一种血液活检采样管制造技术

本实用新型专利技术公开了一种血液活检采样管，包括上端开口的管体，在其开口处密封有丁基胶塞，管体内部为采血腔；在所述的采血腔下部设置有功能分离区，该功能分离区从下到上依次为分离液层、分离胶隔层和混合功能液层；所述的分离液层为分离胶隔层与采血腔的底部之间的密闭空间，该密闭空间中填充有单个核细胞分离液；所述的混合功能液层位于所述分离胶隔层的上面，由混合功能液构成。本实用新型专利技术能实现单个核细胞的一步分离、保存离体细胞的生物活性时间长、保存核酸物质的稳定性好等优点。

A blood sampling tube

The utility model discloses a blood biopsy sampling tube, which comprises a tube body with an opening at the upper end, sealed with a butyl rubber plug at the opening, and a blood collecting cavity in the inner part of the tube; a functional separation zone is arranged at the lower part of the blood collecting cavity, and the functional separation zone is in turn a separation liquid layer, a separation glue separating layer and a mixed functional liquid layer from the bottom to the upper part. The separating liquid layer is an airtight space between the separating glue separating layer and the bottom of the blood collecting chamber, in which a mononuclear cell separating liquid is filled; the mixed functional liquid layer is located above the separating glue separating layer and is composed of a mixed functional liquid. The utility model has the advantages of one-step separation of mononuclear cells, long biological activity time of preserving isolated cells, good stability of preserving nucleic acid substances, etc.

