用于结合VEGF的方法和组合物技术

本发明专利技术提供了一种融合多肽组合物。该融合多肽包含两个或更多个与二聚化多肽融合的VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。进一步提供了使用这样的组合物治疗疾病和病症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于结合VEGF的方法和组合物交叉引用本申请要求于2015年11月19日提交的美国临时申请号62/257,673的权益，其公开内容通过引用整体并入本文。专利技术背景血管生长内皮因子(VEGF)是刺激血管生成和血管发生的多肽配体。VEGF的过表达可在诸如癌症和视网膜病等疾病中起作用。VEGF信号传导由几种VEGF受体介导，所述VEGF受体含有能够结合VEGF的胞外域和负责启动信号传导级联的酪氨酸激酶结构域。VEGF抑制剂可以通过阻止VEGF受体信号传导来停止或减缓由新生血管化介导的疾病的进展。VEGF受体信号传导的改善抑制可以例如通过进一步减缓由湿性黄斑变性引起的视力逐渐丧失而导致更好的患者结果。
技术实现思路
对抑制VEGF信号传导的替代疗法有相当大的需求。本专利技术满足了该需求并提供了额外的优点。在一个方面，本专利技术提供了一种融合多肽，其包含两个或更多个与二聚化多肽融合的VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域中的至少一个与所述二聚化多肽的N末端融合，并且所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型中的至少另一个与所述二聚化多肽的C末端融合。在本文提供的一些实施方案中，所述二聚化多肽为可结晶片段(Fc)结构域。在本文提供的一些实施方案中，所述二聚化多肽包含能够与第二半胱氨酸残基形成二硫键的第一半胱氨酸残基。在本文提供的一些实施方案中，所述融合多肽进一步包含在所述二聚化多肽与所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域之间的至少一个铰链区。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自与选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域至少80％相同。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自与选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域至少90％相同。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自与选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域至少95％相同。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为SEQIDNO:4。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为SEQIDNO:5。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为SEQIDNO:6。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域不相同。在本文提供的一些实施方案中，所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域为至少两个不同的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。在本文提供的一些实施方案中，所述至少两个不同的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域选自SEQIDNO:4-6。在本文提供的一些实施方案中，所述融合多肽基本缺乏选自SEQIDNO:1-3的VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域。在本文提供的一些实施方案中，所述融合多肽包含选自SEQIDNO:1-3的VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域的不超过60个氨基酸。在本文提供的一些实施方案中，所述VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域与选自SEQIDNO:1-3的人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域至少80％相同。在本文提供的一些实施方案中，所述VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域与选自SEQIDNO:1-3的人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域至少90％相同。在本文提供的一些实施方案中，所述VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域与选自SEQIDNO:1-3的人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域至少95％相同。在本文提供的一些实施方案中，所述人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域为SEQIDNO:1。在本文提供的一些实施方案中，所述人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域为SEQIDNO:2。在本文提供的一些实施方案中，所述人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域为SEQIDNO:3。在本文提供的一些实施方案中，所述融合多肽不包含SEQIDNO:8。在本文提供的一些实施方案中，所述融合多肽的同二聚体表现出对VEGF的高亲和力结合。在本文提供的一些实施方案中，所述同二聚体以比SEQIDNO:9中所示的多肽更高的亲和力与VEGF结合。在本文提供的一些实施方案中，所述同二聚体以比人VEGF受体更高的亲和力与VEGF结合。在一个方面，本专利技术提供了一种融合多肽，其包含两个或更多个与二聚化多肽融合的血管内皮生长因子(VEGF)受体免疫球蛋白样2型结构域，其中当通过以下步骤测量时，所述融合多肽的第一同二聚体以比阿柏西普(SEQIDNO:9)的第二同二聚体更高的亲和力结合VEGF：将所述第一同二聚体和所述第二同二聚体单独与固定的VEGF温育以产生结合的复合物；洗涤所述结合的复合物以去除非特异性结合；以及在步骤(b)之后进行酶联免疫吸附测定(ELISA)以评估所述结合的复合物的量。在一个方面，本专利技术提供了一种分离的多核苷酸分子，其编码任何前述实施方案所述的融合多肽。在一个方面，本专利技术提供了一种分离的多核苷酸分子，其编码融合多肽，该融合多肽形成能够结合血管上皮生长因子(VEGF)的同二聚体，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO:7。在一个方面，本专利技术提供了一种载体，其包含任何前述方面和实施方案所述的分离多核苷酸分子的序列。在一个方面，本专利技术提供了一种包含任何前述载体或多核苷酸的细胞。