一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法技术

本发明专利技术涉及一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法，属于中药化学领域，工艺步骤包括如下：弯管列当原料粉碎，加95％乙醇超声提取，提取液浓缩得到浸膏，再通过乙酸乙酯‑水双相分散萃取，取乙酸乙酯有机相浓缩，经中压硅胶柱层析进行分离纯化，得到高纯度crenatoside。本发明专利技术方法具有工艺简单、高效快速、纯度高、制备量大等优点。

A method for extracting crenatoside from elbow columns

The invention relates to a method for extracting and preparing crenatoside from a curved tube column, which belongs to the field of traditional Chinese medicine chemistry. The process steps are as follows: the curved tube column is crushed with raw materials, ultrasonic extraction with 95% ethanol is added, the extract is concentrated to obtain an extract, and then the extract is extracted by two-phase dispersion extraction with ethyl acetate and water, and the ethyl acetate is concentrated in organic phase. Silica gel column chromatography was used to separate and purify high purity crenatoside. The method has the advantages of simple process, high efficiency, high purity, and large preparation capacity.

【技术实现步骤摘要】
一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法
：本专利技术属于中药化学领域，涉及crenatoside的提取制备工艺，主要是一种应用中压柱层析法从弯管列当粗提物中制备高纯度crenatoside的方法。
技术介绍
：Crenatoside，别名：Oraposide；Orobanchoside，化学名：β-D-glucopyranose,3-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-1,2-O-[(2S)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-1,2-ethanediyl]-,4-[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-propenoate]，分子式：C29H34O15，分子量：622.57，成分分类：苯乙醇苷类，结构式如下：物理性质：淡黄色晶体(甲醇)，UV365下显蓝色荧光，1％三氯化铁乙醇溶液反应呈蓝黑色，具有良好的水溶性和吸湿性，易溶于甲醇，可溶于丙酮。药理性质：具有显著抗氧化活性，仅次于维生素C，同时药理实验表明其还具有降血脂、降血糖、抗炎、杀菌等作用。目前没有制备高纯度crenatoside的系统方法的报道。因此有必要寻求一种简便、安全、经济、高效的提取、分离和纯化crenatoside的方法，从而促进对弯管列当的深度开发和利用。
技术实现思路
：本专利技术目的在于开发一种工艺简单，高效、快速，提纯制备高纯度crenatoside的方法。本专利技术的技术方案是这样实现的：一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法，包括以下步骤：1)超声提取：将弯管列当药材粉碎，用乙醇作为提取溶媒进行超声提取，旋转蒸发浓缩得到浸膏；2)萃取：将上述浸膏通过乙酸乙酯-水双相分散萃取，取乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯，剩余萃取浓缩物；3)中压硅胶层析：将上述所得萃取浓缩物经中压硅胶柱层析进行分离纯化，根据TLC检识合并目标流份，得到crenatoside洗脱液；4)重结晶：将上述组分减压浓缩后用溶剂溶解，敞口静置析出crenatoside结晶，过滤；重复本步骤2-4次，阴干，即得crenatoside。优选地，所述步骤1)中粉碎为80-100目；超声时间每次为40-60min，超声提取3-5次后合并提取液。优选地，所述步骤1)中乙醇用量为弯管列当粉体积的8-10倍，乙醇浓度为95％。优选地，所述步骤2)中乙酸乙酯和水的体积比为1:1；乙酸乙酯与步骤1)中弯管列当粉体积比为2:1。优选地，所述步骤3)中中压硅胶柱层析色谱溶剂系统为二氯甲烷:甲醇:水体积比为(18-12):1:0.1；恒梯度洗脱，按每份50mL收集，TLC检识(聚酰胺板，青岛海洋化工厂产品；展开剂，二氯甲烷：甲醇：水(10:3:0.1)；显色剂，1％三氯化铁乙醇溶液)，取比移值(Rf)＝0.4的单点流份合并，得到crenatoside洗脱液。优选地，所述步骤3)分离纯化的洗脱流速为10-20mL/min，柱压为2.5MPa。优选地，所述步骤4)结晶步骤溶剂为甲醇。优选地，所述步骤4)结晶步骤溶剂甲醇用量为步骤1)每1000mL弯管列当药材粉末(相当于药材粉末质量260g)用甲醇5-20mL，溶解温度为40-50℃。