丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，该方法包括步骤：提取、上样液制备和大孔吸附树脂柱谱纯化。具体方法为：取丹参茎叶粉碎过筛，加8倍量的体积浓度50％乙醇，回流提取3次，每次1h，过滤，合并滤液，得提取液；将所述提取液减压浓缩至浓度为1.0g·ml‑1，即得上样液；将所述上样液上样AB‑8型大孔吸附，用3‑4BV水除杂后，再用3BV的40％(v/v)乙醇洗脱；减压干燥至粉末或浸膏。本发明专利技术提供丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，通过大量实验筛选得到最佳的工艺，可提高丹参茎叶的经济价值，不仅具有变废为宝的环保价值，且具有很好的应用前景。

Extraction and purification of phenolic acids and flavonoids from stems and leaves of Salvia miltiorrhiza

The invention discloses a method for extraction and purification of phenolic acids and flavonoids in the stems and leaves of Salvia miltiorrhiza. The method includes steps: extraction, preparation of sample liquid and purification of macroporous adsorption resin column spectrum. The specific method is: take the stem and leaf of Salvia miltiorrhiza to smash the sieve, add 8 times the volume concentration of 50% ethanol, reflux and extract 3 times, each time 1H, filter, and combine filtrate to get the extract. The extracted solution is concentrated to a concentration of 1.0g. Ml, 1, that is, the upper sample is adsorbed on the above sample AB 8 type, and uses 3 4BV water to remove the impurity. Then, 40% (v/v) ethanol was removed from 3BV and dried to powder or extract. The invention provides a method for extraction and purification of phenolic acids and flavonoids from the stems and leaves of Salvia miltiorrhiza. Through a large number of experiments, the optimum technology is obtained. It can improve the economic value of the stem and leaf of Salvia miltiorrhiza, not only has the environmental value of changing the waste into treasure, but also has a good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法
本专利技术属于提取工艺
，具体涉及一种丹参茎叶中提取纯化酚酸类及黄酮类成分的方法。
技术介绍
中药丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎，其味苦，性微寒，具有活血调经、祛瘀止痛、除烦安神、凉血消痈等功效，用于胸痹心痛，热痹疼痛，痛经经闭，疮疡肿痛。以丹参为主药的复方制剂如复方丹参滴丸、复方丹参片、丹参注射液等在临床上广泛应用于心脑血管疾病的治疗。随着临床药用范围的扩大，丹参药材需求量的不断增长，采收其药用部位的同时也产生了大量的丹参茎叶等非药用部位，对其进行开发利用可减少资源浪费，提高丹参植物资源的利用效率。丹参茎叶中主含酚酸类、黄酮类、三萜皂苷类及香豆素类成分，其中酚酸类成分是丹参茎叶与丹参药用部位相似的成分。丹酚酸类成分是一类含有酚羟基的有机酸类化合物。多数丹酚酸类成分抗氧化作用强度高于维生素C、维生素E、甘露醇，是目前已知的抗氧化作用最强的天然产物之一，具有抗血栓、改善微循环、保肝等药理活性，对心脑血管疾病具有良好的治疗作用。黄酮类成分如异槲皮苷、芦丁等具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗菌和抗肿瘤等药理作用。然而，目前的研究多偏重于对丹参药用部位中的化合物进行分离纯化，未对丹参茎叶中的总酚酸及黄酮类成分进行提取纯化，这使得丹参茎叶中活性成分不能得到同时利用，丹参的资源利用价值得不到充分体现。因此在现有研究基础上，系统开展丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分纯化制备方法及应用开发研究，以拓展丹参茎叶资源的利用途径，促进丹参药用生物资源的循环利用。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的在于提供一种从丹参茎叶获得高纯度酚酸类及黄酮类成分的提取与纯化方法，为实现丹参茎叶的资源化利用与产业化开发提供技术支撑。技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案包括以下步骤：丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，包括以下步骤：(1)提取：取丹参茎叶药材粉碎过筛，加8-20倍量体积浓度30-90％的乙醇，提取1-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液，得提取液，备用；(2)上样液制备：将步骤(1)所得提取液，减压浓缩至浓度为0.25-1.0g/mL作为上样液；(3)纯化：将步骤(2)所得上样液，上大孔吸附树脂，先用水洗脱除杂，然后用乙醇洗脱，得乙醇洗脱物，减压干燥至粉末或浸膏，即得总丹参茎叶酚酸及黄酮类成分。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，步骤(3)所述丹参茎叶与树脂用量比为0.5g/g，用3-4大孔树脂柱体积水除杂后，再用1-6大孔树脂柱体积的10-90％乙醇洗脱，减压干燥至粉末或浸膏，即得总丹参茎叶酚酸及黄酮类成分。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，步骤(1)提取过程中，加入的丹参茎叶药材的重量与乙醇的体积比为1：8g/mL。