【技术实现步骤摘要】
一种血液活检采样管
本技术属于医用检测辅助器材
，具体涉及一种血液活检采样管。
技术介绍
血液活检是近年发展起来的新兴技术，主要检测对象包括单个核细胞、循环肿瘤细胞（CTC）、循环肿瘤DNA（ctDNA）、循环microRNA、外泌体等。单个核细胞包括单核细胞和淋巴细胞，在临床检验、基础研究和细胞治疗领域中有着广泛的需求；CTC为进入人体外周血的肿瘤细胞，其类型及数量随肿瘤的进展而变化；ctDNA是循环血液中不断流动的携带一定特征（包括突变、缺失、插入、重排、拷贝数异常、甲基化等）来自肿瘤基因组的DNA片段；循环microRNA是外周血中一类长度约22nt的非编码RNA，在多种生理、病理及肿瘤发展过程中发挥作用；外泌体是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质，包括肿瘤细胞在内的几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体进入循环血液。现代医学研究已经证明运用新型检测技术，对循环外周血中上述成分的检测能用于肿瘤早期诊断、发展过程动态检测、评估治疗效果、及个性化用药指导。目前，公知的单个核细胞的分离步骤是：首先采集外周血,然后经过相应的溶液稀释,再用单个核细胞分层液进行梯度离心,最后才能获得单个核细胞。但是整个分离过程步骤繁多,效率低下，得到的单个核细胞纯度不高、回收率较低；其次，由于开放性操作，导致分离的单个核细胞易受到污染，影响后续检测质量。而对于CTC，由于传统分离过程中，离体后的细胞不能得到有效的营养供给，因此细胞的原始性质不能得到较长时间的保存；另外，由于天然核酶的存在，导致离体后血液中的DNA、microRNA、ctDNA等核酸物质持续受到分解，不利于后续液体活检的进行。结合市场现有产品，并查阅文献及相关专利后，现有设计注重循环血液中细胞或核酸的分离提取，对它们在离体后的性状保存方面没有涉及。而随着临床研究的发展，目前无论是科学研究还是临床应用，对细胞的活性或核酸的原始性状都有更高的要求。因此，为了进一步适应临床应用和科学研究的需要，有开发一种既能简便、高纯度、无污染地对血液成分进行初步分离，又能保存目标成分的原始性状的采样容器。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述不足，本技术提供一种能实现单个核细胞的一步分离、保存离体细胞的生物活性时间长、核酸物质稳定性好的血液活检采样管。为了实现上述目的，本技术采用的技术方案如下：一种血液活检采样管，包括上端开口的管体，在其开口处密封有丁基胶塞，管体内部为采血腔；在所述的采血腔下部设置有功能分离区，该功能分离区从下到上依次为分离液层、分离胶隔层和混合功能液层；所述的分离液层为分离胶隔层与采血腔的底部之间的密闭空间，该密闭空间中填充有单个核细胞分离液；所述的混合功能液层位于所述分离胶隔层的上面，由混合功能液构成。进一步，在管体的上端的外壁上设置有塑料保护帽，用于保护管体。进一步，所述的功能分离区与所述丁基胶塞之间的空间为真空层，用于形成负压以使采血。进一步，所述的分离胶隔层为密度1.077~1.091g/cm3的羟基硅油、有机聚硅氧烷、聚醋或聚烯烃。进一步，所述的单个核细胞分离液为葡聚糖、聚蔗糖、泛影葡胺、聚乙二醇、氯化铯、淀粉、纤维素或蛋白质溶液。进一步，所述的管体的材质为玻璃或PET。进一步，所述的功能分离区的长度小于管体长度的1/2。进一步，所述的管体由位于上部的真空管和位于下部的功能分离管构成，所述的真空管为两端开口的圆管形，所述的功能分离管为上端开口的试管形；所述的功能分离区设置在功能分离管内；所述的真空管和功能分离管通过螺纹连接。更进一步，在所述的功能分离管的功能分离区的上方设置有隔离膜，用于保护功能分离区。再进一步，在与隔离膜的位置对应的所述功能分离管的侧壁上开有直径0.05~0.1mm的抽膜孔，用于抽出所述的隔离膜；该抽膜孔位于功能分离管内部的一侧设置有用于封闭抽膜孔的单向阀，该单向阀包括铰轴、簧片和与抽膜孔相适应的阀体；所述的阀体通过铰轴铰接在抽膜孔的下缘，所述的簧片设置在铰轴下，用于压迫阀体向抽膜孔的方向转动。与现有的技术相比，本技术具有如下有益效果：1、本技术通过设置功能分离区，实现了单个核细胞的一步分离，效率高，效果好。2、常规采血后，如需要分离或检测CTC，只需要使混合功能液与血液充分混合，能长时间有效地保持目的成分的原始性质。3、当需要分离或检测单个核细胞时，直接低速离心，由于红细胞、分离胶、血浆混合物和单个核细胞的比重不同，它们在管内的分布位置也不同，自下而上分别为红细胞层、分离胶层、单个核细胞层和血浆混合物层。单个核细胞层为白色云雾状，将血浆混合层缓缓吸出后，再吸出单个核细胞层即可。当要使用ctDNA、microRNA、外泌体等物质时，为保证核酸的完整性，在4℃条件下低速离心即可。实现了一管多用。4、本技术设计了隔离膜与单向阀，可以有效的保护功能分离区，提高在本技术在存放和运输途中的安全性。附图说明图1为本技术的结构示意图；图2为离心处理后的血样各成分的分层示意图；图3为隔离膜及单向阀的结构示意图。附图中：1—丁基胶塞；2—塑料保护帽；3—真空层；4—混合功能液层；5—分离胶隔层；6—分离液层；7—红细胞层；8—单个核细胞层；9—血浆混合物层，包括ctDNA、microRNA、外泌体等物质；101—阀体；102—簧片；103—铰轴；104—抽膜孔。具体实施方式下面结合具体实施例对本技术作进一步详细说明。一种血液活检采样管，如图1所示，包括上端开口的管体，在其开口处密封有丁基胶塞1，管体内部为采血腔；在所述的采血腔下部设置有功能分离区，该功能分离区从下到上依次为分离液层6、分离胶隔层5和混合功能液层4；所述的分离液层6为分离胶隔层5与采血腔的底部之间的密闭空间，该密闭空间中填充有单个核细胞分离液；所述的混合功能液层4位于所述分离胶隔层5的上面，由混合功能液构成。所述混合功能液为抗凝剂、核酶抑制剂和细胞保养液的混合液，其中抗凝剂为EDTA盐、肝素盐、柠檬酸盐、草酸盐或其它抗凝物质；核酶抑制剂包括RNA酶抑制剂和DNA酶抑制剂，能与RNA酶和DNA酶结合使其失活；细胞保养液为细胞提供体外存活的必要营养物质，能维持稳定渗透压以及pH值，成分包括但不限于以下物质：白蛋白、葡萄糖、维生素C、电解质、氨基酸、CAD保存液、PAD保存液等。常规进行真空采血，当得到所需要的血量后停止采血，轻轻颠倒混匀5次，使混合功能液与血液充分混合，在进行成分分离或检测前能长时间有效地保持目的成分的原始性质。当需要分离或检测CTC时，则不需离心直接使用。当需要分离或检测单个核细胞时，直接低速离心，由于红细胞、分离胶、血浆混合物和单个核细胞的比重不同，它们在管内的分布位置也不同，自下而上分别为红细胞层7、分离胶层、单个核细胞层8和血浆混合物层9。单个核细胞层8为白色云雾状，将血浆混合层缓缓吸出后，再吸出单个核细胞层8即可。当要使用ctDNA、microRNA、外泌体等物质时，为保证核酸的完整性，在4℃条件下低速离心，离心后试管内部成分分层情况如上所述，ctDNA、microRNA、外泌体等物质分布在血浆混合物层9中，缓缓吸出血浆混合物层9即可。离心后的分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血液活检采样管，包括上端开口的管体，在其开口处密封有丁基胶塞，管体内部为采血腔；其特征在于，在所述的采血腔下部设置有功能分离区，该功能分离区从下到上依次为分离液层、分离胶隔层和混合功能液层；所述的分离液层为分离胶隔层与采血腔的底部之间的密闭空间，该密闭空间中填充有单个核细胞分离液；所述的混合功能液层位于所述分离胶隔层的上面，由混合功能液构成。

【技术特征摘要】
1.一种血液活检采样管，包括上端开口的管体，在其开口处密封有丁基胶塞，管体内部为采血腔；其特征在于，在所述的采血腔下部设置有功能分离区，该功能分离区从下到上依次为分离液层、分离胶隔层和混合功能液层；所述的分离液层为分离胶隔层与采血腔的底部之间的密闭空间，该密闭空间中填充有单个核细胞分离液；所述的混合功能液层位于所述分离胶隔层的上面，由混合功能液构成。2.根据权利要求1所述的血液活检采样管，其特征在于，在管体的上端的外壁上设置有塑料保护帽，用于保护管体。3.根据权利要求1所述的血液活检采样管，其特征在于，所述的功能分离区与所述丁基胶塞之间的空间为真空层，用于形成负压以使采血。4.根据权利要求1所述的血液活检采样管，其特征在于，所述的分离胶隔层为密度1.077~1.091g/cm3的羟基硅油、有机聚硅氧烷、聚醋或聚烯烃。5.根据权利要求1所述的血液活检采样管，其特征在于，所述的单个核细胞分离液为葡聚糖、聚蔗糖、泛影葡胺、聚乙二醇、氯化铯、淀粉、纤维素或蛋白质溶液。6.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘静，王小中，邬艳，
申请(专利权)人：南昌大学第二附属医院，
类型：新型
国别省市：江西,36