抗人球蛋白检测试剂卡及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种氧化锆(ZrO2)微珠抗人球蛋白检测试剂卡及其制备方法，所述检测试剂卡包括：微柱管，管内装有含有抗IgG+C3d抗体的氧化锆微珠。本发明专利技术制备的广谱抗人球蛋白检测试剂卡灵敏度高、特异性好且质量稳定。

【技术实现步骤摘要】
抗人球蛋白检测试剂卡及其制备方法
本专利技术涉及医疗检测领域，更具体的，涉及一种广谱抗人球蛋白检测试剂卡的组成、制备方法及其应用。
技术介绍
1984年法国YvesLapierre首先专利技术凝胶抗球蛋白方法，与传统试管法抗球蛋白试验比较，省略了试管液体介质的繁琐洗涤步骤，也省去了必须在阴性结果试管中加入不完全抗体致敏的红细胞，以确认阴性结果是否正确的步骤，因此具有标本用量少、操作简便、省时、人为因素小、易于标准化及自动化、结果易判读并可长期保存等优点，适于大批量标本的检测。在国外凝胶抗球蛋白检测试剂卡已成为常规广泛应用于血型鉴定、不规则抗体检测及交叉配血等各种血型血清学试验。近年来，国内己开始采用凝胶抗球蛋白检测试剂卡进行不规则抗体的筛选和鉴定、致敏红细胞的检测等。但是多采用葡聚糖凝胶。但是葡聚糖凝胶会受温度、盐浓度、渗透压、pH的变化而致颗粒的孔径会改变，床外的空间也会改变，导致离心层析结果受影响。由于是一种凝胶状的颗粒，物理强度较差，随着保存期的延长，会导致变形，非特异吸附高，会影响试验结果。另外，价格也比较昂贵。因此，本领域迫切需要研发灵敏度高、特异性好且质量稳定的新的抗球蛋白检测试剂卡。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服传统试管法的不足，提供一种灵敏度高、特异性好且质量稳定的广谱抗人球蛋白检测试剂卡的制备方法。本专利技术提供一种抗人球蛋白检测试剂卡，所述检测试剂卡包括：微柱管，管内装有含有抗IgG+C3d抗体的氧化锆微珠。上述微柱管为4-12管。上述微柱管为8管。上述氧化锆微珠颗粒直径为63-125微米。上述氧化锆微珠与抗体的体积比为2:1。上述微柱管开口处有铝箔封片。上述试剂卡上贴有标签纸。本专利技术第二方面，提供上述氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡的制备方法，所述方法包括步骤：(a)筛选出颗粒直径为63-125微米的氧化锆微珠，用微珠悬浮介洗涤3-5次，除去微珠破损碎片以及聚集的微珠颗粒，收集得到颗粒大小均匀的、且完整呈球形的微珠；所述微珠悬浮介质的组份为：(b)将步骤(a)制备的微珠与抗体分别按照体积比2：1的比例混合，配制成含有抗IgG+C3d抗体的微珠；(c)按照每管22-28微升的量，将步骤(b)配制的微珠分别分装到检测卡的微柱管中。上述方法还包括以下步骤：(d)用铝箔纸通过压膜方式将微柱管上口密封。本专利技术所述微珠悬浮介质中“水”为蒸馏水、纯化水或去离子水，优选蒸馏水。本专利技术的有益效果是：本专利技术的第一个方面，提出了一种标准化的氧化锆微珠悬浮介质体系，用于氧化锆微珠的洗涤和悬浮，并可以长时间维持抗体以及氧化锆微珠的稳定，其特点在于：1、设计了具有很强缓冲能力的缓冲体系，采用磷酸钾盐、钠盐以及氨基酸组成的缓冲体系，使体系的pH值维持在6.6-6.8。与输血领域通常采用的单一的枸橼酸缓冲体系相比，具有缓冲能力更强的特点，有利于保持整个体系处于要求的缓冲范围，同时保证了整个氧化锆微珠悬浮介质的离子强度。2、具有更加有效的低盐浓度体系，从其组成可以看出，本专利技术的氧化锆微珠悬浮介质采用氨基酸和氯化钠作为添加剂，辅助以微量的磷酸盐来维持低离子强度环境，保持氧化锆微珠颗粒呈圆球颗粒，并维持氧化锆微珠颗粒的直径大小在所要求的范围内(63-125微米)。3、本专利技术具有独特的润滑体系，采用一定浓度的牛血清白蛋白，使得红细胞通过氧化锆微珠间隙时获得合适的涧滑能力，使无凝集的红细胞具有完全通过氧化锆微珠颗粒间隙的能力，而凝集的红细胞则不能通过。4、本专利技术具有优越的防腐体系，选择苯甲酸钠作为防腐剂。采用聚乙烯吡咯烷酮协同作用，因而其在穿透细胞膜的能力不同，并且其抑菌的作用位点也就不同，所以各种单酯针对不同种类微生物的抑制能力就不同。几种酯的复合，具有更好的防腐能力，有效防止细菌的繁衍，获得较长时间的保存期，同时不仅避免使用叠氮钠化学防腐剂对氧化锆微珠悬浮介质体系的离子强度提升从而对氧化锆微珠稀有血型检测试剂卡的灵敏度和特异性产生的不良影响，也避免使用抗生素类在保存过程中所代谢产生的中间体对氧化锆微珠稀有血型检测试剂卡的特异性产生的不良影响。另一方面，为了保证本专利技术氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡的质量，在制备过程中还需要对氧化锆微珠进行筛选，即，首先要选择适当的氧化锆微珠，一般应该满足的条件是：选择颗粒直径为63-125微米，对筛选获得的氧化锆微珠原料需要进行洗涤、悬浮，目的是让氧化锆微珠颗粒洗涤去除破损的氧化锆微珠颗粒、聚集的氧化锆微珠颗粒、内径在63-125微米以外的超大或超小氧化锆微珠颗粒以及氧化锆微珠以外的其它杂质成分。