一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法，具体包括以下步骤：1）配制供试品溶液；2）配制对照溶液；3）色谱条件：使用高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，选用适当的有机溶剂和缓冲溶液为流动相，梯度洗脱，使用自身对照法计算各有关物质的含量。本法专属性强、重复性好，准确度高，能保证利培酮有关物质的可控性；能将可能的降解杂质和可能的残留中间体与主成分有效分开，且灵敏度高，可应用于利培酮口服溶液的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法
本专利技术涉及一种检测方法，尤其涉及一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法。
技术介绍
有关物质与药品质量、安全性及疗效密切相关，有关物质的存在可能会降低药物的疗效，甚至引起毒副作用，因此，必须通过适当的检测分析方法控制药物中有关物质的种类和含量，确保药品质量。利培酮是新一代的非典型抗精神病药，化学名称：3-[2-[4-(6-氟-1,2-苯并异噁唑-3-基)-1-哌啶基]乙基]-6,7,8,9-四氢-2-甲基-4H-吡啶并[1,2-α]嘧啶-4-酮。经检索各国药典对利培酮口服溶液有关物质检测方法均有收载，实验室研究如下，色谱图见附图1：图中由上至下依次是专利技术项方法、EP9.0方法、CP2015方法和进口药品注册标准方法得到的谱图曲线，结果显示EP9.0药典和CP2015不能对杂质进行有效的分离，进口药品注册标准中方法可对杂货进行有效的分离，但只能检测出有限的杂质量，对杂质的控制不严格，不能保证患者用药的安全性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法，为了解决现有检测方法不能对杂货进行有效的分离，对杂质的控制不严格，不能保证患者用药的安全性的问题。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：本专利技术提供一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法，具体包括以下步骤：1）精密量取待测利培酮口服溶液置于量瓶中，用乙腈与乙酸铵的混合溶液稀释至刻度，并用三乙胺调节pH值，摇匀，得到供试品溶液；2）精密量取供试品溶液置量瓶中，用乙腈与乙酸铵的混合溶液稀释至刻度，并用三乙胺调节pH值，摇匀，得到对照溶液；3）色谱条件：使用高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，选用适当的有机溶剂和缓冲溶液为流动相，梯度洗脱，所述有机溶剂为乙腈，所述缓冲溶液为乙酸铵水溶液，且乙酸铵浓度按体积比为0.20%～0.30%，并用三乙胺调节pH值至6.0～8.0，梯度洗脱程序为0～2min，乙腈体积比例为由15%变为20%；2～20min，乙腈体积比例从20%变为30%；20～25min，乙腈体积比例从30%变为50%；25～40min，乙腈体积比例为50%；40～40.1min，乙腈体积比例从50%变为15%；40.1～50min，乙腈体积比例为15%；精密量取相同量的对照溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪中，进样并记录色谱图，使用自身对照法计算各有关物质的含量。优选地，利培酮口服溶液有关物质为利培酮反式氧化物、利培酮顺式氧化物、9-羟基利培酮、5-氟利培酮、6-甲基利培酮、利培酮顺式氮氧化物和双环利培酮。优选地，步骤3）中检测波长为255～265nm，优选条件为260nm；流速为0.9～1.1ml/min，优选条件为1.0ml/min。优选地，步骤3）中精密量取相同量的对照溶液和供试品溶液，进样量为10～50μl，优选条件为20μl。优选地，步骤3）中缓冲溶液中乙酸铵浓度体积比优选条件为0.25%，pH值的优选条件为7.0。优选地，步骤1）中精密量取待测利培酮口服溶液适量，用乙腈与0.25%乙酸铵溶液体积比为20：80稀释，用三乙胺调节pH值至7.00，配制成含利培酮浓度为0.25～0.75mg/ml的供试品溶液，优选条件为0.5mg/ml。优选地，配制成含利培酮浓度为0.5mg/ml的供试品溶液。优选地，步骤2）用乙腈与0.25%乙酸铵溶液体积比为20：80稀释，用三乙胺调节pH值至7.00，摇匀，得到对照溶液。本专利技术针对利培酮合成工艺以及降解情况，鉴定了7个杂质，分别为利培酮反式氧化物（EP杂质A），利培酮顺式氧化物（EP杂质B），9-羟基利培酮（EP杂质C），5-氟利培酮（EP杂质D），6-甲基利培酮（EP杂质E），利培酮顺式氮氧化物和双环利培酮。化学式分别如下：EP杂质AEP杂质BEP杂质CEP杂质DEP杂质E双环利培酮利培酮顺式氮氧化物本专利技术经过对缓冲溶液组成、梯度洗脱程序等条件进行筛选，兼顾7个有关物质分离的需要，最终建立了适当的有关物质分析方法，将分析周期控制在50min，主成分与各有关物质之间、各有关物质之间均能达到基线分离，达到了上述专利技术的目的。本专利技术有益效果：本专利技术项下方法和进口药品注册标准中方法可对杂货进行有效的分离，但在对同一样品检测过程中，专利技术项下方法的杂质检测能力明显高于进口药品注册标准项下方法（色谱图见附图1）；对FFB3I00批比利时杨森公司生产的利培酮口服溶液进行有关物质检测（色谱图见附图2），图中上曲线为专利技术项方法得到的，下曲线为进口药品注册标准方法得到的，其中专利技术项方法检测出来总杂为0.19%，而进口药品注册标准检测出来总杂为0.017%；根据ICH指导原则规定，专利技术项方法对杂质的检测能力高于进口药品注册标准方法，对杂质的控制更加严格，更能保证患者用药的安全性，故选择本专利技术项下的检测方法较为适宜。