一种耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，包括如下步骤：步骤一：分离出泛耐药鲍曼不动杆菌；步骤二：从怀孕成虫分离虫卵，孵化，将幼虫转移到E.coli菌苔上在培养箱中继续生长，洗脱虫体后，将虫体转移到泛耐药鲍曼不动杆菌的菌苔上，在培养箱中培养8h～24h进行感染；步骤三：将虫体洗下，将其置于含有5‑FU的培养板上，过夜培养，得到同步化的秀丽隐杆线虫，药物筛选模型建立完成。本发明专利技术选用线虫为实验对象，进行体内泛耐药的鲍曼不动杆菌的药敏实验，其结果与体外药敏试验结果相互比较，具有临床参考价值，可以弥补传统的体外药敏实验筛选中的遗漏。

Establishment and application of a drug screening model for Acinetobacter Caenorhabditis resistant to Acinetobacter Caenorhabditis infection in Bauman

The invention provides a method for establishing a drug screening model for drug-resistant Acinetobacter baumannii infecting Cryptorhabditis elegans, which includes the following steps: step 1: isolating pan-drug-resistant Acinetobacter baumannii; step 2: isolating eggs from pregnant adults, hatching, transferring larvae to E.coli moss, and continuing to grow in incubator, and eluting them. After the insect body was transferred to the moss of pan-resistant Acinetobacter baumannii and cultured in the incubator for 8 to 24 hours for infection. Step 3: Wash the insect body and place it on the culture board containing 5 FU, overnight culture, get synchronized Caenorhabditis elegans, drug screening model was established. The nematode is selected as the experimental object to carry out the drug sensitivity test of pan-drug-resistant Acinetobacter baumannii in vivo. The results are compared with the drug sensitivity test results in vitro. The method has clinical reference value and can make up for the omission in the traditional drug sensitivity test screening in vitro.

【技术实现步骤摘要】
一种耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法及其应用
本专利技术涉及一种耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，本专利技术还涉及使用耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法得到的药物筛选模型的应用。
技术介绍
感染性疾病一直是我国的主要公共卫生问题之一，由于长期大量应用广谱抗生素，使得许多病原菌对抗生素产生了惊人的抗药性。近年来院内感染呈上升趋势，有些院内感染呈难治性，且为多重耐药，严重威胁到患者的健康和生命安全。鲍曼不动杆菌已成为各大医院住院患者感染中最常见的革兰阴性杆菌之一，近年来鲍曼不动杆的检出率不断上升，给感染的治疗造成很大的困难。耐药鲍曼不动杆菌的耐药率有不断增高的趋势，且经常出现多药耐药和泛耐药现象。针对泛耐药的难治性感染，临床医师往往根据经验进行抗菌药物联合用药，或者加大剂量来达到控制耐药菌感染的目的。然而经验性治疗中，鲍曼不动杆菌感染患者的转归却不同，有些患者的病情能够得到缓解甚至治愈，而有些患者却出现死亡。因此，针对特定耐药的鲍曼不动杆菌感染的最佳治疗，是快速及时的筛选药物和形成抗感染治疗方案，这是确保患者具有更好预后的重本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：分离出泛耐药鲍曼不动杆菌；步骤二：秀丽隐杆线虫感染耐药鲍曼不动杆菌：从怀孕成虫分离虫卵，孵化过夜，得到L1期幼虫，将幼虫转移到NGM培养基的E.coli菌苔上在培养箱中继续生长48h，得到L4青年成虫，用缓冲液洗脱虫体并清洗后，将虫体分别转移到普通琼脂平板的泛耐药鲍曼不动杆菌的菌苔上，在培养箱中培养8h～24h进行感染；步骤三：线虫感染同步化：收集线虫生长良好的平板，用缓冲液将虫体洗下，离心，取上清，洗涤，将其置于含有5‑FU的培养板上，过夜培养，得到同步化的秀丽隐杆线虫，药物筛选模型建立完成。

【技术特征摘要】
1.一种耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：分离出泛耐药鲍曼不动杆菌；步骤二：秀丽隐杆线虫感染耐药鲍曼不动杆菌：从怀孕成虫分离虫卵，孵化过夜，得到L1期幼虫，将幼虫转移到NGM培养基的E.coli菌苔上在培养箱中继续生长48h，得到L4青年成虫，用缓冲液洗脱虫体并清洗后，将虫体分别转移到普通琼脂平板的泛耐药鲍曼不动杆菌的菌苔上，在培养箱中培养8h～24h进行感染；步骤三：线虫感染同步化：收集线虫生长良好的平板，用缓冲液将虫体洗下，离心，取上清，洗涤，将其置于含有5-FU的培养板上，过夜培养，得到同步化的秀丽隐杆线虫，药物筛选模型建立完成。2.如权利要求1所述的耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，其特征在于：步骤三中，离心条件为20S，取上清，重复3次。3.如权利要求1所述的耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，其特征在于：以质量百分比计，M9缓冲液包含：蛋白胨2％，牛肉浸膏4％。4.如权利要求1所述的耐药鲍曼不动杆菌感染秀丽隐杆线虫药物筛选模型的建立方法，其特征在于：步骤二中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐阿晶，蒋兴浩，张健，黄晓会，卜书红，陈其琪，费爱华，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属新华医院，
类型：发明
国别省市：上海,31