洗涤完成后用氧化锆微珠悬浮介质来悬浮氧化锆微珠。再一方面，为了保证本专利技术氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡的质量，在制备过程中还对与氧化锆微珠混合的抗体原料进行筛选。综上所述，本专利技术的氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡之所以可以具有优良的特异性、灵敏度以及长达1年的保存期，是在于整个体系各种成分的协同作用。含有8个抗IgG+C3d的氧化锆微珠微柱管排列于一张卡上可以保证仅使用一张氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡就能完成最多8个样本的抗人球蛋白检测。缓冲体系可以维持检测试剂卡反应体系需要的pH。低盐浓度体系可以保证氧化锆微珠颗粒直径在所需要的范围内。润滑体系可以保证氧化锆微珠颗粒之间适当的润滑能力。苯甲酸钠防腐剂可以防止氧化锆微珠或抗体因为细菌繁殖而失效。标准化的氧化锆微珠可以保证氧化锆微珠颗粒之间的合适的间隙。标准化的抗体可以保障抗原的有效检出。用此氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡检测稀有血型，产生的阳性反应均不低于1+。一般在18-25℃条件下保存有效期不低于12个月。总之，本专利技术的实施提供了标准化的氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡产品，各医院和采供血机构可以直接从生产供应商处得到标准一致的氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡，为准确鉴定稀有血型分型、保证安全输血、尽早诊断和治疗新生儿溶血病创造了条件。附图说明图1为氧化锆微珠显微镜图；图2为本专利技术抗人球蛋白检测试剂卡的结构示意图。1-8.氧化锆微珠微柱管；9.检测试剂卡；11.氧化锆微珠；12.抗IgG+C3d抗体；13.微柱管；14.空白卡片。具体实施方式以下通过具体实施例详细说明本专利技术的实旋和所具有的有益效果，旨在帮助阅读的理解本专利技术的精神和实质，并不能对本专利技术的实施范围构成任何限定。实施例1本专利技术氧化锆微珠抗人球蛋白检测试剂卡的制备和保存步骤一、氧化锆微珠悬浮介质的配制以上试剂用蒸馏水溶解，调pH值为6.6-6.8。步骤二、氧化锆微珠的制备选用氧化锆微珠，颗粒直径为63-125微米，用步骤一配制的氧化锆微珠悬浮介质洗涤3-5次，除去氧化锆破损碎片以及聚集氧化锆颗粒，收集得到颗粒大小均匀的、且完整呈球形的氧化锆微珠。步骤三、抗体的选择选择广谱抗人球蛋白试剂(抗IgG+C3d)。其中抗IgG成分灵敏度：要求按照体积比1：2和体积比1：4稀释的IgG抗人球蛋白血清必须对照体积比1：128稀释的抗D(IgG)致敏的红细胞有肉眼可见凝集；其中抗C3d成分的灵敏度：要求按照体积比1：4和体积比1：8稀释的抗人球蛋白试剂(抗IgG+C3d)必须对C3d致敏的红细胞有肉眼可见凝集。与所述广谱抗人球蛋白试剂原液的反应强度≥1+；广谱抗人球蛋白试剂(抗IgG+C3d)与I本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述检测试剂卡包括：微柱管，管内装有含有抗IgG+C3d抗体的氧化锆微珠。

【技术特征摘要】
1.一种抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述检测试剂卡包括：微柱管，管内装有含有抗IgG+C3d抗体的氧化锆微珠。2.如权利要求1所述抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述微柱管为4-12管。3.如权利要求1所述抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述微柱管为8管。4.如权利要求1、2或3所述抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述氧化锆微珠颗粒直径为63-125微米。5.如权利要求1、2或3所述抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述氧化锆微珠与抗体的体积比为2:1。6.如权利要求4所述抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述氧化锆微珠与抗体的体积比为2:1。7.如权利要求5所述抗人球蛋白检测试剂卡，其特征在于，所述微柱管开口处设铝箔封片。8.如权利要求7...

【专利技术属性】
技术研发人员：周辰杰，阙秋华，贺诗香，高晓玲，
申请(专利权)人：广东睿碁生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44