一种青蒿素类似物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种青蒿素类似物的制备方法。本发明专利技术的一种青蒿素类似物的制备方法，包括以下步骤：（1）将蒿类植物原料以石油醚提取，得到植物粗提物；（2）将所述植物粗提物进行层析，分离得到青蒿素类似物。本发明专利技术的青蒿素类似物的制备方法采用工业层析装置分离青蒿素，可以有效地分离青蒿素，且分离收率高，所需成本低，可用于低含药量的生药提取，硅胶可以回收重复利用在活化，还可以用于工业化生产；利用石油醚为提取溶剂，利用层析技术分离青蒿素类物质，从臭蒿等蒿类植物中制备出青蒿素类似物，为青蒿素类似物的生物合成和生产提供了有力的条件。

【技术实现步骤摘要】
一种青蒿素类似物的制备方法
本专利技术涉及农药
，尤其涉及一种青蒿素类似物的制备方法。
技术介绍
青蒿素及其类似物不仅有抗疟疾作用，还具有抗病毒、抗真菌、抗癌和抗炎等特性。青蒿素及其类似物具有广谱抗癌性，药理作用范围大，且毒副作用小，还可以与多种药物一起作用，起到协调、增效的作用。目前青蒿素主要是从天然植物中提取出来，其工业全合成和半合成的路线还不能进行工业生产。青蒿素提取方法主要有乙醇法和溶剂汽油法,存在提取成本高、提取时间长等问题。蒿属植物，在我国广泛分布。从黄花蒿中可以提取出青蒿素；臭蒿为民间中草药，主要作用是清湿热，消肿毒，现藏医常用。艾蒿和臭蒿茎叶无水乙醇提取物对于烟草链格孢菌和烟草疫霉有着良好的抑真菌活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，针对现有技术的上述不足，提出一种提取率高，提取工艺简单的青蒿素类似物的制备方法。本专利技术的一种青蒿素类似物的制备方法，包括以下步骤：（1）将蒿类植物原料以石油醚提取，得到植物粗提物；（2）将所述植物粗提物进行层析，分离得到青蒿素类似物。优选的，步骤（1）之前还包括将蒿类植物原料烘干后粉碎至100～200目粒径的步骤。优选的，所述步骤（1）中植物原料与石油醚的物料比为1：5～30(g/mL)。优选的，所述步骤（1）中提取先在超声分散下进行，再在磁力搅拌下进行，过滤得提取液；所述超声处理10～40min；所述磁力搅拌为恒温磁力搅拌，搅拌温度为40～60℃，搅拌转速为400～600r/min，搅拌时间为60～90min。优选的，将提取液蒸干后加入无水乙醇溶解过滤，将滤液30℃～50℃旋蒸，蒸干后得到植物粗提物。优选的，所述步骤（2）中层析分为第一次层析和第二次层析，第二次层析以第一次层析所得层析物为样品进行干法上样；所述第一次层析所得层析物进行第二次层析前先采用薄层层析分析。层析用硅胶湿法装柱，取植物粗提物干法上样。加入洗脱剂洗脱，分别收集洗脱液，采用薄层层析分析，合并有相同Rf值洗脱液，测定各合并组分的抗菌活性；选择抗菌活性强的组分进一步采用硅胶凝胶柱层析分离，用洗脱剂进行洗脱，分别收集洗脱液，采用薄层层析分析，合并相同Rf值洗脱液，测定各合并组分的抗菌活性，得到抗菌活性好的青蒿素类似物。优选的，所述第二次层析使用硅胶湿法装柱，所述硅胶为200～300目，所述硅胶与待层析物的质量比为10:1～2；洗脱剂为石油醚、乙酸乙酯或无水乙醇中一种或者混合物。优选的，所述第一次层析使用的洗脱液为石油醚与乙酸乙酯的混合物，石油醚与乙酸乙酯的体积比为10～20:1，洗脱剂体积与硅胶体积为3:1～3。优选的，所述第二次层析使用硅胶湿法装柱，所述硅胶为300～400目；所述硅胶与待层析物的质量比为10:1～2；洗脱剂为石油醚、乙酸乙酯或无水乙醇中一种或者混合物。洗脱剂体积与硅胶体积为3:1～3。优选的，所述蒿类植物为臭蒿。本专利技术的青蒿素类似物的制备方法采用工业层析装置分离青蒿素，可以有效地分离青蒿素，且分离收率高，所需成本低，可用于低含药量的生药提取，硅胶可以回收重复利用在活化，还可以用于工业化生产；利用石油醚为提取溶剂，利用层析技术分离青蒿素类物质，从臭蒿等蒿类植物中制备出青蒿素类似物，为青蒿素类似物的生物合成和生产提供了有力的条件；利用超声波等前处理的方法可以提高青蒿素的提取率，超声波提取具有节约时间、能量、溶剂，提高提取率，提取工艺简单等优点，还避免了高温对青蒿素及其类似物有效成分的破坏。从臭蒿等蒿类植物中提取出的青蒿素类似物具有良好的抗真菌活性，作为生物源农药具有良好的应用前景。附图说明图1实施例4中含有青蒿素类似物的培养液在显微镜10×10下的照片；图2实施例4中对照组培养液在显微镜10×10下的照片。具体实施方式以下是本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术的技术方案作进一步的描述，但本专利技术并不限于这些实施例。实施例1：本实施例包括以下步骤：（1）预处理：蒿类植物茎叶40℃烘干，粉碎，然后过100目筛子，得植物粉末1000g。（2）提取：植物粉末1000g与30L石油醚混合。