靶向PD-L1的T和NKT混合细胞、制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及靶向PD‑L1的T和NKT混合细胞、制备方法和应用。本发明专利技术合成了嵌合抗原受体anti‑PDL1‑CD8‑41BB‑CD3ξ，其序列如SEQ ID NO.1所示，将其病毒质粒感染PMBC细胞，培养得到表达anti‑PDL1‑CD8‑41BB‑CD3ξ的T和NKT混合细胞，实验表明，表达anti‑PD‑L1‑CD8‑41BB‑CD3ξ的T+NKT混合细胞对PDL1+细胞具有较强的杀伤能力，且比单独的表达anti‑PD‑L1‑CD8‑41BB‑CD3ξ的T细胞对PDL1+细胞杀伤能力要强。

T and NKT hybrid cells targeting PD-L1 and their preparation and Application

The invention relates to T and NKT mixed cells targeting PD L1, preparation methods and applications. The chimeric antigen receptor anti_PDL1_CD8_41BB_CD3_was synthesized. The sequence of the chimeric antigen receptor anti_PDL1_CD8_CD3, as shown in SEQ ID NO.1, infected PMBC cells with its virus plasmid, and cultured into T and NKT mixed cells expressing anti_PDL1_CD8_CD3_CD3_. Experiments showed that anti_PD_L1_CD8 CD8 NKT mixed cells expressing anti_PDL+ 1+ cells have stronger killing ability than T cells expressing anti_PD_L1_CD8_41BB_CD3ZE alone.

【技术实现步骤摘要】
靶向PD-L1的T和NKT混合细胞、制备方法和应用
本专利技术涉及生物医药领域，特别是涉及靶向PD-L1的T和NKT混合细胞、制备方法和应用。
技术介绍
程序性细胞死亡-配体1(programmedcelldeathprotein-ligant-1)，也称为表面抗原分化簇274(clusterofdifferentiation274，CD274)或B7同源体(B7homolog1，B7-H1)，是人类体内的一种蛋白质，由CD274基因编码。PD-L1是一种分子量为40kD的一型跨膜蛋白，与T细胞表面的程序性细胞死亡蛋白PD-1(programmedcelldeathprotein-1)或B7-H1结合，传递抑制信号，减少T细胞增殖，诱发凋亡，从而抑制T细胞的功能。很多肿瘤细胞通过高表达PD-L1，使得T细胞在遇到肿瘤细胞的时候被抑制，造成免疫耐受的结果，无法有效识别肿瘤细胞及在肿瘤微环境内有效累积是造成免疫系统失灵的重要原因，因此围绕肿瘤微环境的组成成分进行研究，对PD-1/PD-L1抑制性通路有效封闭，对于临床实践及药物应用都有重要的意义。嵌合抗原受体(ChimericAntige本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.嵌合抗原受体anti‑PDL1‑CD8‑41BB‑CD3ξ，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.嵌合抗原受体anti-PDL1-CD8-41BB-CD3ξ，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.嵌合抗原受体anti-PDL1-CD8-41BB-CD3ξ的表达载体，由权利要求1所述的嵌合抗原受体anti-PDL1-CD8-41BB-CD3ξ连接于哺乳动物的慢病毒表达载体而得到。3.根据权利要求1所述的表达载体，所述慢病毒表达载体为pCDH-MSCV-EF1-GFP或pLVX-EF1。4.嵌合抗原受体anti-PDL1-CD8-41BB-CD3ξ的表达细胞，为T和NKT混合细胞，由权利要求2或3所述的嵌合抗原受体anti-PDL1-CD8-41BB-CD3ξ的表达载体感染PBMC细胞后经培养而得到。5.根据权利要求4所述的的表达细胞，所述混合细胞中99.6％的细胞为...

【专利技术属性】
技术研发人员：张嵘，焦顺昌，周子珊，解佳森，王海燕，
申请(专利权)人：北京鼎成肽源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11