一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法技术

本发明专利技术涉及一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，步骤包括：S1制备保存雄鱼精液的培养液，取雄鱼精液用培养液按照1:30～40定容制成混合液，将混合液等分成若干份；S2制备含有充足氧气的富氧瓶，将S1中的混合液按照份数分装冷藏至富氧瓶中；S3制备润滑液，每个受精单位加入10ml润滑液以进行清洗和润滑；S4清洗和润滑后，每个受精单位中加入一份所述S2的混合液，充分搅拌混合，再加入450～550ml富氧水后搅拌，完成授精。本发明专利技术实现了人工授精的定量化操作，并且装有雄鱼精液的混合液具有较长的保质期，同时使濒危鱼类人工繁殖过程中野生雄鱼亲本的利用效率提高300～400倍。

A method to reduce the demand for male fish in the process of artificial reproduction of endangered fish

The invention relates to a method for reducing the requirement of male fish in the artificial breeding process of endangered fish. The steps include: preparing the culture medium for preserving male fish semen by S1, taking the male fish semen to be mixed with the culture medium according to the constant volume of 1:30-40, dividing the mixed liquid into several parts, preparing an oxygen-enriched bottle containing sufficient oxygen by S2, and mixing the semen in S1. The mixture is refrigerated and stored in oxygen-enriched bottles according to the number of parts; the lubricant is prepared by S3, and 10 ml lubricant is added to each fertilized unit for cleaning and lubrication; after the cleaning and lubrication of S4, a mixture of S2 is added to each fertilized unit, and the mixture is fully stirred and mixed, and then 450-550 ml oxygen-enriched water is added for stirring to complete the fertilization. The invention realizes the quantitative operation of artificial insemination, and the mixed liquid containing male fish semen has a long shelf life, at the same time, the utilization efficiency of wild male parents in the artificial breeding process of endangered fish is increased by 300-400 times.

