一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法技术

本发明专利技术公开了一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，属于动物分子育种领域，具体涉及一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法。通过亲本选择和培育、建立家系、孵化和育苗、选育出子一代性状优良的家系，计算不同个体之间的亲缘关系重新选择亲本进行培育，按照上述方法经过多代选育，可培育出优良性状稳定的克氏原螯虾。本发明专利技术为大规模家系构建和选育奠定了基础，有助于选育具有生长快速的优良性状新品系。

A breeding method to maintain excellent traits of crayfish

The invention discloses a breeding method for maintaining the fine characteristics of procrayfish, belonging to the field of animal molecular breeding, in particular to a breeding method for maintaining the fine characteristics of procrayfish. Through the selection and breeding of parents, the establishment of families, hatching and seedling breeding, the breeding of families with good characters of the first generation, the calculation of the genetic relationship between different individuals and the re-selection of parents for breeding, according to the above method after multiple generations of breeding, can be cultivated with good and stable characteristics of the prokaryotic crayfish. The invention lays a foundation for large-scale family construction and breeding, and is helpful for breeding new strains with good characteristics of fast growth.

【技术实现步骤摘要】
一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法
本专利技术涉及一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，属于动物分子育种领域。
技术介绍
克氏原螯虾型似虾而外壳坚硬。体长约5.6-11.9厘米，暗红色，甲壳上部分为黑色，是淡水经济虾类。因肉味鲜美受到广大人们的喜爱。因其杂食性、生长迅速、适应能力强等原因在外界环境中具有绝对的竞争优势。其摄食范围包括水草、藻类、水生昆虫、动物尸体等。但是人工养殖的克氏原螯虾由于近亲繁殖等已经出现严重的种群退化。人工养殖的克氏原螯虾个体普遍较小，性成熟早，这给广大的养殖户带来了巨大的经济损失。现在亟待一种有效的方法改良克氏原螯虾的品种，本专利技术提出了一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，利用本方法可以得到大量的具有生长优势性状的克氏原螯虾。技术方案一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，其特征是：包括以下选育步骤：1、亲本的选择和培育：选择30个克氏原螯虾家系，每个家系的个体数为1000-3000尾2-3月龄克氏原螯虾幼虾，分别测量体长体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选出克氏原螯虾雌虾和雄虾各1尾作为备选亲本。选育出雄虾和雌虾做好PIT标记，养殖在养殖池内，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。2、建立家系：待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20-30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。3、孵化和育苗：将产生的子一代克氏原螯虾进行人工孵化。每个家系单独放置在一个养殖池内，同等条件下饲养，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。4、克氏原螯虾的选育：所有的子一代克氏原螯虾尽量保证处于相同生活环境，待养殖一年后，测量每个家系所有克氏原螯虾的体长和体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选一条克氏原螯虾雌虾和雄虾作为亲本。5、重新建立家系：把选择出的克氏原螯虾做好重新PIT标记，养殖在环境适宜的养殖池内，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20-30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。按照上述方法经过3-5代连续选育，即可获得优良性状稳定的克氏原螯虾。微卫星标记技术所用的10个微卫星引物指标参数如下：利用微卫星标记技术计算挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系的步骤为：取克氏原螯虾组织样品；提取克氏原螯虾样品DNA；利用权力要求2所示的微卫星位点对克氏原螯虾样品进行PCR扩增；把PCR扩增产物在12％的聚丙烯酰胺胶上进行电泳分离；根据分离结果统计PCR扩增产物的基因型；根据各个个体的基因分型结果利用NTsys软件计算挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。PCR反应体系是15ul：10×PCRBuffer1.5ul，2.5mmol/LdNTP0.5ul，MgCl21.5ul，上下游引物各0.5ul，Taq酶0.3ul，DNA模板2ul，超纯水8.2ul。所述的PCR反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。与现有技术相比，本专利技术具有以下的优点：本专利技术通过选择具有生长优势的克氏原螯虾作为亲本，然后利用个体之间的亲缘关系建立家系，既避免了近亲繁殖，又能产生性状优良的子代，把传统的育种方法和现代分子育种方法完美结合。本专利技术通过多代培育和选育，可以得到大量的优良性状稳定的克氏原螯虾。具体实施方式实施例1一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，其特征是：包括以下选育步骤：1、亲本的选择和培育：选择30个克氏原螯虾家系，每个家系的个体数为1000-3000尾2-3月龄克氏原螯虾幼虾，分别测量体长体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选出克氏原螯虾雌虾和雄虾各1尾作为备选亲本。选育出雄虾和雌虾做好PIT标记，养殖在养殖池内，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。2、建立家系：待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20-30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。3、孵化和育苗：将产生的子一代克氏原螯虾进行人工孵化。每个家系单独放置在一个养殖池内，同等条件下饲养，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。4、克氏原螯虾的选育：所有的子一代克氏原螯虾尽量保证处于相同生活环境，待养殖一年后，测量每个家系所有克氏原螯虾的体长和体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选一条克氏原螯虾雌虾和雄虾作为亲本。5、重新建立家系：把选择出的克氏原螯虾做好重新PIT标记，养殖在环境适宜的养殖池内，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20-30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。按照上述方法经过3-5代连续选育，即可获得优良性状稳定的克氏原螯虾。微卫星标记技术所用的10个微卫星引物指标参数如下：利用微卫星标记技术计算挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系的步骤为：取克氏原螯虾组织样品；提取克氏原螯虾样品DNA；利用权力要求2所示的微卫星位点对克氏原螯虾样品进行PCR扩增；把PCR扩增产物在12％的聚丙烯酰胺胶上进行电泳分离；根据分离结果统计PCR扩增产物的基因型；根据各个个体的基因分型结果利用NTsys软件计算挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。PCR反应体系是15ul：10×PCRBuffer1.5ul，2.5mmol/LdNTP0.5ul，MgCl21.5ul，上下游引物各0.5ul，Taq酶0.3ul，DNA模板2ul，超纯水8.2ul。所述的PCR反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，其特征是：包括以下选育步骤：(1)亲本的选择和培育：选择30个克氏原螯虾家系，每个家系的个体数为1000‑3000尾2‑3月龄克氏原螯虾幼虾，分别测量体长体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选出克氏原螯虾雌虾和雄虾各1尾作为备选亲本。选育出雄虾和雌虾做好PIT标记，养殖在养殖池内，水温保持在20‑25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。(2)建立家系：待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20‑30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。(3)孵化和育苗：将产生的子一代克氏原螯虾进行人工孵化。每个家系单独放置在一个养殖池内，同等条件下饲养，水温保持在20‑25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。(4)克氏原螯虾的选育：所有的子一代克氏原螯虾尽量保证处于相同生活环境，待养殖一年后，测量每个家系所有克氏原螯虾的体长和体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选一条克氏原螯虾雌虾和雄虾作为亲本。(5)重新建立家系：把选择出的克氏原螯虾做好重新PIT标记，养殖在环境适宜的养殖池内，水温保持在20‑25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20‑30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。按照上述方法经过3‑5代连续选育，即可获得优良性状稳定的克氏原螯虾。...

