一种新的蛋白提取试剂及方法技术

本发明专利技术提供了一种蛋白提取试剂，每10ml水溶液中包括以下组分：Tris 14.5~15.5mg、甘氨酸74~75mg、SDS 202‑208mg、溴酚兰10~12mg、Tris‑HCl 0.5~0.6ml、甘油0.8~1.2ml、β‑巯基乙醇0.4‑0.6ml。本发明专利技术不仅解决了微量细胞的检测问题，提高了Western blot的检测灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种新的蛋白提取试剂及方法
本专利技术属于生物
，涉及蛋白提取。
技术介绍
Westernblot(蛋白印迹)在科研行业中是检测蛋白最重要的实验方法，只要涉及到蛋白检测，首选一定是Westernblot。Westernblot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织蛋白样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。它是最常用的也是最重要的蛋白检测技术。但是在进行Westernblot之前，必须提取细胞或生物组织的总蛋白。Westernblot是以提取的总蛋白为检测对象的一门实验技术。一般来说，生物组织的总蛋白是比较好提取的，因为组织量够多，所以提取的总蛋白量够多、总蛋白浓度够高。但是培养细胞的总蛋白提取就不是这么容易。因为Westernblot对提取的总蛋白量和浓度都有要求。培养的细胞其本身蛋白量远少于组织中的蛋白量，即便加传统裂解液可以提出总蛋白，但是蛋白浓度常常不足以被Westernblot检测出来。这种时候想要提高蛋白浓度，可以减少裂解液的用量，但是减本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种蛋白提取试剂，每10ml水溶液中包括以下组分：Tris14.5~15.5mg、甘氨酸74~75mg、SDS 202‑208mg、溴酚兰10~12mg、Tris‑HCl 0.5~0.6ml、甘油0.8~1.2ml、β‑巯基乙醇0.4‑0.6ml。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白提取试剂，每10ml水溶液中包括以下组分：Tris14.5~15.5mg、甘氨酸74~75mg、SDS202-208mg、溴酚兰10~12mg、Tris-HCl0.5~0.6ml、甘油0.8~1.2ml、β-巯基乙醇0.4-0.6ml。2.如权利要求1所述的蛋白提取试剂，每10ml水溶液含有Tris15mg、甘氨酸75mg、SDS205mg、溴酚兰10mg、pH6.8的Tris-HCl0.5ml、甘油1ml、β-巯基乙醇0.5ml。3.如权利要求1或2所述的蛋白提取试剂，用量为每1x106细胞加入400μL~600μL所述试剂；或者24孔板每孔加200μL~300μL所述试剂。4.采用权利要求1、2或3所述蛋白提取试剂提取蛋白的方法，包括以...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴梦云，李娅莎，赵丽，杨珂，谭彬，徐小惠，田娜，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属儿童医院，
类型：发明
国别省市：重庆,50