一种虾青素-胶原蛋白耦合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种虾青素‑胶原蛋白耦合物及其制备方法和应用，该方法为将富含虾青素的原料与水溶性有机溶剂混合，去除不溶性成分；将胶原蛋白用水溶解；在温度4～60℃、酸性条件下将上述两种溶液滴加混合，使胶原蛋白和虾青素在混和反应液中溶解，并避光搅拌反应；将上述反应液中生成的虾青素‑胶原蛋白耦合物分离纯化，即得。

Astaxanthin collagen coupling material and preparation method and application thereof

The invention discloses an astaxanthin-collagen coupling substance, a preparation method and an application thereof. The method comprises mixing Astaxanthin-rich raw materials with water-soluble organic solvents to remove insoluble components, dissolving collagen in water, dropping and mixing the above-mentioned two solutions under acidic conditions at temperatures of 4 to 60 degrees Celsius to make collagen eggs. The astaxanthin and astaxanthin were dissolved in the mixed reaction solution and stirred in the absence of light. The astaxanthin-collagen coupling product was isolated and purified.

【技术实现步骤摘要】
一种虾青素-胶原蛋白耦合物及其制备方法和应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种虾青素-胶原蛋白耦合物的制备以及预防、治疗皮肤光老化的应用。
技术介绍
皮肤光老化是皮肤长期受到紫外线照射所引起的累积损伤，过量的紫外线照射会使皮肤胶原、透明质酸和弹性蛋白降解，导致皮肤外观变化，严重者可导致基底细胞癌、黑素细胞瘤和鳞状细胞癌等肿瘤性疾病的形成。目前，预防和治疗光老化已成为医药、化妆品和生物材料领域研究的热点，开发安全、有效的防治光老化产品是目前相关产业研究的一个重要方向。虾青素(3,3′-二羟基-4,4′-二酮基-β-胡萝卜素，Astaxanthin,以下简称虾青素)能减少紫外线引起的皮肤损伤，改善皮肤胶原蛋白功能，有效延缓皮肤衰老。然而，虾青素本直接涂敷于皮肤使用时极大地限制了它在包括抗皮肤光老化在内的各种开发和应用中的直接使用。采用诸如微胶囊包埋、主客体包结络合和纳米沉淀等技术，以及低温避光保存、脂溶性溶剂溶解保存和小剂量涂敷使用等方法，虽然可以在一定程度上解决虾青素的应用缺陷，但对工艺技术水平要求高，抑或使用成本高、便利性和有效性不足。因此，目前市场上少有以虾青素为主要活性成份的皮肤用药品或化妆品。其中的根本原因在于：虾青素在现有各种应用中仍以不稳定的原始分子形式存在，物理方法无法从本质上解决虾青素应用的局限性。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种虾青素-胶原蛋白耦合物的制备方法。本专利技术的目的之二是提供上述方法制备的虾青素-胶原蛋白耦合物的应用。本专利技术所采取的技术方案是：一种虾青素-胶原蛋白耦合物的制备方法，包括以下步骤：1)将富含虾青素的原料与水溶性有机溶剂混合，去除不溶性成分；将胶原蛋白用水溶解；2)在温度4～60℃、酸性条件下将上述两种溶液滴加混合，使胶原蛋白和虾青素在反应液中溶解，并避光搅拌反应；3)将上述反应液中生成的虾青素-胶原蛋白耦合物分离纯化，得到虾青素-胶原蛋白耦合物。进一步的，步骤2)中，反应液中虾青素与胶原蛋白加入量的摩尔比为1:1～10:1。进一步的，步骤2)中，反应液中水溶性有机溶剂与水的体积比为0.5:1～4:1。进一步的，所述水溶性有机溶剂选自乙醇、丙酮、甲醇、乙二醇、二甲基亚砜、四氢呋喃。进一步的，所述富含虾青素的原料中虾青素的含量不少于1％w/w。上述任一项方法所制备的虾青素-胶原蛋白耦合物。上述所述的虾青素-胶原蛋白耦合物在制备预防和治疗皮肤光老化的产品中的应用。一种预防和治疗皮肤光老化的产品，该产品中含有上述所述的虾青素-胶原蛋白耦合物。进一步的，上述预防和治疗皮肤光老化的产品由0.5～2.0份权利要求6所述的虾青素-胶原蛋白耦合物、16～19份油相、5～7份乳化剂、74～77份水相制成。进一步的，所述油相由8～12份硬脂酸、1～2份十六醇、0.8～1.2份羊毛脂、4～6份石蜡油组成；所述乳化剂由4～5份单硬脂酸甘油酯、1～2份十二烷基硫酸钠组成；所述水相由2～3份甘油、70～75份水组成。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术所述制备的虾青素-胶原蛋白耦合物具有不同于胶原蛋白原料(214nm)和虾青素(480nm)的紫外特征吸收峰，可溶于水，无着色性。(2)本专利技术所述制备的虾青素-胶原蛋白耦合物具有更好的抗光氧化性，可更好地降低光照引发的皮肤厚度，降低MDA含量，提高SOD和GSH-Px抗氧化酶活力。本专利技术制备的虾青素-胶原蛋白耦合物具有预防和治疗皮肤光老化的作用，为胶原蛋白和虾青素的应用提供了市场前景。