一种多肽药物偶联物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种多肽药物偶联物及其制备方法和应用，所述多肽药物偶联物包括替卡格雷和CREKA多肽，所述替卡格雷与CREKA多肽连接；本发明专利技术提供的多肽药物偶联物，将替卡格雷通过与多肽连接，相比于现有的血小板抑制剂，既能够实现肿瘤组织部位的高浓度富集，也能够在动脉粥样硬化组织高浓度富集，这样就能实现在特定区域抑制血小板的功能而不影响正常血液循环过程中的血小板功能，增加了药物利用度的同时降低了常规血小板抑制剂的出血风险，从而实现更好更安全的肿瘤转移抑制或者预防急性冠脉综合症的功能。

Polypeptide drug conjugate and preparation method and application thereof

The invention provides a polypeptide drug conjugate, a preparation method and an application thereof. The polypeptide drug conjugate comprises a tikagrel and a CREKA polypeptide, the tikagrel is connected with a CREKA polypeptide, and the polypeptide drug conjugate provided by the invention connects tikagrel with a polypeptide, which is comparable to the existing platelet inhibitor. It can not only enrich the tumor tissues but also the atherosclerotic tissues with high concentration. Thus, it can inhibit the platelet function in specific areas without affecting the platelet function in normal blood circulation, increase the availability of drugs and reduce the emergence of conventional platelet inhibitors. Blood risk, thereby achieving better and safer tumor metastasis suppression or prevention of acute coronary syndrome function.

【技术实现步骤摘要】
一种多肽药物偶联物及其制备方法和应用
本专利技术属于药物化学领域，涉及一种多肽药物偶联物及其制备方法和应用。
技术介绍
恶性肿瘤是目前威胁人类生命和健康的主要疾病之一，它的浸润和转移是其恶性化的特征性标志。肿瘤细胞经血液转移是肿瘤进行远端转移的主要途径,也是目前临床上大多数肿瘤患者治疗失败和死亡的主要因素。肿瘤转移过程包括肿瘤细胞穿越肿瘤组织的血管内皮细胞从原发部位迁出进入血液循环系统、肿瘤细胞随血液运行以及肿瘤细胞在转移部位的植入三个主要环节组成，转移过程涉及多种细胞黏附分子、细胞外基质以及其他血细胞间的相互作用。研究发现，血小板在肿瘤转移过程中发挥着至关重要的作用，具体作用机制主要包括以下几个方面：①进入血液循环中的肿瘤细胞激活血小板，二者聚集形成瘤栓，从而保护肿瘤细胞免受血液湍流以及免疫系统的攻击；②血小板表面存在可与肿瘤细胞和血管内皮细胞相互黏附的分子，使其既能够与损伤的内皮细胞发生黏附和融合，也能够与肿瘤细胞黏附，可起到促进肿瘤细胞-内皮细胞黏附的桥梁作用，从而帮助肿瘤细胞与转移部位的血管内皮细胞黏附；③当肿瘤细胞在转移部位植入后，血小板可以通过分泌多种生物活性因子直接促进肿瘤细胞生长和繁殖，并促进血管生成，为肿瘤生长提供合适的微环境。