一种泥炭孢粉快速提取方法技术

一种泥炭孢粉快速提取方法，本发明专利技术属于沼泽湿地环境演化研究领域，它是为了解决现有泥炭孢粉提取方法操作步骤繁琐、周期长、成本高的问题。快速提取方法：一、采集泥炭沉积物；二、将质量浓度为8％～12％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合，煮沸处理，得到碱处理后的样品溶液；三、超声过筛；四、向步骤三的下层固相物加入HF溶液；五、混合物中加入质量浓度为10％～15％的HCl溶液；六、加入乙酸酐和浓硫酸的混合溶液，离心处理后加入蒸馏水，重复多次离心过程，最后加入甘油溶液。本发明专利技术将泥炭孢粉提取的实验操作步骤精简到了6步，每批样品实验周期缩短到了约48小时，显著提高了工作效率并降低了实验成本。

A method for rapid extraction of peat pollen

The invention belongs to the research field of environmental evolution of marsh wetland, and aims to solve the problems of complicated operation steps, long period and high cost of existing peat spore and pollen extraction methods. Rapid extraction methods: 1. collecting peat sediments; 2. mixing 8% ~ 12% NaOH solution with peat sediments, boiling treatment, get alkali-treated sample solution; 3. ultrasonic screening; 4. adding HF solution to the lower solid phase of step 3; 5. adding 10% ~ 12% NaOH solution to the mixture. 15% HCl solution; 6. Add acetic anhydride and concentrated sulfuric acid mixed solution, add distilled water after centrifugal treatment, repeated centrifugal process, and finally add glycerol solution. The invention simplifies the experimental operation steps of peat sporopollen extraction to 6 steps, shortens the experimental period of each batch of samples to about 48 hours, significantly improves the working efficiency and reduces the experimental cost.

