咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法技术

中药特征图谱是一种较全面的反映中药材或复方制剂所包含的化学信息的分析方法，本发明专利技术公开了咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法，基于高效液相色谱法构建了咽喉清口含片的特征图谱，用于咽喉清口含片的质量控制，主要用于鉴别和评价该制剂以及半成品的真伪、质量均一性及稳定性，本发明专利技术得到的咽喉清口含片的特征图谱，能够综合有效地监控咽喉清口含片的质量，具有表征全面，重复性好，稳定性佳的特点。

【技术实现步骤摘要】
咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法
本专利技术涉及中药领域，尤其是涉及一种咽喉清口含片特征图谱、构建方法、应用和质量检测方法。
技术介绍
长时间以来，对于中药材、饮片及中药制剂的质量控制，主要以单成分作为指标进行考察跟踪，然而对于中药而言，其物质基础较为复杂，其药效的发挥，亦是基于这种复杂体系的组分群而实现，采用单一成分为指标进行质量控制，未能完全体现其复杂组成的物质基础，未能体现中药的综合性和整体性，容易失之偏颇。中药色谱特征图谱是一种综合的、可量化的鉴定中药材及中药制剂的手段，其采用色谱分离技术，可较全面的表征中药中的化学成分，从而将质量控制指标从单一成分提高为综合性的组分群，更能体现中药的性质。中药色谱特征图谱主要用于鉴别药品真伪,以及评价原药材、半成品及制剂质量的均一性和稳定性。随着人们对药品质量要求的不断提高，中药色谱特征图谱得到越来越多应用。咽喉清口含片为深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院院内制剂，并已获得国家中药六类新药临床研究批件。该制剂由金银花、玄参、青果、胖大海、诃子、罗汉果、桔梗、射干、山豆根、金果榄、锦灯笼、川贝母、薄荷脑、薄荷油和冰片组成，具有清热解毒、化痰利咽的功能，临床上用于治疗外感风热型急性咽炎。咽喉清口含片组方药味较多，药效物质基础复杂，目前咽喉清口含片的质量控制方法和质量控制标准有待于进一步完善。
技术实现思路
为解决现有技术存在问题，本专利技术的目的是提供一种咽喉清口含片的特征图谱及其构建方法。本专利技术的另一个目的是提供上述咽喉清口含片的特征图谱咽喉清口含片质量检测中的应用以及质量检测方法。本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术提供一种咽喉清口含片的特征图谱的构建方法，包含以下步骤：(1)制备供试品溶液：取咽喉清口含片研碎，加入20～50体积份的甲醇得到每1mL含0.04～0.1g所述咽喉清口含片的溶液，提取后过滤取滤液蒸干，加入20体积份的水，后加入10～30体积份的乙酸乙酯进行萃取，取乙酸乙酯层蒸干，加入甲醇稀释至5～10体积份，过滤后取滤液作为供试品溶液；制备对照品溶液：称取绿原酸，加入甲醇制得绿原酸对照品溶液；(2)分别取所述供试品溶液和所述对照品溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，记录0-35min的色谱图，将10批次润喉清含片的HPLC色谱图导入国家药典委员颁布的“中药色谱指纹图相似度评价系统(2012版)”，选取“时间窗”宽度为0.1min，经过多点矫正和数据匹配生成色谱特征图谱共有模式，并以色谱图中绿原酸为参照峰，计算各色谱峰相对保留时间；所述色谱分析的色谱条件是：色谱分离柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为水-乙腈洗脱液；采用梯度洗脱方式：0～5min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％，5～28min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％～57％，28～28.01min的洗脱液中乙腈体积百分含量为57％～13％，28.01～35min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％；检测波长为全波长扫描，2D通道选择260nm，柱温25～30℃，流速1.0mL，进样量10μL。本专利技术还提供一种咽喉清口含片的特征图谱，采用上述的构建方法获得，所述特征谱图具有20个特征峰，以5号峰所代表的绿原酸为参照峰，各个特征峰相对保留时间和相对标准偏差为：1号峰：相对保留时间0.44±0.0029，相对标准偏差为0.66％；2号峰：相对保留时间0.49±0.0022，相对标准偏差为0.44％；3号峰：相对保留时间0.65±0.0010，相对标准偏差为0.16％；4号峰：相对保留时间0.78±0.0005，相对标准偏差为0.07％；5号峰：相对保留时间1.00，相对标准偏差为0.28％；6号峰：相对保留时间1.38±0.0036，相对标准偏差为0.26％；7号峰：相对保留时间1.49±0.0030，相对标准偏差为0.20％；8号峰：相对保留时间1.56±0.0023，相对标准偏差为0.15％；9号峰：相对保留时间1.61±0.0023，相对标准偏差为0.14％；10号峰：相对保留时间1.68±0.0022，相对标准偏差为0.13％；11号峰：相对保留时间1.80±0.0023，相对标准偏差为0.13％；12号峰：相对保留时间1.91±0.0019，相对标准偏差为0.10％；13号峰：相对保留时间2.02±0.0026，相对标准偏差为0.13％；14号峰：相对保留时间2.08±0.0035，相对标准偏差为0.17％；15号峰：相对保留时间2.21±0.0035，相对标准偏差为0.16％；16号峰：相对保留时间2.47±0.0042，相对标准偏差为0.17％；17号峰：相对保留时间3.07±0.0049，相对标准偏差为0.16％；18号峰：相对保留时间3.18±0.0060，相对标准偏差为0.19％；19号峰：相对保留时间3.30±0.0069，相对标准偏差为0.21％；20号峰：相对保留时间3.76±0.0087，相对标准偏差为0.23％。上述的咽喉清口含片的特征图谱，所述特征峰的归属为：5号峰为绿原酸，20号峰为次野鸢尾黄素。本专利技术还提供一种上述的咽喉清口含片的特征图谱在咽喉清口含片质量检测中的应用。本专利技术还提供一种咽喉清口含片的质量检测方法，包括将待测咽喉清口含片的高效液相色谱图与上述的咽喉清口含片的特征图谱进行比较的步骤。本专利技术的有益效果是：中药是在中医药理论指导下应用的，具有综合性和整体性特点，任何单一活性成分均不能反映中医用药所体现的整体疗效，尤其是复方制剂，是通过多成分之间的相互协同作用而发挥疗效，仅通过测定一个或几个指标性成分不能全面反映其内在质量，而中药特征图谱是一种较综合反映中药材或中药复方所包含的化学信息的分析方法。本专利技术中咽喉清口含片特征图谱的构建方法能有效的检测咽喉清口含片的特征图谱，更好表征制剂中所含的物质基础，能有效监控咽喉清口含片的质量；本专利技术获得的特征图谱比较全面、重复性佳、稳定性好且精密度高；采用本专利技术构建方法得到的特征图谱有20个特征共有峰，能够有效地表征咽喉清口含片的质量，有利于鉴别咽喉清口含片的真伪。附图说明图1为10批次咽喉清口含片的HPLC色谱图；图2为咽喉清口含片的特征图谱。具体实施方式以下将结合实施例对本专利技术的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本专利技术的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本专利技术的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本专利技术的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本专利技术保护的范围。实施例1：咽喉清口含片特征图谱的高效液相色谱法的建立1.1仪器与试剂：Waters2695高效液相色谱仪：四元泵，在线真空脱气系统，自动进样器，柱温箱，2998二极管阵列检测器，Empower3工作站，国家药典委员会中药色谱特征图谱相似度评价系统(2012版)，KQ3200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；METTLERTOLEVO十万分之一电子天秤。绿原酸对照品(批号110753-201314)、次野鸢尾黄素对照品(批号111557-200602)均购于中国药品食品检定研究院，甲醇、乙腈为色谱级。咽喉清口含片10批为深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院院内制剂，由广东五虎山本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种咽喉清口含片的特征图谱的构建方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)制备供试品溶液：取咽喉清口含片研碎，加入20～50体积份的甲醇得到每1mL含0.04～0.1g所述咽喉清口含片的溶液，提取后过滤取滤液蒸干，加入20体积份的水，后加入10～30体积份的乙酸乙酯进行萃取，取乙酸乙酯层蒸干，加入甲醇稀释至5～10体积份，过滤后取滤液作为供试品溶液；制备对照品溶液：称取绿原酸加入甲醇制得绿原酸对照品溶液；(2)分别取所述供试品溶液和所述对照品溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，记录0‑35min的色谱图，得到咽喉清口含片的特征谱图；所述色谱分析的色谱条件是：色谱分离柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为水‑乙腈洗脱液；采用梯度洗脱方式：0～5min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％，5～28min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％～57％，28～28.01min的洗脱液中乙腈体积百分含量为57％～13％，28.01～35min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％；检测波长为全波长扫描，2D通道选择260nm，柱温25～30℃，流速1.0mL，进样量10μL。