(3)本专利技术制备方法步骤简单，操作条件易控。附图说明图1为本专利技术虾青素-胶原蛋白耦合物在不同检测波长下的凝胶过滤色谱图，图中Coupling表示本专利技术的胶原蛋白-虾青素耦合物组，Collagenpeptide表示胶原蛋白多肽，Astaranthin虾青素；图2小鼠皮肤厚度(Thicknessofskin)变化，其中A：正常对照组；B：模型对照组；C：基质对照组；D：虾青素组；E：游离胶原蛋白和虾青素组，含4％游离虾青素(w/w)；F：本专利技术胶原蛋白-虾青素耦合物组；G：维生素E组；与正常对照组比较，***p<0.001，**p<0.01，*p<0.05；与模型对照组相比，###p<0.001，##p<0.01，#p<0.05)；图3各实验组小鼠的皮肤组织病理切片HE染色；图4各实验组小鼠的皮肤组织中MDA含量变化；图5各实验组小鼠的皮肤组织中SOD(I)和GSH-Px(II)活力变化。具体实施方式一种虾青素-胶原蛋白耦合物的制备方法，包括以下步骤：1)将富含虾青素的原料与水溶性有机溶剂混合，去除不溶性成分；将胶原蛋白用水溶解；2)在温度4～60℃、酸性条件下将上述两种溶液滴加混合，使胶原蛋白和虾青素在反应液中溶解，并避光搅拌反应；3)将上述反应液中生成的虾青素-胶原蛋白耦合物分离纯化，得到虾青素-胶原蛋白耦合物。优选的，步骤2)中，酸性条件指pH为3.0～6.0，更优选4.5～5.5，最优选5.0。优选的，步骤2)中的温度优选4～45℃，最优选37℃。优选的，步骤2)中，反应液中虾青素与胶原蛋白加入量的摩尔比为1:1～10:1。优选的，步骤2)中，反应液中水溶性有机溶剂与水的体积比为0.5:1～4:1。优选的，步骤2)中，避光搅拌反应时间为0.5～2h，更优选为0.5～1.5h，最优选为0.75h。优选的，步骤3)中，所述分离纯化包括采用有机溶剂沉淀、盐析法、膜过滤法和/或柱层析法进行分离纯化。优选的，所述水溶性有机溶剂选自乙醇、丙酮、甲醇、乙二醇、二甲基亚砜、四氢呋喃。优选的，所述富含虾青素的原料中虾青素的含量不少于1％w/w。更优选的，所述富含虾青素的原料为：不同顺反结构[(3S，3S′)、(3R，3S′)和(3R，3R′)]的虾青素单体及其组合、红球藻藻粉、雪藻藻粉、富含虾青素的藻类提取物、富含虾青素的甲壳生物提取物。优选的，所述胶原蛋白包括：分子量为500～20000的水解胶原蛋白或/和分子量为500～20000的明胶。上述任一项方法所制备的虾青素-胶原蛋白耦合物。上述所述的虾青素-胶原蛋白耦合物在制备预防和治疗皮肤光老化的产品中的应用。优选的，所述的产品包括护肤品、化妆品。一种预防和治疗皮肤光老化的产品，该产品中含有上述所述的虾青素-胶原蛋白耦合物。优选的，上述预防和治疗皮肤光老化的产品由0.5～2.0份上述所述的虾青素-胶原蛋白耦合物、16～19份油相、5～7份乳化剂、74～77份水相制成。优选的，所述油相由8～12份硬脂酸、1～2份十六醇、0.8～1.2份羊毛脂、4～6份石蜡油组成；所述乳化剂由4～5份单硬脂酸甘油酯、1～2份十二烷基硫酸钠组成；所述水相由2～3份甘油、70～75份水组成。下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1一种虾青素-胶原蛋白耦合物的制备方法将雨生红球藻来源的(3S，3S′)虾青素单体用乙醇溶解，离心去除不溶性成分，将平均分子量为15600的水解胶原蛋白用水溶解。调节上述两种溶液pH至5.0，在25℃下滴加混合，混合液中虾青素与胶原蛋白加入量的摩尔比为10:1，且混合液中乙醇与水的体积比为2:1，避光反应搅拌2小时后，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种虾青素‑胶原蛋白耦合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将富含虾青素的原料与水溶性有机溶剂混合，去除不溶性成分；将胶原蛋白用水溶解；2)在温度4～60℃、酸性条件下将上述两种溶液滴加混合，使胶原蛋白和虾青素在反应液中溶解，并避光搅拌反应；3)将上述反应液中生成的虾青素‑胶原蛋白耦合物分离纯化，得到虾青素‑胶原蛋白耦合物。

【技术特征摘要】
1.一种虾青素-胶原蛋白耦合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将富含虾青素的原料与水溶性有机溶剂混合，去除不溶性成分；将胶原蛋白用水溶解；2)在温度4～60℃、酸性条件下将上述两种溶液滴加混合，使胶原蛋白和虾青素在反应液中溶解，并避光搅拌反应；3)将上述反应液中生成的虾青素-胶原蛋白耦合物分离纯化，得到虾青素-胶原蛋白耦合物。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，反应液中虾青素与胶原蛋白加入量的摩尔比为1:1～10:1。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，反应液中水溶性有机溶剂与水的体积比为0.5:1～4:1。4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述水溶性有机溶剂选自乙醇、丙酮、甲醇、乙二醇、二甲基亚砜、四氢呋喃。5.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，所述富含虾...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘涛，李芸，王鑫，周婉，尹辉，戴良成，金小宝，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东,44