ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用制造技术

本发明专利技术提供了ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用，ZIP1具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，对骨髓间充质干细胞中ZIP1基因的表达进行调控，能够改变骨髓间充质干细胞的凋亡速度；本发明专利技术还提供了用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，该药物可以有效抑制骨髓间充质干细胞的凋亡，提高存活率；此外，本发明专利技术还提供了用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒。应用该试剂盒能够实现对骨髓间充质干细胞中ZIP1基因的表达进行调控，进而抑制骨髓间充质干细胞的凋亡。缓解了现有技术中缺乏一种应用ZIP1基因来有效抑制骨髓间充质干细胞凋亡的技术问题，ZIP1基因还可以在骨髓间充质干细胞培养中应用。

Application of ZIP1 gene in the preparation of products inhibiting apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells

The present invention provides the application of ZIP1 gene in the preparation of products for inhibiting the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. ZIP1 has a nucleotide sequence as shown in SEQ ID No.1, regulates the expression of ZIP1 gene in bone marrow mesenchymal stem cells, and can change the rate of apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells; the present invention also provides for inhibiting the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. In addition, the invention also provides a kit for inhibiting the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. This kit can regulate the expression of ZIP1 gene in bone marrow mesenchymal stem cells and inhibit the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. ZIP1 gene can also be used in bone marrow mesenchymal stem cell culture.