其中肿瘤细胞与血小板相互作用形成癌栓(即肿瘤细胞诱发的血小板聚集，tumorcell-inducedplateletaggregation,TCIPA)及其分泌蛋白酶破坏微血管进入周围组织是肿瘤血行转移的限速步骤。因此，抑制血小板的功能将有望成为抑制肿瘤转移的有力手段。目前已有多个抗血小板药物在动物模型上被成功用于抑制肿瘤细胞转移的研究。如血小板缺失小鼠在实验性肿瘤转移模型中的肺转移数显著降低；利用GPIIbIIIa单克隆抗体能够有效抑制血小板与肿瘤细胞的粘附，从而抑制肿瘤转移；利用血小板ADP受体抑制剂替卡格雷在小鼠模型中成功抑制了肿瘤细胞的转移并延长小鼠生存期。然而，通过全身系统性的抑制或者敲除动物体内的血小板存在全身出血性风险，成为限制这类方法被应用于临床的重要因素。另一方面，动脉粥样硬化(atherosclerosis)是心脑血管疾病共同的病理学基础，也是导致患者死亡的重要原因。病理学研究表明，动脉粥样硬化的发生发展包括脂质浸润、血小板活化、血栓形成、内膜损伤、炎性反应、氧化应激、血管平滑肌细胞激活等。虽然许多学者曾提出关于AS发病机制的不同学说，但是血小板活化是正常凝血机制中的关键步骤，也是血管动脉粥样硬化疾病如急性冠脉综合症(ACS)病理性血栓形成的重要原因。因此，抗血小板治疗是心、脑血管疾病治疗的一个非常重要的方面。目前可用的口服抗血小板药物包括阿司匹林、P2Y12受体拮抗剂氯吡格雷和普拉格雷，它们均能改善动脉粥样硬化患者的缺血症状。然而，由于目前口服抗血小板制剂具有较大的缺血性风险和较高的出血倾向，寻找新的可减少缺血性事件发生和出血危险性的治疗药物势在必行。因此，如何能够特异性的抑制血小板与肿瘤细胞结合，以及如何使血小板抑制剂特异性的结合到动脉粥样硬化部位，且不影响血小板正常凝血功能，是这两种
的瓶颈问题。我们认为实现现有抗血小板药物的靶向投递，从而实现在肿瘤组织部位或者动脉粥样硬化部位特异性高浓度富集，是解决这一问题的关键。多肽偶联药物(peptidedrugconjugate,PDC)是一种新型的偶联药物。它是依赖一端约10个氨基酸的肽链作为靶向肿瘤细胞的靶向结构域，另一端是具有生物功能的药物分子，实现药物分子的高效靶向投递，达到肿瘤治疗增效减毒的科学目的。与抗体偶联药物(antibodydrugconjugate,ADC)相比，它的分子量更小，不易引起免疫反应；与抗体生产的复杂工艺过程相比，PDC可完全由化学方法合成，效率更高，且更容易进行纯化。因此，PDC已越来越成为下一代靶向药物的发展趋势。基于此，本专利技术旨在将肿瘤血管靶向多肽(CREKA)与现有血小板抑制剂偶联到一起形成一种新型多肽药物偶联物，有望实现高效低毒的抑制肿瘤转移和抑制动脉粥样硬化进展的科学目标。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种多肽药物偶联物及其制备方法和应用。为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：第一方面，本专利技术提供了一种多肽药物偶联物，所述多肽药物偶联物包括替卡格雷和CREKA多肽，所述替卡格雷与CREKA多肽连接。本专利技术提供的多肽药物偶联物，将替卡格雷通过与多肽连接，相比于现有的血小板抑制剂，既能够实现肿瘤组织部位的高浓度富集，也能够在动脉粥样硬化组织高浓度富集，这样就能实现在特定区域抑制血小板的功能而不影响正常血液循环过程中的血小板功能，增加了药物利用度的同时降低了常规血小板抑制剂的出血风险，从而实现更好更安全的肿瘤转移抑制或者预防急性冠脉综合症的功能。本专利技术提供的多肽药物偶联物，是一种全新的药物偶联物，替卡格雷常见于单独用药，而制备成多肽类分子联合用药，则没有任何相关研究。替卡格雷是由美国阿斯利康公司研发并于2011年上市的选择性ADP受体-P2Y12抑制剂，属于新的化学类别-环戊基三唑嘧啶(CPTP)类，是一种新型的血小板聚集抑制剂，选择性拮抗腺苷二磷酸(ADP)，抑制ADP介导的血小板活化及聚集，其与氯吡格雷的作用机制相似。