【技术特征摘要】
1.一种保持克氏原螯虾优良性状的育种方法，其特征是：包括以下选育步骤：(1)亲本的选择和培育：选择30个克氏原螯虾家系，每个家系的个体数为1000-3000尾2-3月龄克氏原螯虾幼虾，分别测量体长体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选出克氏原螯虾雌虾和雄虾各1尾作为备选亲本。选育出雄虾和雌虾做好PIT标记，养殖在养殖池内，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。(2)建立家系：待克氏原螯虾性成熟后，利用微卫星标记技术计算被挑选出来的每个雌虾和雄虾之间的亲缘关系。选择亲缘关系较远的雌虾和雄虾建立20-30个家系进行克氏原螯虾人工繁殖。(3)孵化和育苗：将产生的子一代克氏原螯虾进行人工孵化。每个家系单独放置在一个养殖池内，同等条件下饲养，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三次，投喂量为20分钟食尽即可。(4)克氏原螯虾的选育：所有的子一代克氏原螯虾尽量保证处于相同生活环境，待养殖一年后，测量每个家系所有克氏原螯虾的体长和体重，挑选出具有明显生长优势的克氏原螯虾，每个家系挑选一条克氏原螯虾雌虾和雄虾作为亲本。(5)重新建立家系：把选择出的克氏原螯虾做好重新PIT标记，养殖在环境适宜的养殖池内，水温保持在20-25摄氏度，不间断充气，培育期间投喂饲料和鱼块，每天投喂三...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆超平，马源潮，
申请(专利权)人：海南归耘田农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：海南,46