【技术实现步骤摘要】
ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用
本专利技术涉及分子生物学与细胞生物学
，具体而言，涉及ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用。
技术介绍
骨髓间充质干细胞来源于发育早期的中胚层和外胚层，是一种存在于骨髓腔和毛细血管的多潜能干细胞，当机体受到损伤和炎症时，可增殖分化成机体需要的相应细胞，如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞、神经元和神经胶质细胞等，因其高度自我更新和多向分化能力的特性而被广泛应用于再生医学行列。由于BMSCs具有分化为骨、软骨、神经元，神经胶质细胞等的多向分化潜能，并且取材方便、分离获取容易、免疫原性弱等特点，所以在骨组织工程中备受众研究者的广泛青睐，是组织工程中优良的种子细胞。近年来发现骨髓间充质干细胞可以经不同因素诱导，分化为具体的神经元如胆碱能神经元、胺能神经元、氨基酸能神经元、肽能神经元。最新研究表明骨髓间充质干细胞可以在受损的脑组织及脊髓中生存、增殖、迁移以及分化成神经样细胞，从而有效提高脊髓损伤、脑卒中等神经系统疾病的神经学功能，从而改善患者生存状态。神经细胞移植已为多种中枢神经系统疾病的治疗带来希望。在骨髓间充质干细胞分化过程中，必须要通过机体相关的信号通路发挥其效能，人体内的电子传递，基因调控表达，酶的活性都对其有或多或少的关系，而金属元素如铁、锌和铜等是所有生物体的必需营养素，在体内这些生物化学过程中均发挥着重要作用。锌是机体内300多种酶及转录因子的重要组成部分，是维持机体正常生理功能以及生长发育过程中所必须的微量元素，在核酸代谢，细胞复制，组织修复，神经功能恢复过程中发挥极其重要的作用，缺锌可能导致免疫功能受损，生长迟缓，脑发育障碍和延迟伤口愈合，还能引起神经功能症状以及影响认知表现。脊髓损伤后ZIP1和脑源性神经营养因子表达呈正相关，脑源性神经营养因子高表达对脊髓损伤的保护起重要作用。然而骨髓间充质干细胞移植后存活率不高，且分化为神经元的比例较低，导致修复效果不理想，研究也表明骨髓间质干细胞并不具有传导能力。因此，如何有效应用ZIP1基因，使其在药物和试剂等方面得到应用，开发ZIP1基因相关产品来抑制骨髓间充质干细胞凋亡，具有十分重要的现实意义。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用，缓解了现有技术中缺乏一种应用ZIP1基因来有效抑制骨髓间充质干细胞凋亡的技术问题。本专利技术的目的之二在于提供一种用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物。本专利技术的目的之三在于提供一种用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒。本专利技术的目的之四在于ZIP1基因在骨髓间充质干细胞培养中的应用。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：根据本专利技术第一个方面，ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用。优选地，在本专利技术方案基础上，ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡产品中的应用，ZIP1具有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。根据本专利技术的第二个方面，一种用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，药物包括具有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列的ZIP1。优选地，在本专利技术方案基础上，用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，药物包括如下任一项：(a)含有编码ZIP1序列的DNA分子；(b)含有编码ZIP1序列的RNA分子；(c)含有编码ZIP1序列的病毒。优选地，在本专利技术方案基础上，用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，药物还包括药学上可接受的载体，载体包括壳聚糖、胆固醇、脂质体、环糊精、微球或微囊中的一种或多种。根据本专利技术的第三个方面，一种用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒，用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒包括如下任一项：(a)含有编码ZIP1序列的DNA分子；(b)含有编码ZIP1序列的RNA分子；(c)含有编码ZIP1序列的病毒。优选地，在本专利技术方案的基础上，用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒，用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒还包括用于细胞转染的转染试剂、骨髓间充质干细胞培养基、PCR相关试剂、RNA抽提试剂和免疫荧光相关试剂中的一种或多种。优选地，在本专利技术方案基础上，用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒，骨髓间充质干细胞培养基包括转染用培养基和骨髓间充质干细胞生长完全培养基。优选地，在本专利技术方案基础上，用于抑制骨髓间充质干细胞的药物或用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒，含有编码ZIP1序列的DNA分子包括含有编码ZIP1序列的重组质粒和/或含有编码ZIP1序列的线性DNA片段。根据本专利技术的第四个方面，ZIP1基因在骨髓间充质干细胞培养中的应用。与已有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：(1)本专利技术提供的ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用，缓解了现有技术中缺乏一种应用ZIP1基因来有效抑制骨髓间充质干细胞凋亡的技术问题。(2)本专利技术提供的用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，应用该药物可以有效抑制骨髓间充质干细胞的凋亡，有效提高骨髓间充质干细胞的存活率。(3)本专利技术提供的用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒，应用该试剂盒能够实现对骨髓间充质干细胞中ZIP1基因的表达进行调控，进而抑制骨髓间充质干细胞的凋亡。(4)本专利技术提供的ZIP1基因在骨髓间充质干细胞培养中的应用，ZIP1基因可以应用与骨髓间充质干细胞的培养，通过对ZIP1基因的表达量进行调控，可以抑制或促进骨髓间充质干细胞的凋亡。附图说明图1a为本专利技术兔原代骨髓间充质干细胞常规培养1d后细胞生长情况示意图；图1b为本专利技术兔原代骨髓间充质干细胞常规培养2d后细胞生长情况示意图；图1c为本专利技术兔原代骨髓间充质干细胞常规培养3d后细胞生长情况示意图；图2a为对照组细胞凋亡率Tunel检测示意图；图2b为对照组细胞凋亡率DAPI染色核定位示意图；图2c为对照组细胞凋亡率Tunel检测示意图与DAPI染色核定位merge图；图3a为ZIP1siRNA转染骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率Tunel检测示意图；图3b为ZIP1siRNA转染骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率DAPI染色核定位示意图；图3c为ZIP1siRNA转染骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率Tunel检测示意图与DAPI染色核定位merge图；图4a为ZIP1表达载体转染骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率Tunel检测示意图；图4b为ZIP1表达载体转染骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率DAPI染色核定位示意图；图4c为ZIP1表达载体转染骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率Tunel检测示意图与DAPI染色核定位merge图；图5a为缺氧缺糖模型骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率Tunel检测示意图；图5b为缺氧缺糖模型骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率DAPI染色核定位示意图；图5c为缺氧缺糖模型骨髓间充质干细胞组细胞凋亡率Tunel检测示意图与DAPI染色核定位merge图；图6a为本专利技术流式细胞仪检测正常细胞组细胞凋亡率结果图；图6b为本专利技术流式细胞仪检测缺氧缺塘组细胞凋亡率结果图；图6c为本专利技术流式细胞仪检测缺氧缺糖ZIP1过表达组细胞凋亡率结果图；图6d为本专利技术流式细胞仪检测缺氧缺糖ZIP1siRNA组细胞凋亡率结果图。具体实施方式下面将本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的ZIP1基因在制备抑制骨髓间充质干细胞凋亡的产品中的应用，其特征在于，所述ZIP1具有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。3.一种用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，其特征在于，所述药物包括具有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列的ZIP1。4.根据权利要求3所述的用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，其特征在于，所述药物包括如下任一项：(a)含有编码ZIP1序列的DNA分子；(b)含有编码ZIP1序列的RNA分子；(c)含有编码ZIP1序列的病毒。5.根据权利要求4所述的用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的药物，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的载体，所述载体包括壳聚糖、胆固醇、脂质体、环糊精、微球或微囊中的一种或多种。6.一种用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的试剂盒，其特征在于，所述用于抑制骨髓间充质干细胞凋亡的...

【专利技术属性】
技术研发人员：章晓云，陈跃平，黄月香，冯洋，廖小林，袁振中，卓映宏，汤显能，董盼锋，
申请(专利权)人：广西中医药大学附属瑞康医院，
类型：发明
国别省市：广西,45