The invention discloses a preparation method of high-titer anti-agra antibody, which takes E. coli as the acceptor bacteria and ampicillin as the marker gene, transfers the agrA gene from Staphylococcus aureus into the E. coli carrier for prokaryotic expression, isolates and purifies the agrA protein, and then injects the purified protein into SD. Rat serum was collected in vivo to prepare mouse polyclonal antibody. The invention is simpler than the previous carrier, and can be directly connected with the carrier without the need for enzyme digestion connection, etc. Then, the expression quantity is large. The purified antibody has a high yield and can be used to detect a high titer of anti-agra antibody in the obtained serum.
【技术实现步骤摘要】
一种高效价的抗agra的抗体的制备方法
本专利技术涉及生物领域，具体涉及一种高效价的抗agra的抗体的制备方法。
技术介绍
金黄色葡萄球菌是一种革兰阳性球菌。广泛存在于自然界，是临床感染常见的病原菌，可引起局部化脓性感染，甚至引起败血症、脓毒血症等全身感染。致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。随着抗菌药物在临床的广泛应用，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌不断出现，对临床使用抗菌药物有很高的耐药率，广泛分布于于世界范围内，是目前临床上最常见的菌种之一，是一种临床上危及患者生命健康的重要菌种，主要引起化脓性的疾病、败血症等全身性感染疾病。同时也会引起细菌性的食物中毒等食品污染。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种高效价的抗agra的抗体的制备方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种高效价的抗agra的抗体的制备方法，以大肠杆菌作为受体菌，抗氨苄青霉素为标记基因；将金黄色葡萄球菌中的agrA基因转入大肠杆菌载体中进行原核表达，并分离纯化得到agrA蛋白；然后将分离纯化的蛋白注入SD大鼠体内收集血清，制备鼠源的多克隆抗体。包括如下步骤：步骤一、通...
【技术保护点】
1.一种高效价的抗agra的抗体的制备方法，其特征在于，以大肠杆菌作为受体菌，抗氨苄青霉素为标记基因；将金黄色葡萄球菌中的agrA基因转入大肠杆菌载体中进行原核表达，并分离纯化得到agrA蛋白；然后将分离纯化的蛋白注入SD大鼠体内收集血清，制备鼠源的多克隆抗体。
【技术特征摘要】
1.一种高效价的抗agra的抗体的制备方法，其特征在于，以大肠杆菌作为受体菌，抗氨苄青霉素为标记基因；将金黄色葡萄球菌中的agrA基因转入大肠杆菌载体中进行原核表达，并分离纯化得到agrA蛋白；然后将分离纯化的蛋白注入SD大鼠体内收集血清，制备鼠源的多克隆抗体。2.如权利要求1所述的一种高效价的抗agra的抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、通过全式金的pEASY载体得到含有有重组质粒pEASY/agrA菌种；步骤二、大量诱导表达并纯化表达蛋白将冻存的含有重组质粒pEASY/agrA菌种接种于200mlLB/Amp+培养基中大量表达，230rpm、37℃培养4小时，菌液加入200μl的IPTG诱导表达，230rpm、37℃再...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵鹏伟，白瑞霞，张福全，崔珈衔，孙鹏，陆景坤，牛燕，赵方新，张烜，红梅，
申请(专利权)人：内蒙古医科大学，
类型：发明
国别省市：内蒙古,15
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