【技术实现步骤摘要】
一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法
本专利技术涉及鱼类养殖方法，尤其涉及一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法。
技术介绍
近年来随着西部水电站的梯级开发，导致野生鱼类生境破坏，大坝阻隔鱼类洄游通道，使得江河野生渔业资源遭到严重破坏，为了弥补水电开发对野生渔业资源的影响，通常采用增殖放流的技术手段对野生渔业资源进行补偿。随着渔业资源现状的进一步恶化，野生鱼类亲本采集变得越来越困难；另一方面，野生鱼类亲本在人工驯养的过程中，死亡率较高；由于人工驯养环境不能完全模拟野生鱼类生境，导致亲本性成熟的比例较低。常规人工繁殖技术雌鱼与雄鱼的数量配比通常为1:1～1.2:1，特别是一些精子量少的鲇形目鱼类和鳅科鱼类，繁殖过程中需要大量雄鱼提供精液，以保证授精效果。因此如何利用有限的雄性亲本繁殖出更多的野生亲本子一代鱼苗成为摆在增殖放流站运行企业面前的一个难题。因此有必要专利技术一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，以解决濒危鱼类人工繁殖过程中对雄性亲本需求量大的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述现状，提供一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法。本专利技术采用的技术方案：一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，步骤包括：S1制备保存雄鱼精液的培养液，所述培养液为每1000ml蒸馏水中含有KCl0.4～0.6g，CaCl20.1～0.3g，NaHCO32.0～2.2g，葡萄糖28～30g，青霉素4.5～5.5万IU，取所述雄鱼精液用所述培养液按照1:30～40定容制成混合液，将混合液等分成15～20份；S2制备含有充足氧气的富氧瓶，将所述S1中的混合液按照份数分装至所述富氧瓶中，并保存在冰箱冷藏；S3制备清洗和润滑鱼卵的润滑液，所述润滑液为每1000ml蒸馏水中含有KCl0.35～0.4g，MgSO4·7H2O0.2～0.3g，NaCl0.23～0.25g，葡萄糖0.80～1.20g，以每10万粒鱼卵为一个受精单位，每个所述受精单位加入10ml所述润滑液以进行清洗和润滑；S4清洗和润滑后，每个所述受精单位中加入一份所述S2中的混合液，充分搅拌混合，再加入450～550ml富氧水后搅拌，完成授精。本专利技术的效果是：以一种精细化的方式对濒危鱼类进行人工繁殖，与传统人工授精相比，实现人工授精定量化操作。第二混合液具有一个月的保质期，解决传统人工繁殖中因雌雄鱼发育不同步、效应时间不一致导致的人工繁殖失败的技术难题。同时使得濒危鱼类精子得到最大化的利用，能够使传统濒危鱼类人工繁殖过程中雌鱼与雄鱼配比由1:1～1.2:1提高到300～400:1以上，使濒危鱼类人工繁殖过程中野生雄鱼亲本的利用效率提高300～400倍，最大限度地减少人工繁殖对野生渔业资源的消耗和伤害。具体实施方式以下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例1：本专利技术提供的一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，其步骤为：分别将0.40gKCl，0.10gCaCl2，2.00gNaHCO3，28.0g葡萄糖，4.5万IU青霉素溶解在1000ml蒸馏水中，配成培养液。分别将0.35gKCl，0.20gMgSO4·7H2O，0.23gNaCl，0.80g葡萄糖溶解在1000ml蒸馏水中，配制成润滑液，也将润滑液保存在冰箱冷藏室内，冷藏室温度为0-4℃。冷藏保存时精子有微弱的代谢需要消耗氧气，因此在保存时应保持一定的空气或氧气。取容量为10ml的棕色带盖玻璃瓶，采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，灭菌后烘干玻璃瓶；瓶盖上方事先固定一团浸过蒸馏水的脱脂棉，将连接小型氧气瓶的硬质透明塑料管伸至玻璃瓶底部，打开氧气瓶阀门，缓慢通入氧气，1min后取出塑料管，立即盖上瓶盖，制成富氧玻璃瓶。取充分曝气的自来水，采用纯氧充分曝气，制成富氧水。提前给雄鱼注射催产针，待雄鱼效应时间到达时，将雄鱼抓起，擦干鱼体水分，腹面朝上，同时用培养液清洗雄鱼生殖孔，前几滴挤出的精液弃取，之后挤出的精液用一次性吸管吸取备用。需要说明的是，每条鱼的精液不要混合。再用小型注射器取少量精液滴在载玻片上，之后滴入少量清水将精子激活，镜检发现80％以上精子快速向前运动，则为合格精液。取1ml镜检合格的精液，用培养液定容至30ml，制成混合液，将混合液等分成20份，将每份混合液分装在不同富痒玻璃瓶中，保存在0-4℃的冰箱中，保存有效期为30天。再对雌鱼进行人工催产，待雌鱼到达效应期时进行采卵，每10万粒鱼卵为一个授精单位，先加入10ml润滑液对鱼卵进行清洗润滑，然后加入一份混合液，并用羽毛沿一个方向轻轻搅拌混合均匀，之后加入450ml富氧水，将鱼卵沿一个方向轻轻搅拌2min，完成授精后将鱼卵倒入孵化器进行孵化。实施例2：本专利技术提供的一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，其步骤为：分别将0.60gKCl，0.30gCaCl2，2.20gNaHCO3，30.0g葡萄糖，5.5万IU青霉素溶解在1000ml蒸馏水中，配成培养液。分别将0.40gKCl，0.30gMgSO4·7H2O，0.25gNaCl，1.20g葡萄糖溶解在1000ml蒸馏水中，配制成润滑液，也将润滑液保存在冰箱冷藏室内，冷藏室温度为0-4℃。冷藏保存时精子有微弱的代谢需要消耗氧气，因此在保存时应保持一定的空气或氧气。取容量为10ml的棕色带盖玻璃瓶，采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，灭菌后烘干玻璃瓶；瓶盖上方事先固定一团浸过蒸馏水的脱脂棉，将连接小型氧气瓶的硬质透明塑料管伸至玻璃瓶底部，打开氧气瓶阀门，缓慢通入氧气，1min后取出塑料管，立即盖上瓶盖，制成富氧玻璃瓶。取充分曝气的自来水，采用纯氧充分曝气，制成富氧水。提前给雄鱼注射催产针，待雄鱼效应时间到达时，将雄鱼抓起，擦干鱼体水分，腹面朝上，同时用培养液清洗雄鱼生殖孔，前几滴挤出的精液弃取，之后挤出的精液用一次性吸管吸取备用。需要说明的是，每条鱼的精液不要混合。再用小型注射器取少量精液滴在载玻片上，之后滴入少量清水将精子激活，镜检发现80％以上精子快速向前运动，则为合格精液。取1ml镜检合格的精液，用培养液定容至40ml，制成混合液，将混合液等分成15份，将每份混合液分装在不同富痒玻璃瓶中，保存在0-4℃的冰箱中，保存有效期为30天。再对雌鱼进行人工催产，待雌鱼到达效应期时进行采卵，每10万粒鱼卵为一个授精单位，先加入10ml润滑液对鱼卵进行清洗润滑，然后加入一份混合液，并用羽毛沿一个方向轻轻搅拌混合均匀，之后加入550ml富氧水，将鱼卵沿一个方向轻轻搅拌2min，完成授精后将鱼卵倒入孵化器进行孵化。实施例3：本专利技术提供的一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，其步骤为：分别将0.50gKCl，0.2gCaCl2，2.10gNaHCO3，29.00g葡萄糖，5万IU青霉素溶解在1000ml蒸馏水中，配成培养液。分别将0.38gKCl，0.25gMgSO4·7H2O，0.24gNaCl，1.00g葡萄糖溶解在1000ml蒸馏水中，配制成润滑液，也将润滑液保存在冰箱冷藏室内，冷藏室温度为0-4℃。冷藏保存时精子有微弱的代谢需要消耗氧气，因此在保存时应保持一定的空气或氧气。取容量为10ml的棕色带本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，其特征在于，步骤包括：S1制备保存雄鱼精液的培养液，所述培养液为每1000ml蒸馏水中含有KCl 0.4～0.6g，CaCl2 0.1～0.3g，NaHCO3 2.0～2.2g，葡萄糖28～30g，青霉素4.5～5.5万IU，取所述雄鱼精液用所述培养液按照1:30～40定容制成混合液，将混合液等分成15～20份；S2制备含有充足氧气的富氧瓶，将所述S1中的混合液按照份数分装至所述富氧瓶中，并保存在冰箱冷藏；S3制备清洗和润滑鱼卵的润滑液，所述润滑液为每1000ml蒸馏水中含有KCl 0.35～0.4g，MgSO4·7H2O 0.2～0.3g，NaCl 0.23～0.25g，葡萄糖0.80～1.20g，以每10万粒鱼卵为一个受精单位，每个所述受精单位加入10ml所述润滑液以进行清洗和润滑；S4清洗和润滑后，每个所述受精单位中加入一份所述S2的混合液，充分搅拌混合，再加入450～550ml富氧水后搅拌，完成授精。