【技术实现步骤摘要】
一种泥炭孢粉快速提取方法
本专利技术属于沼泽湿地环境演化研究领域，具体涉及一种泥炭沉积物孢粉的提取方法。
技术介绍
泥炭是沼泽湿地长期演化过程中植物残体未完全分解的产物。在沼泽湿地环境演化研究领域，泥炭沉积物由于富含孢粉化石遗存，是开展植被演替和古环境变化研究的良好信息载体。而泥炭孢粉的提取方法是开展此类研究的基础，并且孢粉提取效果和效率是决定实验结果可靠性的关键。目前，泥炭孢粉提取方法多照搬其他沉积物的孢粉提取方法，实验操作步骤繁琐(多达10余步)、周期长(5-6天)、成本高(平均每个样品约20元)等诸多弊端。考虑到泥炭沉积物的富含有机质的独特理化属性，探求一种快速、高效、可靠的孢粉提取方法是提升当前泥炭孢粉分析工作效率和效果的关键。
技术实现思路
本专利技术目的是为了解决现有泥炭孢粉提取方法操作步骤繁琐、周期长、成本高的问题，而提供一种泥炭孢粉快速提取方法。本专利技术泥炭孢粉快速提取方法按下列步骤实现：一、取样：采集泥炭沉积物；二、NaOH热处理：在玻璃烧杯中将质量浓度为8％～12％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合，然后对混合液进行30～40分钟煮沸处理，煮沸处理期间不断用玻璃棒搅拌，并补充蒸馏水以保证混合液的液面高度不变，得到碱处理后的样品溶液；三、超声过筛：将碱处理后的样品溶液倒入10μm孔径的筛网，然后一同放入超声波清洗机内进行超声过滤处理，过滤处理期间不断加入蒸馏水，使杂质充分过滤的同时稀释样品溶液至中性，将筛网上的剩余物装入离心管中，离心处理后除去上层清液，得到下层固相物；四、HF处理：向步骤三中离心管内的下层固相物加入质量浓度为35％～40％的HF溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，然后离心处理后除去上层清液，得到HF处理后的混合物；五、HCl处理：将步骤四得到的HF处理后的混合物中加入质量浓度为10％～15％的HCl溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，得到HCl处理后的混合物；六、离心富集：对步骤五得到的HCl处理后的混合物进行离心处理，除去上层清液，加入乙酸酐和浓硫酸体积比为8:1～10:1的混合溶液，充分搅拌后离心处理，除去上层清液，再加入蒸馏水搅拌后离心并除去上层清液，再重复加入蒸馏水搅拌后离心并除去上层清液的过程两次，然后转移到离心管中，加入体积浓度为40％～60％甘油溶液，封盖保存，完成泥炭孢粉的快速提取。本专利技术将泥炭孢粉提取的实验操作步骤精简到了6步(降低了约50％)，每批样品实验周期缩短到了约48小时(降低了约60％)，平均每个样品实验成本降低到了约8元(降低了约60％)，显著提高了工作效率并降低了实验成本。具体实施方式具体实施方式一：本实施方式泥炭孢粉快速提取方法按下列步骤实施：一、取样：采集泥炭沉积物；二、NaOH热处理：在玻璃烧杯中将质量浓度为8％～12％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合，然后对混合液进行30～40分钟煮沸处理，煮沸处理期间不断用玻璃棒搅拌，并补充蒸馏水以保证混合液的液面高度不变，得到碱处理后的样品溶液；三、超声过筛：将碱处理后的样品溶液倒入10μm孔径的筛网，然后一同放入超声波清洗机内进行超声过滤处理，过滤处理期间不断加入蒸馏水，使杂质充分过滤的同时稀释样品溶液至中性，将筛网上的剩余物装入离心管中，离心处理后除去上层清液，得到下层固相物；四、HF处理：向步骤三中离心管内的下层固相物加入质量浓度为35％～40％的HF溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，然后离心处理后除去上层清液，得到HF处理后的混合物；五、HCl处理：将步骤四得到的HF处理后的混合物中加入质量浓度为10％～15％的HCl溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，得到HCl处理后的混合物；六、离心富集：对步骤五得到的HCl处理后的混合物进行离心处理，除去上层清液，加入乙酸酐和浓硫酸体积比为8:1～10:1的混合溶液，充分搅拌后离心处理，除去上层清液，再加入蒸馏水搅拌后离心并除去上层清液，再重复加入蒸馏水搅拌后离心并除去上层清液的过程两次，然后转移到离心管中，加入体积浓度为40％～60％甘油溶液，封盖保存，完成泥炭孢粉的快速提取。本实施方式简化了实验操作步骤、加快实验处理速度以及降低了实验成本，提出了针对泥炭沉积物孢粉的全新高效提取方法。与传统实验方法相比，本专利技术具有实验操作步骤少、周期短、成本低的优势。具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一泥炭沉积物的体积为0.5～1cm3。本实施方式根据反复实验尝试，0.5～1cm3的泥炭沉积物是进行孢粉分析的理想样品量，其中的孢粉含量既能满足孢粉分析需要，同时也有利于简化实验步骤和减少实验耗材消耗。具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式二不同的是步骤二将80～100mL质量浓度为10％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合。具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是步骤二在电加热板辅助下对混合液进行30～40分钟煮沸处理。具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是步骤三中的离心处理是在转速3000转/分钟下离心20分钟。具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同的是步骤四向离心管内的下层固相物加入3～5mL质量浓度为39％的HF溶液。具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一不同的是步骤五将HF处理后的混合物中加入3～5mL质量浓度为10％的HCl溶液。具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一不同的是步骤六以3000转/分钟对步骤五得到的HCl处理后的混合物进行离心处理20分钟。具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同的是步骤六中所述的浓硫酸的质量浓度为95％～98％。具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式一至九之一不同的是步骤六加入3～5滴体积浓度为40％～60％甘油溶液。实施例：本实施例泥炭孢粉快速提取方法按下列步骤实施：一、取样：采集1cm3的泥炭沉积物；二、NaOH热处理：此步骤是泥炭提取孢粉的关键，由于孢粉本身虽有一定的抗碱能力，但过强的碱环境也会对孢粉产生一定的破坏作用，但由于泥炭沉积物有机质含量高，低浓度的碱溶液又不能很好的去除有机质，因此，选择合适浓度的碱溶液是保证泥炭沉积物提取孢粉效果的关键，在玻璃烧杯中将80mL质量浓度为10％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合，然后对混合液进行35分钟煮沸处理，煮沸处理期间不断用玻璃棒搅拌，并补充蒸馏水以保证混合液的液面高度不变，，其目的是尽量减少水分蒸发对碱溶液浓度的影响，从而避免碱溶液升高对孢粉破坏的风险，得到碱处理后的样品溶液；三、超声过筛：将碱处理后的样品溶液缓慢倒入10μm孔径的筛网，然后一同放入超声波清洗机内进行超声过滤处理以加快过滤速度，过滤处理期间不断加入蒸馏水，使杂质充分过滤的同时稀释样品溶液至中性，由于孢粉粒径多分布于15～200μm，此步骤目的是充分去除被碱分解的有机质和小于10μm粒径的其它杂质，筛网上保留孢粉和少量硅酸盐和碳酸盐物质，将筛网上的剩余物装入15ml塑料离心管中，用离心机在转速3000转/分钟下离心20分钟后除去上层清液，得到下层固相物；四、HF处理：在通风厨内，向步骤三中离心管内的下层固相物加入4mL质量浓度为39％的HF溶液，用耐酸树脂搅拌棒充分搅拌后静置反应1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种泥炭孢粉快速提取方法，其特征在于是按下列步骤实现：一、取样：采集泥炭沉积物；二、NaOH热处理：在玻璃烧杯中将质量浓度为8％～12％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合，然后对混合液进行30～40分钟煮沸处理，煮沸处理期间不断用玻璃棒搅拌，并补充蒸馏水以保证混合液的液面高度不变，得到碱处理后的样品溶液；三、超声过筛：将碱处理后的样品溶液倒入10μm孔径的筛网，然后一同放入超声波清洗机内进行超声过滤处理，过滤处理期间不断加入蒸馏水，使杂质充分过滤的同时稀释样品溶液至中性，将筛网上的剩余物装入离心管中，离心处理后除去上层清液，得到下层固相物；四、HF处理：向步骤三中离心管内的下层固相物加入质量浓度为35％～40％的HF溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，然后离心处理后除去上层清液，得到HF处理后的混合物；五、HCl处理：将步骤四得到的HF处理后的混合物中加入质量浓度为10％～15％的HCl溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，得到HCl处理后的混合物；六、离心富集：对步骤五得到的HCl处理后的混合物进行离心处理，除去上层清液，加入乙酸酐和浓硫酸体积比为8:1～10:1的混合溶液，充分搅拌后离心处理，除去上层清液，再加入蒸馏水搅拌后离心并除去上层清液，再重复加入蒸馏水搅拌后离心除去上层清液的过程两次，然后转移到离心管中，加入体积浓度为40％～60％甘油溶液，封盖保存，完成泥炭孢粉的快速提取。...