封口膜封口后，超声波（50℃，100W，40Hz）超声处理20min，再经过恒温磁力搅拌器50℃、500r/min处理80min，经过抽滤得到提取液，将滤渣重提，合并两次滤液，40℃蒸干，得到植物粗提物。（3）层析：第一次层析分离用的硅胶为200目，湿法装柱，植物粗提物质量：硅胶质量=1：10，干法上样加入已配好的石油醚：乙酸乙酯(8：1，7：1，5：1，4：1，3：1，2：1，1：1，1：2）和无水乙醇依次洗脱，每个梯度洗脱剂用量等同于装柱体积即硅胶体积，分别收集洗脱液，采用薄层层析分析，合并有相同Rf值洗脱液，测定各合并组分的抗菌活性；第二次层析分离用的硅胶为300目，湿法装柱，植物粗提物质量：硅胶质量=1：10，选择第一次层析分离抗菌活性强的组分干法上样，用石油醚、石油醚：乙酸乙酯（20:1，10:1）分别为洗脱剂进行洗脱，洗脱剂用量为8倍装柱体积即硅胶体积，分别收集洗脱液，采用薄层层析分析，合并有相同Rf值洗脱液，测定各合并组分的抗菌活性。用此方法提取植物粉末1000g，可以得到33.8g植物粗提物，最终得到0.54g青蒿素类似物。实施例2本实施例包括以下步骤：（1）预处理：臭蒿植物茎叶40℃烘干，粉碎，过100目筛子，得植物粉末2000g。（2）提取：植物粉末2000g与10L石油醚混合。封口膜封口后，超声波（50℃，100W，40Hz）超声处理20min，再经过恒温磁力搅拌器50℃、500r/min处理80min，经过抽滤得到提取液，将滤渣重提，合并两次滤液，40℃蒸干，得到臭蒿粗提物。（3）层析：第一次层析分离用的硅胶为300目，湿法装柱，植物粗提物质量：硅胶质量=1：10，干法上样加入已配好的石油醚：乙酸乙酯(8：1，7：1，5：1，4：1，3：1，2：1，1：1，1：2）和无水乙醇依次洗脱，每个梯度洗脱剂用量等同于装柱体积，分别收集洗脱液，采用薄层层析分析，合并有相同Rf值洗脱液，测定各合并组分的抗菌活性；第二次层析分离用的硅胶为400目，湿法装柱，植物粗提物质量：硅胶质量=1：10，选择第一次层析分离抗菌活性强的组分干法上样，用石油醚、石油醚：乙酸乙酯（20:1，10:1）为洗脱剂进行洗脱，洗脱剂用量为8倍装柱体积，分别收集洗脱液，采用薄层层析分析，合并有相同Rf值洗脱液，测定各合并组分的抗菌活性。用此方法提取植物粉末2000g，可以得到48.86g植物粗提物，最终得到0.78g青蒿素类似物。实施例3本实施例包括以下步骤：（1）预处理：艾蒿植物茎叶40℃烘干，粉碎，过100目筛子，得植物粉末2000g。（2）提取：植物粉末2000g与10L石油醚混合。封口膜封口后，超声波（50℃，100W，40Hz）超声处理20min，再经过恒温磁力搅拌器50℃、500r/min处理80min，经过抽滤得到提取液，将滤渣重提，合并两次滤液，40℃蒸干，得到臭蒿粗提物。（3）层析：第一次层析分离用的硅胶为300目，湿法装柱，植物粗提物质量：硅胶质量=1：10，干法上样加入已配好的石油醚：乙酸乙酯(8：1，7：1，5：1，4：1，3：1，2：1，1：1，1：2）和无水乙醇依次洗脱，每个梯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青蒿素类似物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将蒿类植物原料以石油醚提取，得到植物粗提物；（2）将所述植物粗提物进行层析，分离得到青蒿素类似物。

【技术特征摘要】
1.一种青蒿素类似物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）将蒿类植物原料以石油醚提取，得到植物粗提物；（2）将所述植物粗提物进行层析，分离得到青蒿素类似物。2.如权利要求1所述的一种青蒿素类似物的制备方法，其特征在于：步骤（1）之前还包括将蒿类植物原料烘干后粉碎至100～200目粒径的步骤。3.如权利要求1所述的一种青蒿素类似物的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中植物原料与石油醚的物料比为1：5～30(g/mL)。4.如权利要求1所述的一种青蒿素类似物的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中提取先在超声分散下进行，再在磁力搅拌下进行，过滤得提取液；所述超声处理10～40min；所述磁力搅拌为恒温磁力搅拌，搅拌温度为40～60℃，搅拌转速为400～600r/min，搅拌时间为60～90min。5.如权利要求4所述的一种青蒿素类似物的制备方法，其特征在于：将提取液蒸干后加入无水乙醇溶解过滤，将滤液30℃～50℃旋蒸，蒸干后得到植物粗提物。6.如权利要求1所述的一种青...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡国元，徐杰，李伟伟，程传可，张芊，
申请(专利权)人：武汉工程大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42