在本文提供的一些实施方案中，所述细胞为哺乳动物细胞。在本文提供的一些实施方案中，所述细胞为细菌细胞。在本文提供的一些实施方案中，所述细胞为真菌细胞。在本文提供的一些实施方案中，所述细胞为昆虫细胞。在一个方面，本专利技术提供了一种用于抑制有需要的受试者中的血管发生的方法，其包括：向所述有需要的受试者施用治疗有效量的任何前述融合多肽的同二聚体。在本文提供的一些实施方案中，所述施用通过向所述受试者进行局部施用或全身施用而实现。在本文提供的一些实施方案中，所述施用针对所述受试者的眼。在本文提供的一些实施方案中，所述施用针对所述受试者的肿瘤组织。在本文提供的一些实施方案中，所述施用为静脉内注射。在本文提供的一些实施方案中，所述施用为腹膜内注射。在本文提供的一些实施方案中，所述施用为玻璃体内注射。在本文提供的一些实施方案中，在任何前述方法中，所述血管发生为选自下组的病况的表现：年龄相关性黄斑变性、糖尿病视网膜病变、脉络膜新生血管化、囊样黄斑水肿、糖尿病黄斑水肿、视网膜血管闭塞、角膜新生血管化、角膜移植、新生血管性青光眼、翼状胬肉慢性结膜炎、血管发生相关的治疗失败，如激光凝固失败和手术视网膜移植失败。在本文提供的一些实施方案中，所述病况为AMD。在本文提供的一些实施方案中，所述病况为糖尿病视网膜病变。在本文提供的一些实施方案中，所述施用导致所述病况的一种或多种改善的症状，其中所述症状选自平均脉络膜新生血管化(CNV)渗漏减少、平均视敏度改本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种融合多肽，其包含两个或更多个与二聚化多肽融合的VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.19 US 62/257,6731.一种融合多肽，其包含两个或更多个与二聚化多肽融合的VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。2.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域中的至少一个与所述二聚化多肽的N末端融合，并且所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域中的至少另一个与所述二聚化多肽的C末端融合。3.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述二聚化多肽为可结晶片段(Fc)结构域。4.如权利要求1-3中任一项所述的融合多肽，其中所述二聚化结构域包含能够与第二半胱氨酸残基形成二硫键的第一半胱氨酸残基。5.如权利要求1所述的融合多肽，其进一步包含在所述二聚化多肽与所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域之间的至少一个铰链区。6.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自与选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域至少80％相同。7.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自与选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域至少90％相同。8.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自与选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域至少95％相同。9.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为选自SEQIDNO:4-6的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。10.如权利要求6-9中任一项所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为SEQIDNO:4。11.如权利要求6-9中任一项所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为SEQIDNO:5。12.如权利要求6-9中任一项所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域各自为SEQIDNO:6。13.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域不相同。14.如权利要求13所述的融合多肽，其中所述两个或更多个VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域为至少两个不同的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域。15.如权利要求14所述的融合多肽，其中所述至少两个不同的人VEGF受体免疫球蛋白样2型结构域选自SEQIDNO:4-6。16.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述融合多肽基本缺乏选自SEQIDNO:1-3的VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域。17.如权利要求1所述的融合多肽，其中所述融合多肽包含选自SEQIDNO:1-3的VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域的不超过60个氨基酸。18.如权利要求16-17中任一项所述的融合多肽，其中所述VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域与选自SEQIDNO:1-3的人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域至少80％相同。19.如权利要求18所述的融合多肽，其中所述VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域与选自SEQIDNO:1-3的人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域至少90％相同。20.如权利要求18所述的融合多肽，其中所述VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域与选自SEQIDNO:1-3的人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域至少95％相同。21.如权利要求18所述的融合多肽，其中所述人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域为SEQIDNO:1。22.如权利要求18所述的融合多肽，其中所述人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域为SEQIDNO:2。23.如权利要求18所述的融合多肽，其中所述人VEGF受体免疫球蛋白样3型结构域为...

【专利技术属性】
技术研发人员：李荣皓，约翰·军·武，
申请(专利权)人：珠海泰瑞尚生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44