【技术特征摘要】
1.一种泥炭孢粉快速提取方法，其特征在于是按下列步骤实现：一、取样：采集泥炭沉积物；二、NaOH热处理：在玻璃烧杯中将质量浓度为8％～12％的NaOH溶液与泥炭沉积物混合，然后对混合液进行30～40分钟煮沸处理，煮沸处理期间不断用玻璃棒搅拌，并补充蒸馏水以保证混合液的液面高度不变，得到碱处理后的样品溶液；三、超声过筛：将碱处理后的样品溶液倒入10μm孔径的筛网，然后一同放入超声波清洗机内进行超声过滤处理，过滤处理期间不断加入蒸馏水，使杂质充分过滤的同时稀释样品溶液至中性，将筛网上的剩余物装入离心管中，离心处理后除去上层清液，得到下层固相物；四、HF处理：向步骤三中离心管内的下层固相物加入质量浓度为35％～40％的HF溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，然后离心处理后除去上层清液，得到HF处理后的混合物；五、HCl处理：将步骤四得到的HF处理后的混合物中加入质量浓度为10％～15％的HCl溶液，充分搅拌后静置反应10～13小时，得到HCl处理后的混合物；六、离心富集：对步骤五得到的HCl处理后的混合物进行离心处理，除去上层清液，加入乙酸酐和浓硫酸体积比为8:1～10:1的混合溶液，充分搅拌后离心处理，除去上层清液，再加入蒸馏水搅拌后离心并除去上层清液，再重复加入蒸馏水搅拌后离心除去上层清液的过程两次，然后转移到离心管中，加入体积浓度为...

【专利技术属性】
技术研发人员：张振卿，赵海洋，刘波，
申请(专利权)人：中国科学院东北地理与农业生态研究所，
类型：发明
国别省市：吉林,22