【技术特征摘要】
1.一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，其特征在于，步骤包括：S1制备保存雄鱼精液的培养液，所述培养液为每1000ml蒸馏水中含有KCl0.4～0.6g，CaCl20.1～0.3g，NaHCO32.0～2.2g，葡萄糖28～30g，青霉素4.5～5.5万IU，取所述雄鱼精液用所述培养液按照1:30～40定容制成混合液，将混合液等分成15～20份；S2制备含有充足氧气的富氧瓶，将所述S1中的混合液按照份数分装至所述富氧瓶中，并保存在冰箱冷藏；S3制备清洗和润滑鱼卵的润滑液，所述润滑液为每1000ml蒸馏水中含有KCl0.35～0.4g，MgSO4·7H2O0.2～0.3g，NaCl0.23～0.25g，葡萄糖0.80～1.20g，以每10万粒鱼卵为一个受精单位，每个所述受精单位加入10ml所述润滑液以进行清洗和润滑；S4清洗和润滑后，每个所述受精单位中加入一份所述S2的混合液，充分搅拌混合，再加入450～550ml富氧水后搅拌，完成授精。2.根据权利要求1所述的一种降低濒危鱼类人工繁殖过程中雄鱼需求量的方法，其特征在于，所述培养液的成分为KCl0.5g，CaCl20.2g，NaHCO32.1g，葡萄糖29.0g，青霉素5万IU，蒸馏水10...

【专利技术属性】
技术研发人员：张运海，王鑫，丁瑶，胡佳祥，顾正选，汪云，
申请(专利权)人：武汉中科瑞华生态科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42