的年复合增长率增长，于2020年达到133.4亿美元规模。而中国未来5年内增速有望维持在40％以上，2017年的医疗美容市场规模可超过千亿人民币，行业前景广阔。但是目前市场是以玻尿酸和肉毒素注射为主，填充是以医用硅橡胶、自体软骨、自体脂肪、膨体(聚四氟乙烯)等。自体组织由于来源于自身，一般不会出现排异现象和致敏，但是制作过程中塑形比较困难。固体硅橡胶等材料因为无毒无害，组织相容性相对稳定，是主要的医用假体隆鼻材料，制作过程中易于塑形，但是硅橡胶植入体植入体内后容易发生移位及磨损。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种细胞外基质冻干粉的用途，所述细胞外基质冻干粉含有多种活性成分，具有多种生物学活性，生物相容性好，可促进组织再生，具有抗氧化、修复、抗衰等优点，也可以诱导细胞的增殖、迁移和分化，还可作为结构支撑，具备填充功能。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种细胞外基质冻干粉在制备美白祛斑抗衰老护肤品中的用途，所述细胞外基质冻干粉制备方法包括以下步骤：(1)取动物组织，脱脂、脱细胞后清洗，得到细胞外基质粗提物；(2)步骤(1)获得的细胞外基质粗提物经过酶提取、尿素提取、酸提取或水提取后，离心取上清液或者过滤取滤液，然后通过透析法、有机沉淀法或者盐沉淀法获得细胞外基质提取物；(3)将步骤(2)获得的细胞外基质提取物进行过滤或者离心，滤液或者上清液与单糖或二糖混合，混合液先于-20℃中冷冻3～6h，然后于-40～-80℃中冷冻干燥12～72h，即得所述细胞外基质冻干粉。优选地，所述步骤(1)中动物组织选自小肠、神经、膀胱、皮肤、心包、肾脏、胎盘、脂肪或肌肉；所述动物组织来源于猪、牛或羊。优选地，所述步骤(2)中酶提取的方法为：将浓度为0.01～1％的酶与细胞外基质粗提物按照重量比为1:(5～20)混匀，然后震荡12～36h。更优选地，所述步骤(2)中酶提取的方法为：将浓度为0.1％的酶与细胞外基质粗提物按照重量比为1:10混匀，然后震荡24h。优选地，所述酶选自胃蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶和胰酶中的至少一种。优选地，所述步骤(2)中尿素提取的方法为：将尿素与tris-HCl、EDTA和盐酸胍中的至少一种混合，使混合物中尿素、tris-HCl、EDTA、盐酸胍的浓度分别为1～8mol/L、0.05～1mol/L、0.001～0.1mol/L、0.1～2mol/L，所述混合物与细胞外基质粗提物按照重量比为1:(5～20)混匀，然后震荡6～24h。更优选地，所述步骤(2)中尿素提取的方法为：将尿素与tris-HCl、EDTA和盐酸胍中的至少一种混合，使混合物中尿素、tris-HCl、EDTA、盐酸胍的浓度分别为2mol/L、0.1mol/L、0.01mol/L、1mol/L，所述混合物与细胞外基质粗提物按照重量比为1:10混匀，然后震荡12h。优选地，所述步骤(2)中酸提取的方法为：将酸与细胞外基质粗提物按照重量比为1:(5～20)混匀，使混合物最终的pH值为1～3，然后震荡6～24h。更优选地，所述步骤(2)中酸提取的方法为：将酸与细胞外基质粗提物按照重量比为1:10混匀，使混合物最终的pH值为2，然后震荡12h。优选地，所述酸选自盐酸、硫酸、醋酸、乳酸和乙醇酸中的至少一种。优选地，所述步骤(2)中水提取的方法为：将pH值为4～7的磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、碳酸盐缓冲液和醋酸盐缓冲液中的至少一种与细胞外基质粗提物按照重量比为1:(5～20)混匀，然后震荡6～24h。更优选地，所述步骤(2)中水提取的方法为：将pH值为6.5的磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲液、2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、碳酸盐缓冲液和醋酸盐缓冲液中的至少一种与细胞外基质粗提物按照重量比为1:10混匀，然后震荡12h。优选地，所述步骤(2)中透析法为：所述上清液或滤液使用截留分子量为1000～50000Da的透析袋，流水透析8～24h，至电导率为1.5um/s以下即可；所述有机沉淀法为：向所述上清液或滤液中加入乙醇、异丙醇、丙醇和丙二醇中的至少一种，使其终浓度为60～90％，搅拌均匀即可；所述盐沉淀法为：向所述上清液或滤液中加入氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、硫酸钠、硫酸钾、硫酸钙和硫酸镁中的至少一种，使其终浓度为0.5～4mol/L，搅拌均匀即可。优选地，所述步骤(3)中滤液或上清液与单糖或二糖混合后，混合液中单糖或二糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞外基质冻干粉在制备美白祛斑抗衰老护肤品中的用途，其特征在于，所述细胞外基质冻干粉制备方法包括以下步骤：(1)取动物组织，脱脂、脱细胞后清洗，得到细胞外基质粗提物；(2)步骤(1)获得的细胞外基质粗提物经过酶提取、尿素提取、酸提取或水提取后，离心取上清液或者过滤取滤液，然后通过透析法、有机沉淀法或者盐沉淀法获得细胞外基质提取物；(3)将步骤(2)获得的细胞外基质提取物进行过滤或者离心，滤液或者上清液与单糖或二糖混合，混合液先于‑20℃中冷冻3～6h，然后于‑40～‑80℃中冷冻干燥12～72h，即得所述细胞外基质冻干粉。

【技术特征摘要】
1.一种细胞外基质冻干粉在制备美白祛斑抗衰老护肤品中的用途，其特征在于，所述细胞外基质冻干粉制备方法包括以下步骤：(1)取动物组织，脱脂、脱细胞后清洗，得到细胞外基质粗提物；(2)步骤(1)获得的细胞外基质粗提物经过酶提取、尿素提取、酸提取或水提取后，离心取上清液或者过滤取滤液，然后通过透析法、有机沉淀法或者盐沉淀法获得细胞外基质提取物；(3)将步骤(2)获得的细胞外基质提取物进行过滤或者离心，滤液或者上清液与单糖或二糖混合，混合液先于-20℃中冷冻3～6h，然后于-40～-80℃中冷冻干燥12～72h，即得所述细胞外基质冻干粉。2.一种美白祛斑抗衰老护肤品，其特征在于，包含权利要求1所述的细胞外基质冻干粉和护肤品领域可接受的辅料。3.根据权利要求2所述的美白祛斑抗衰老护肤品，其特征在于，所述护肤品包括洗面奶、洁面乳、洁面膏、面膜、面霜、乳液、爽肤水和精华液。4.根据权利要求2或3所述的美白祛斑抗衰老护肤品，其特征在于，所述细胞外基质冻干粉在护肤品中的质量百分含量为0.1～10％。5.一种细胞外基质冻干粉在制备整形美容产品中的用途，其特征在于，所述细胞外基质冻干粉制备方法如权利要求1所述。6.一种整形美容产品，其特征在于，包含权利要求5所述的细胞外基质冻干粉和整形美容产品领域可接受的辅料。7.根据权利要求6所述的整形美容产品，其特征在于，所述整形美容产品包括除皱产品、眼部修复产品、疤...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨伟红，耿梦梦，姜玉峰，程飚，苏玉天，刘江辉，陈妮丹，陈大鹏，邓小敏，
申请(专利权)人：广州昕生医学材料有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44