有益效果：本专利技术提供了一种工艺简单，高效、快速，提纯制备高纯度crenatoside的方法，较传统方法，本方法提取得到的crenatoside纯度更高，且本方法更加高效快速，且制备量大。具体实施方式：下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例1：将弯管列当药材粉碎为80目，取粉末1000mL(相当于药材粉末质量260g)，加入8倍体积量的95％乙醇超声提取5次，每次40min，过滤，合并提取液，减压浓缩得到红褐色浸膏，用乙酸乙酯和水各2000mL(体积比1:1)双相萃取，取上层乙酸乙酯有机相，减压浓缩成浸膏，得到萃取浓缩物。将上述所得萃取浓缩物经六通阀泵入预处理过的中压硅胶柱(压力为2.5MPa)中，用二氯甲烷:甲醇：水(体积比18:1:0.1)恒梯度洗脱，洗脱流速为20mL/min，按每份50mL收集，TLC检识(聚酰胺板，青岛海洋化工厂产品；展开剂，二氯甲烷：甲醇：水(10:3:0.1)；显色剂，1％三氯化铁乙醇溶液)，取比移值(Rf)＝0.4的单点流份合并，将上述合并流份减压浓缩之后用15mL甲醇在40℃热熔，敞口静置，析出crenatoside结晶，过滤出crenatoside结晶，重复结晶2次，阴干，即得纯度为98.25％的crenatoside。实施例2：将弯管列当药材粉碎为100目，取粉末1000mL(相当于药材粉末质量260g)，加入9倍体积量的95％乙醇超声提取4次，每次50min，过滤，合并提取液，减压浓缩得到红褐色浸膏，将上述所得萃取浓缩物经六通阀泵入预处理过的中压硅胶柱(压力为2.5MPa)中，用二氯甲烷:甲醇：水(体积比18:1:0.1)恒梯度洗脱，洗脱流速为20mL/min，按每份50mL收集，TLC检识(聚酰胺板，青岛海洋化工厂产品；展开剂，二氯甲烷：甲醇：水(10:3:0.1)；显色剂，1％三氯化铁乙醇溶液)，取比移值(Rf)＝0.4的单点流份合并，将上述合并流份减压浓缩之后用10mL的甲醇在45℃热熔，敞口静置，析出crenatoside结晶，过滤出crenatoside结晶，重复结晶2次，阴干，即得纯度为98.31％的crenatoside。实施例3：将弯管列当药材粉碎为90目，取粉末1000mL(相当于药材粉末质量260g)，加入10倍体积量的95％乙醇超声提取3次，每次60min，过滤，合并提取液，减压浓缩得到红褐色浸膏，将上述所得萃取浓缩物经六通阀泵入预处理过的中压硅胶柱(压力为2.5MPa)中，用二氯甲烷:甲醇：水(体积比18:1:0.1)恒梯度洗脱，洗脱流速为20mL/min，按每份50mL收集，TLC检识(聚酰胺板，青岛海洋化工厂产品；展开剂，二氯甲烷：甲醇：水(10:3:0.1)；显色剂，1％三氯化铁乙醇溶液)，取比移值(Rf)＝0.4的单点流份合并，将上述合并流份减压浓缩之后用10mL的甲醇在50℃热熔，敞口静置，析出crenatoside结晶，过滤出crenatoside结晶，重复结晶3次，阴干，即得纯度为98.57％的crenatoside。实施例4：将弯管列当药材粉碎为80目，取粉末1000mL(相当于药材粉末质量260g)，加入10倍体积量的95％乙醇超声提取5次，每次60min，过滤，合并提取液，减压浓缩得到红褐色浸膏，将上述所得萃取浓缩物经六通阀泵入预处理过的中压硅胶柱(压力为2.5MPa)中，用二氯甲烷:甲醇：水(体积比18:1:0.1)恒梯度洗脱，洗脱流速为20mL/min，按每份50mL收集，TLC检识(聚酰胺板，青岛海洋化工厂产品；展开剂，二氯甲烷：甲醇：水(10:3:0.1)；显色剂，1％三氯化铁乙醇溶液)，取比移值(Rf)＝0.4的单点流份合并，将上述合并流份减压浓缩之后用15mL的甲醇在50℃热熔，敞口静置，析出crenatoside结晶，过滤出crenatoside结晶，重复结晶4次，阴干，即得纯度为98.22％的crenatoside。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)超声提取：将弯管列当药材粉碎，用乙醇作为提取溶媒进行超声提取，旋转蒸发浓缩得到浸膏；2)萃取：将上述浸膏通过乙酸乙酯‑水双相分散萃取，取乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯，剩余萃取浓缩物；3)中压硅胶层析：将上述所得萃取浓缩物经中压硅胶柱层析进行分离纯化，根据TLC检识合并目标流份，得到crenatoside洗脱液；4)重结晶：将上述组分减压浓缩后用溶剂溶解，敞口静置析出crenatoside结晶，过滤；重复本步骤2‑4次，阴干，即得crenatoside。

【技术特征摘要】
1.一种从弯管列当中提取制备crenatoside的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)超声提取：将弯管列当药材粉碎，用乙醇作为提取溶媒进行超声提取，旋转蒸发浓缩得到浸膏；2)萃取：将上述浸膏通过乙酸乙酯-水双相分散萃取，取乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯，剩余萃取浓缩物；3)中压硅胶层析：将上述所得萃取浓缩物经中压硅胶柱层析进行分离纯化，根据TLC检识合并目标流份，得到crenatoside洗脱液；4)重结晶：将上述组分减压浓缩后用溶剂溶解，敞口静置析出crenatoside结晶，过滤；重复本步骤2-4次，阴干，即得crenatoside。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中粉碎为80-100目；超声时间每次为40-60min，超声提取3-5次后合并提取液。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中乙醇用量...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲正义，王英平，金银萍，姚春林，张玉伟，
申请(专利权)人：中国农业科学院特产研究所，
类型：发明
国别省市：吉林,22