但不同的是，替卡格雷与血小板P2Y12受体之间的相互作用具有可逆性，从而对血栓的形成进行抑制，没有构象改变和信号传递，并且在停药后血液中的血小板功能也随之快速恢复。虽然它能够更好的保护血小板数量和功能，但是临床应用中仍然存在出血风险。CREKA(Cys-Arg-Glu-Lys-Ala)多肽，是利用体内肽库筛选鉴别出的一个五肽，它能与肿瘤血管中的凝血血浆蛋白结合，进而定位在肿瘤血管中或者动脉粥样硬化血管中，是药物设计过程中广泛应用的靶向多肽。因此，将替卡格雷与CREKA多肽结合形成新的多肽药物偶联物，则可以特异性的抑制肿瘤组织内部的血小板功能，或者特异性抑制动脉粥样硬化部位的血小板功能，而不影响正常血液循环过程中的血小板功能，从而实现高效低毒的抑制肿瘤转移或者预防急性冠脉综合症的终极目标。优选地，所述连接剂包括直链脂肪二酸酐。优选地，所述直链脂肪二酸酐包括乙二酸酐、丙二酸酐、丁二酸酐、戊二酸酐、己二酸酐、庚二酸酐、壬二酸酐或癸二酸酐中的任意一种。本专利技术所用的链接剂具有良好的生物相容性，相比起具有类似功能纳米载体，安全性更好。优选地，所述CREKA多肽为Cys-Arg-Glu-Lys-Ala组成的五肽。本专利技术所用的多肽具有良好的生物相容性，相比起具有类似功能纳米载体，安全性更好，同时具有良好的靶向功能，效果突出。优选地，本专利技术所述多肽药物偶联物的结构具体如式I所示：其中，R为直链脂肪基。示例性的如：当连接剂为乙二酸酐时，R为CH2-CH2；当连接剂为丙二酸酐时，R为CH2-CH2-CH2。在本专利技术中，替卡格雷通过连接剂与多肽连接的方式，应既不影响替卡格雷的血小板抑制功能，也不影响CREKA多肽的肿瘤以及动脉粥样硬化靶向功能。作为优选，替卡格雷的连接位点选择为自由羟基，CREKA多肽的连接位点选择为N端的自由氨基；而如果其他位置与连接剂相连，则CREKA多肽的活性被破坏，从而不具有多肽的功能。第二方面，本专利技术提供了一种如第本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽药物偶联物，其特征在于，所述多肽药物偶联物包括替卡格雷和CREKA多肽，所述替卡格雷与CREKA多肽连接。

【技术特征摘要】
1.一种多肽药物偶联物，其特征在于，所述多肽药物偶联物包括替卡格雷和CREKA多肽，所述替卡格雷与CREKA多肽连接。2.根据权利要求1所述的多肽药物偶联物，其特征在于，所述替卡格雷通过连接剂与CREKA多肽连接；优选地，所述连接剂包括直链脂肪二酸酐；优选地，所述直链脂肪二酸酐包括乙二酸酐、丙二酸酐、丁二酸酐、戊二酸酐、己二酸酐、庚二酸酐、壬二酸酐或癸二酸酐中的任意一种。3.根据权利要求1或2所述的多肽药物偶联物，其特征在于，所述CREKA多肽为Cys-Arg-Glu-Lys-Ala组成的五肽。4.根据权利要求1-3中任一项所述的多肽药物偶联物，其特征在于，所述多肽药物偶联物的结构如式I所示：其中，R为直链脂肪基。5.根据权利要求1-4中任一项所述的多肽药物偶联物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：以多肽固相合成法合成CREKA多肽，而后将替卡格雷连接至CREKA多肽上得到所述多肽药物偶联物；优选地，通过使用连接剂将替卡格雷连接至CREKA多肽上。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)以多肽固相合成法合成CREKA多肽；(2)将CREKA多肽与连接剂在催化剂和碱性试剂存在下于溶剂中反应得到产物；(3)将步骤(2)得到的产物在催化剂和碱性试剂存在...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂广军，史权威，李素萍，张银龙，
申请(专利权)人：国家纳米科学中心，
类型：发明
国别省市：北京,11