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，步骤(1)所用乙醇浓度为50％。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，步骤(1)提取方法为回流提取法，提取次数为3次，每次1h。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，将步骤(1)所得提取液，减压浓缩至浓度为1.0g/mL作为上样液。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，步骤(3)所述的大孔吸附树脂型号为AB-8型大孔吸附树脂。作为优选方案，以上所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，洗脱剂乙醇的体积浓度为40％，洗脱剂的用量为3倍大孔吸附树脂柱体积。有益效果：本专利技术与现有技术相比具有如下优点：本专利技术的提取方法可有效地提高丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取效率，降低生产成本；且本专利技术利用丹参植物的地上茎叶部分为原料，综合利用丹参的非药用部位，减少资源浪费，提高丹参植物利用效率。本专利技术提供的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的制备及纯化方法，制备工艺设计合理，可操作性强，成本低廉且制备得到的有效部位中活性成分含量高，提高了丹参茎叶的经济价值，拓宽了其应用领域。附图说明图1不同洗脱溶剂对丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的洗脱率考察；图2AB-8型大孔树脂对丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的动态吸附曲线；图3丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的洗脱曲线；图4丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分测定色谱图具体实施方式本专利技术提供丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比及其结果仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分提取工艺优选(1)丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分提取方法的优选取丹参茎叶样品分为若干份，适当粉碎后，称重，分别采用超声提取法、乙醇回流法、乙醇回流+水煎煮法提取。过滤，取上清液，以液相色谱法测定提取液中酚酸类及黄酮类成分含量。结果表明，乙醇回流法对指标成分的提取率最高，故选择乙醇回流法提取丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分。(2)丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分提取单因素的优选取丹参茎叶样品分为若干份，适当粉碎后，称重，以水及不同乙醇浓度(30％、50％、60％、70％、90％)提取，加入料液比(1:8、1:10、1:12、1:15、1:20)的提取溶剂，提取(1h、1.5h、2h、2.5h、3h)，提取1次、2次、3次、4次。过滤，取上清液，以液相色谱法测定提取液中酚酸类及黄酮类成分含量。优选因素指标结果见表1。表1单因素分析(3)丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分提取正交优选以提取溶剂、料液比、提取时间、提取次数为考察因素，选取单因素优选的因素水平，通过正交试验确定最优提取方案本。以丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分总含量及浸膏得率为评价指标，运用综合加权评分法进行数据处理。设定满分为100分，其中指标成分总含量权重系数0.9，浸膏得率权重系数0.1，在此基础上进行总加权评分，以综合评分值对正交试验结果进行方差分析。综合评分＝总含量/MAX(总含量)×0.9×100+浸膏得率/MAX(浸膏得率)×0.1×100。因素水平见表2，试验结果见表3，方差分析见表4。表2正交试验因素与水平表3丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分提取工艺正交试验设计及结果表4正交试验方差分析注：f＝2，F0.05(2,2)＝19.00，F0.01(2,2)＝99.00正交试验结果表明，以极差最小的B因素为误差项进行方差分析，各因素作用主次为提取次数(D)>提取时间(C)>乙醇浓度(A)>料液比(B)，影响指标成分提取的主要因素为提取次数(P<0.01)、乙醇浓度(P<0.05)、提取时间(P<0.05)。极差分析结果显示，料液比对提取率的影响最小且各水平间无明显差异。结合各因素的K值并考虑生产成本问题，确定丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分最佳提取工艺为A1B1C1D3，即乙醇浓度50％，料液比为1:8，提取1h，提取3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取：取丹参茎叶药材粉碎过筛，加8‑20倍量体积浓度30‑90％的乙醇，提取1‑3次，每次1‑3h，过滤，合并滤液，得提取液，备用；(2)上样液制备：将步骤(1)所得提取液，减压浓缩至浓度为0.25‑1.0g/mL作为上样液；(3)纯化：将步骤(2)所得上样液，上大孔吸附树脂，先用水洗脱除杂，然后用乙醇洗脱，得乙醇洗脱物，减压干燥至粉末或浸膏，即得总丹参茎叶酚酸及黄酮类成分。

【技术特征摘要】
1.丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取：取丹参茎叶药材粉碎过筛，加8-20倍量体积浓度30-90％的乙醇，提取1-3次，每次1-3h，过滤，合并滤液，得提取液，备用；(2)上样液制备：将步骤(1)所得提取液，减压浓缩至浓度为0.25-1.0g/mL作为上样液；(3)纯化：将步骤(2)所得上样液，上大孔吸附树脂，先用水洗脱除杂，然后用乙醇洗脱，得乙醇洗脱物，减压干燥至粉末或浸膏，即得总丹参茎叶酚酸及黄酮类成分。2.根据权利要求1所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方法，其特征在于，步骤(3)所述丹参茎叶与树脂用量比为0.5g/g，用3-4大孔树脂柱体积水除杂后，再用1-6大孔树脂柱体积的10-90％乙醇洗脱，减压干燥至粉末或浸膏，即得总丹参茎叶酚酸及黄酮类成分。3.根据权利要求1所述的丹参茎叶中酚酸类及黄酮类成分的提取纯化方...

【专利技术属性】
技术研发人员：宿树兰，段金廒，郭盛，钱大玮，
申请(专利权)人：南京弘典医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32