该方法采用高效液相色谱法，以十八烷基键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，选用适当的有机相和缓冲溶液为流动相，采用梯度洗脱，有效完成利培酮及其相关杂质的分离情况，同时对比国内外相关标准，显著提升了检测能力，保证杂质的有效检出。本法专属性强、重复性好，准确度高，能保证利培酮有关物质的可控性；能将可能的降解杂质和可能的残留中间体与主成分有效分开，且灵敏度高，可应用于利培酮口服溶液的质量控制。附图说明图1为利培酮各药典杂质分离情况对比色谱图。图2为FFB3I00批利培酮口服溶液检测对比色谱图。图3为利培酮有关物质定位试验对比色谱图。具体实施方式为了加深对本专利技术的理解，下面将结合附图和实施例对本专利技术作进一步详细描述，本实施例仅用于解释本专利技术，并不对本专利技术的保护范围构成限定。色谱方法的方法学验证实施例1.有关物质定位试验配制利培酮样品溶液、各有关物质对照溶液、利培酮与各有关物质的混合溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见表1，图谱见附图3，谱图中由上至下的曲线依次为双环利培酮、顺式氮氧化物、EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C、EP杂质D、EP杂质E和利培酮口服溶液。表1利培酮与各杂质分离参数结果结果显示：利培酮有关物质之间都能达到良好的分离。实施例2.检测限、定量限试验采用信噪比法测定利培酮及其各有关物质的检测限和定量限。分别配制利培酮及其各有关物质的贮备液，稀释至一定浓度并进样，计算峰高与噪声的比值(信噪比)，其信噪比（S/N）约为10的样品检测量即为定量限，信噪比（S/N）约为3的样品检测量即为检测限，结果见表2。表2定量限与检测限试验结果结果显示：本方法对各有关物质的响应高，能准确控制各有关物质的含量。实施例3.标准曲线精密称取利培酮及其7个有关物质，用乙腈-0.25%乙酸铵溶液（用三乙胺调节pH值至7.00）（20：80）稀释，配制成7份不同浓度的溶液。分别进样并记录色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得到利培酮及其各有关物质的线性回归方程，结果见表3。表3标准曲线实验结果结果显示：在本方法下，利培酮及其7个有关物质在一定浓度范围内，均能呈现良好的线性。实施例4.准确度精密量取适量利培酮口服溶液，用乙腈与0.25%乙酸铵溶液（用三乙胺调节pH值至7.00）（乙腈与0.25%乙酸铵体积比为20：80）稀释，配制成含本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1）精密量取待测利培酮口服溶液置于量瓶中，用乙腈与乙酸铵的混合溶液稀释至刻度，并用三乙胺调节pH 值，摇匀，得到供试品溶液；2）精密量取供试品溶液置量瓶中，用乙腈与乙酸铵的混合溶液稀释至刻度，并用三乙胺调节pH 值，摇匀，得到对照溶液；3）色谱条件：使用高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，选用适当的有机溶剂和缓冲溶液为流动相，梯度洗脱，所述有机溶剂为乙腈，所述缓冲溶液为乙酸铵水溶液，且乙酸铵浓度按体积比为0.20%～0.30%，并用三乙胺调节pH值至6.0～8.0，梯度洗脱程序为0～2min，乙腈体积比例为由15%变为20%；2～20min，乙腈体积比例从20%变为30%；20～25min，乙腈体积比例从30%变为50%；25～40min，乙腈体积比例为50%；40～40.1min，乙腈体积比例从50%变为15%；40.1～50min，乙腈体积比例为15%；精密量取相同量的对照溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪中，进样并记录色谱图，使用自身对照法计算各有关物质的含量。

【技术特征摘要】
1.一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1）精密量取待测利培酮口服溶液置于量瓶中，用乙腈与乙酸铵的混合溶液稀释至刻度，并用三乙胺调节pH值，摇匀，得到供试品溶液；2）精密量取供试品溶液置量瓶中，用乙腈与乙酸铵的混合溶液稀释至刻度，并用三乙胺调节pH值，摇匀，得到对照溶液；3）色谱条件：使用高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，选用适当的有机溶剂和缓冲溶液为流动相，梯度洗脱，所述有机溶剂为乙腈，所述缓冲溶液为乙酸铵水溶液，且乙酸铵浓度按体积比为0.20%～0.30%，并用三乙胺调节pH值至6.0～8.0，梯度洗脱程序为0～2min，乙腈体积比例为由15%变为20%；2～20min，乙腈体积比例从20%变为30%；20～25min，乙腈体积比例从30%变为50%；25～40min，乙腈体积比例为50%；40～40.1min，乙腈体积比例从50%变为15%；40.1～50min，乙腈体积比例为15%；精密量取相同量的对照溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪中，进样并记录色谱图，使用自身对照法计算各有关物质的含量。2.根据权利要求1所述的一种利培酮口服溶液有关物质的检测方法，其特征在于：所述利培酮口服溶液有关物质为利培酮反式氧化物、利培酮顺式氧化物、9-羟基利培酮、5-氟利培酮、6-甲基利培酮、利培酮...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯书影，韦勇，申团结，孟广东，
申请(专利权)人：安徽新世纪药业有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34