【技术特征摘要】
1.一种咽喉清口含片的特征图谱的构建方法，其特征在于，包含以下步骤：(1)制备供试品溶液：取咽喉清口含片研碎，加入20～50体积份的甲醇得到每1mL含0.04～0.1g所述咽喉清口含片的溶液，提取后过滤取滤液蒸干，加入20体积份的水，后加入10～30体积份的乙酸乙酯进行萃取，取乙酸乙酯层蒸干，加入甲醇稀释至5～10体积份，过滤后取滤液作为供试品溶液；制备对照品溶液：称取绿原酸加入甲醇制得绿原酸对照品溶液；(2)分别取所述供试品溶液和所述对照品溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，记录0-35min的色谱图，得到咽喉清口含片的特征谱图；所述色谱分析的色谱条件是：色谱分离柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为水-乙腈洗脱液；采用梯度洗脱方式：0～5min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％，5～28min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％～57％，28～28.01min的洗脱液中乙腈体积百分含量为57％～13％，28.01～35min的洗脱液中乙腈体积百分含量为13％；检测波长为全波长扫描，2D通道选择260nm，柱温25～30℃，流速1.0mL，进样量10μL。2.一种咽喉清口含片的特征图谱，其特征在于，采用如权利要求1所述的构建方法获得，所述特征谱图具有20个特征峰，以5号峰所代表的绿原酸为参照峰，各个特征峰相对保留时间和相对标准偏差为：1号峰：相对保留时间0.44±0.0029，相对标准偏差为0.66％；2号峰：相对保留时间0.49±0.0022，相对标准偏差为0.44％；3号峰：相对保留时间0.65±0.0010，相对标准偏差为0.16％；4号峰：相对保留时间0.78±0.0005，相对标准偏差为0.07％；5号峰：相对保留时...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文周，李一圣，邱书奇，
申请(专利权)人：李文周，深圳市耳鼻咽喉研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44