The invention belongs to the field of molecular biology and provides a pumpkin alpha tubulin (TUA) gene and its application as an internal reference gene. The nucleotide sequence of TUA gene of pumpkin is shown in SEQ ID NO.1. The real-time fluorescence quantitative PCR primers of pumpkin designed by this gene sequence, such as SEQ ID NO.2 and SEQ ID NO.3, show that the real-time fluorescence quantitative PCR primers designed by this method have strong specificity, high stability, reliability and repeatability. The results showed that the expression of Alpha tubulin was stable in different tissues, different periods and various abiotic stress conditions, and it was suitable to be used as an internal reference gene in the study of gene expression in pumpkin.
【技术实现步骤摘要】
一种美洲南瓜TUA基因及应用
本专利技术属于分子生物学
,具体涉及一种美洲南瓜不同组织、不同时期及各种非生物胁迫条件下均能稳定表达的α-tubulin(TUA)基因及其作为内参基因的应用。
技术介绍
美洲南瓜(CucurbitapepoL.),又名西葫芦,为葫芦科(Cucurbitaceae)南瓜属一年生草本植物,原产美洲南部,十九世纪中叶我国开始栽培。美洲南瓜味道鲜美,营养丰富,且具有很好的医疗保健功能,深受大众喜爱,在我国大范围的种植,现已成为仅次于黄瓜的第二大瓜类蔬菜。随着其分子生物学研究的不断深入和发展,基因表达分析正逐渐应用于揭示美洲南瓜基因调控机理的研究中。实时荧光定量RT-PCR(real-timequantitativereversetranscriptionPCR,qRT-PCR)具有定量准确、灵敏度高和高通量等特点,已被广泛应用于基因的表达分析。qRT-PCR关键步骤是选择合适的稳定内参基因进行校正和标准化。微管蛋白(tubulin)是细胞的一种骨架蛋白,参与细胞内胞质环流、形状维持、运动、分裂、分化、物质运输、信号转导以及极性建成等重要 ...
【技术保护点】
1.一种美洲南瓜TUA基因,其特征在于,该基因碱基序列如SEQ ID NO.1 所示。
【技术特征摘要】
1.一种美洲南瓜TUA基因,其特征在于,该基因碱基序列如SEQIDNO.1所示。2.一种美洲南瓜实时定量PCR引物,其特征在于,以权利要求1中所述内参基因的核苷酸序列为基础,遵循实时荧光定量PCR引物设计的原则设计出一对荧光定量特异引物,该对荧光定量特异引...
【专利技术属性】
技术研发人员:朱海生,李永平,刘建汀,陈敏氡,王彬,温文旭,林珲,张前荣,温庆放,
申请(专利权)人:福建省农业科学院作物研究所,
类型:发明
国别省市:福建,35
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